摘要 | 第7-11页 |
ABSTRACT | 第11-16页 |
第1章 文献综述 | 第17-29页 |
1.1 花的发育 | 第17-24页 |
1.1.1 植物成花诱导研究进展 | 第17-23页 |
1.1.2 花器官特征决定研究进展 | 第23-24页 |
1.2 植物CCCH型锌指蛋白研究进展 | 第24-27页 |
1.2.1 定义 | 第24-25页 |
1.2.2 分类及功能研究 | 第25页 |
1.2.3 CCCH型锌指蛋白在花发育中的作用 | 第25-26页 |
1.2.4 亚细胞定位研究 | 第26页 |
1.2.5 作用方式 | 第26-27页 |
1.3 酵母双杂交技术 | 第27-28页 |
1.4 蜡梅花发育研究进展 | 第28-29页 |
第2章 引言 | 第29-33页 |
2.1 目的意义 | 第29页 |
2.2 技术路线 | 第29-33页 |
第3章 蜡梅CCCH锌指蛋白基因CPCZF1的克隆及功能初步分析 | 第33-71页 |
3.1 材料 | 第33-36页 |
3.1.1 植物材料 | 第33页 |
3.1.2 载体和菌株 | 第33页 |
3.1.3 主要试剂及试剂盒来源 | 第33-34页 |
3.1.4 主要仪器和设备 | 第34-35页 |
3.1.5 实验引物 | 第35-36页 |
3.2 实验方法 | 第36-51页 |
3.2.1 蜡梅CpCZF1基因的克隆 | 第36-40页 |
3.2.2 蜡梅CpCZF1编码蛋白的生物信息学分析 | 第40-41页 |
3.2.3 亚细胞定位 | 第41-44页 |
3.2.4 CpCZF1基因在蜡梅中的表达分析 | 第44-46页 |
3.2.5 超表达载体构建及转化拟南芥 | 第46-48页 |
3.2.6 转录活性分析 | 第48-49页 |
3.2.7 启动子克隆及顺势作用元件分析 | 第49-51页 |
3.3 结果与分析 | 第51-68页 |
3.3.1 蜡梅CpCZF1基因cDNA、gDNA序列的获得及特征 | 第51-52页 |
3.3.2 CpCZF1蛋白性质及结构特征 | 第52-53页 |
3.3.3 蜡梅CpCZF1基因编码蛋白同源性分析 | 第53-55页 |
3.3.4 CpCZF1定位于细胞核 | 第55-57页 |
3.3.5 CpCZF1在蜡梅中的表达模式 | 第57-59页 |
3.3.6 超量表达蜡梅CpCZF1基因影响拟南芥花发育 | 第59-65页 |
3.3.7 CpCZF1在酵母细胞中具有转录抑制活性 | 第65-66页 |
3.3.8 CpCZF1启动子序列获得及顺式作用元件预测 | 第66-68页 |
3.4 小结 | 第68-71页 |
第4章 蜡梅花酵母双杂交CDNA文库构建及筛选 | 第71-93页 |
4.1 实验材料 | 第71-72页 |
4.1.1 植物材料 | 第71页 |
4.1.2 试验引物 | 第71页 |
4.1.3 实验菌株及载体 | 第71-72页 |
4.1.4 实验试剂及试剂盒 | 第72页 |
4.2 实验方法 | 第72-81页 |
4.2.1 花酵母文库构建 | 第72-75页 |
4.2.2 诱饵载体构建及毒性和自激活检测 | 第75-77页 |
4.2.3 文库筛选 | 第77-78页 |
4.2.4 候选蛋白互作验证 | 第78页 |
4.2.5 BIFC验证 | 第78-81页 |
4.3 结果与分析 | 第81-92页 |
4.3.1 文库构建及质量检测 | 第81-83页 |
4.3.2 诱饵载体构建及毒性和自激活检测 | 第83-86页 |
4.3.3 文库筛选 | 第86-92页 |
4.4 小结 | 第92-93页 |
第5章 CPCZF2基因功能初步分析 | 第93-115页 |
5.1 材料 | 第93页 |
5.1.1 植物材料 | 第93页 |
5.1.2 载体、菌株 | 第93页 |
5.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第93页 |
5.1.4 引物 | 第93页 |
5.2 方法 | 第93-97页 |
5.2.1 CpCZF2基因cDNA及gDNA克隆 | 第93-94页 |
5.2.2 蜡梅CpCZF2编码蛋白的生物信息学分析 | 第94页 |
5.2.3 亚细胞定位 | 第94页 |
5.2.4 CpCZF2基因在蜡梅中的表达分析 | 第94页 |
5.2.5 CpCZF2基因在拟南芥中的超量表达 | 第94-95页 |
5.2.6 转录活性分析 | 第95页 |
5.2.7 启动子克隆及功能验证 | 第95-97页 |
5.3 结果与分析 | 第97-113页 |
5.3.1 CpCZF2全长cDNA及gDNA序列获得及特征 | 第97-98页 |
5.3.2 CpCZF2蛋白性质及结构 | 第98-100页 |
5.3.3 CpCZF2定位于细胞核 | 第100-101页 |
5.3.4 CpCZF2在蜡梅中的表达模式 | 第101-103页 |
5.3.5 超量表达蜡梅CpCZF2基因影响拟南芥花发育 | 第103-107页 |
5.3.6 CpCZF2在酵母细胞中具有转录抑制活性 | 第107-108页 |
5.3.7 蜡梅CpCZF2基因启动子的序列的获得及活性分析 | 第108-113页 |
5.4 小结 | 第113-115页 |
第6章 讨论 | 第115-123页 |
6.1 蜡梅CCCH型锌指蛋白CPCZF1与花发育 | 第115-116页 |
6.2 CPCZF1与CPCZF2相互作用影响花发育 | 第116-118页 |
6.3 细胞核定位的CPCZF1及CPCZF2可能是转录抑制子 | 第118-119页 |
6.4 CPCZF1及CPCZF2可能影响正常四聚体的形成 | 第119-120页 |
6.5 CPCZF1及CPCZF2基因启动子具有激素诱导活性 | 第120页 |
6.6 CPCZF1及CPCZF2可能的作用机制 | 第120-123页 |
第7章 总结 | 第123-127页 |
7.1 主要结果 | 第123-124页 |
7.2 主要结论 | 第124-125页 |
7.3 论文创新点 | 第125页 |
7.4 论文不足及进一步研究展望 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-134页 |
缩略词表 | 第134-135页 |
附录 | 第135-141页 |
致谢 | 第141-143页 |
学习期间发表的论文及参与的科研项目 | 第143页 |