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蜡梅CCCH型锌指蛋白基因CpCZF1和CpCZF2的克隆及功能初步研究

摘要第7-11页
ABSTRACT第11-16页
第1章 文献综述第17-29页
    1.1 花的发育第17-24页
        1.1.1 植物成花诱导研究进展第17-23页
        1.1.2 花器官特征决定研究进展第23-24页
    1.2 植物CCCH型锌指蛋白研究进展第24-27页
        1.2.1 定义第24-25页
        1.2.2 分类及功能研究第25页
        1.2.3 CCCH型锌指蛋白在花发育中的作用第25-26页
        1.2.4 亚细胞定位研究第26页
        1.2.5 作用方式第26-27页
    1.3 酵母双杂交技术第27-28页
    1.4 蜡梅花发育研究进展第28-29页
第2章 引言第29-33页
    2.1 目的意义第29页
    2.2 技术路线第29-33页
第3章 蜡梅CCCH锌指蛋白基因CPCZF1的克隆及功能初步分析第33-71页
    3.1 材料第33-36页
        3.1.1 植物材料第33页
        3.1.2 载体和菌株第33页
        3.1.3 主要试剂及试剂盒来源第33-34页
        3.1.4 主要仪器和设备第34-35页
        3.1.5 实验引物第35-36页
    3.2 实验方法第36-51页
        3.2.1 蜡梅CpCZF1基因的克隆第36-40页
        3.2.2 蜡梅CpCZF1编码蛋白的生物信息学分析第40-41页
        3.2.3 亚细胞定位第41-44页
        3.2.4 CpCZF1基因在蜡梅中的表达分析第44-46页
        3.2.5 超表达载体构建及转化拟南芥第46-48页
        3.2.6 转录活性分析第48-49页
        3.2.7 启动子克隆及顺势作用元件分析第49-51页
    3.3 结果与分析第51-68页
        3.3.1 蜡梅CpCZF1基因cDNA、gDNA序列的获得及特征第51-52页
        3.3.2 CpCZF1蛋白性质及结构特征第52-53页
        3.3.3 蜡梅CpCZF1基因编码蛋白同源性分析第53-55页
        3.3.4 CpCZF1定位于细胞核第55-57页
        3.3.5 CpCZF1在蜡梅中的表达模式第57-59页
        3.3.6 超量表达蜡梅CpCZF1基因影响拟南芥花发育第59-65页
        3.3.7 CpCZF1在酵母细胞中具有转录抑制活性第65-66页
        3.3.8 CpCZF1启动子序列获得及顺式作用元件预测第66-68页
    3.4 小结第68-71页
第4章 蜡梅花酵母双杂交CDNA文库构建及筛选第71-93页
    4.1 实验材料第71-72页
        4.1.1 植物材料第71页
        4.1.2 试验引物第71页
        4.1.3 实验菌株及载体第71-72页
        4.1.4 实验试剂及试剂盒第72页
    4.2 实验方法第72-81页
        4.2.1 花酵母文库构建第72-75页
        4.2.2 诱饵载体构建及毒性和自激活检测第75-77页
        4.2.3 文库筛选第77-78页
        4.2.4 候选蛋白互作验证第78页
        4.2.5 BIFC验证第78-81页
    4.3 结果与分析第81-92页
        4.3.1 文库构建及质量检测第81-83页
        4.3.2 诱饵载体构建及毒性和自激活检测第83-86页
        4.3.3 文库筛选第86-92页
    4.4 小结第92-93页
第5章 CPCZF2基因功能初步分析第93-115页
    5.1 材料第93页
        5.1.1 植物材料第93页
        5.1.2 载体、菌株第93页
        5.1.3 主要试剂及试剂盒第93页
        5.1.4 引物第93页
    5.2 方法第93-97页
        5.2.1 CpCZF2基因cDNA及gDNA克隆第93-94页
        5.2.2 蜡梅CpCZF2编码蛋白的生物信息学分析第94页
        5.2.3 亚细胞定位第94页
        5.2.4 CpCZF2基因在蜡梅中的表达分析第94页
        5.2.5 CpCZF2基因在拟南芥中的超量表达第94-95页
        5.2.6 转录活性分析第95页
        5.2.7 启动子克隆及功能验证第95-97页
    5.3 结果与分析第97-113页
        5.3.1 CpCZF2全长cDNA及gDNA序列获得及特征第97-98页
        5.3.2 CpCZF2蛋白性质及结构第98-100页
        5.3.3 CpCZF2定位于细胞核第100-101页
        5.3.4 CpCZF2在蜡梅中的表达模式第101-103页
        5.3.5 超量表达蜡梅CpCZF2基因影响拟南芥花发育第103-107页
        5.3.6 CpCZF2在酵母细胞中具有转录抑制活性第107-108页
        5.3.7 蜡梅CpCZF2基因启动子的序列的获得及活性分析第108-113页
    5.4 小结第113-115页
第6章 讨论第115-123页
    6.1 蜡梅CCCH型锌指蛋白CPCZF1与花发育第115-116页
    6.2 CPCZF1与CPCZF2相互作用影响花发育第116-118页
    6.3 细胞核定位的CPCZF1及CPCZF2可能是转录抑制子第118-119页
    6.4 CPCZF1及CPCZF2可能影响正常四聚体的形成第119-120页
    6.5 CPCZF1及CPCZF2基因启动子具有激素诱导活性第120页
    6.6 CPCZF1及CPCZF2可能的作用机制第120-123页
第7章 总结第123-127页
    7.1 主要结果第123-124页
    7.2 主要结论第124-125页
    7.3 论文创新点第125页
    7.4 论文不足及进一步研究展望第125-127页
参考文献第127-134页
缩略词表第134-135页
附录第135-141页
致谢第141-143页
学习期间发表的论文及参与的科研项目第143页

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