摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-27页 |
1.1 肥胖与脂肪组织 | 第13-14页 |
1.2 抗素(resistin) | 第14-20页 |
1.2.1 抗素的发现及生物学特征 | 第14-15页 |
1.2.2 Resistin的受体研究 | 第15-17页 |
1.2.3 Resistin与糖脂代谢 | 第17-18页 |
1.2.4 Resistin与炎症反应 | 第18-20页 |
1.3 ACG蛋白激酶 | 第20-23页 |
1.3.1 蛋白激酶A家族(PKA) | 第21页 |
1.3.2 蛋白激酶C家族(PKCs) | 第21-22页 |
1.3.3 蛋白激酶G家族(PKG) | 第22-23页 |
1.4 线粒体 | 第23-26页 |
1.4.1 线粒体介导脂质代谢 | 第23页 |
1.4.2 线粒体促进脂肪组织生热 | 第23-24页 |
1.4.3 线粒体功能紊乱与肥胖 | 第24-26页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-47页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.1.1 实验细胞及动物 | 第27页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第27页 |
2.2 实验用仪器、试剂以及溶液配制方法 | 第27-31页 |
2.2.1 实验用仪器 | 第27-28页 |
2.2.2 实验用试剂 | 第28-29页 |
2.2.3 主要溶液配制 | 第29-31页 |
2.3 实验方法 | 第31-47页 |
2.3.1 细胞培养及转染 | 第31页 |
2.3.2 质粒的大量提取 | 第31-32页 |
2.3.3 基因组总DNA提取 | 第32页 |
2.3.4 总RNA提取,纯化,鉴定及反转录 | 第32-35页 |
2.3.5 基因克隆及点突变载体的构建 | 第35-38页 |
2.3.6 Western blot | 第38-40页 |
2.3.7 siRNA的构建 | 第40-41页 |
2.3.8 实时定量PCR | 第41-42页 |
2.3.9 PGC1α启动子活性的检测 | 第42-44页 |
2.3.10 试剂盒使用说明 | 第44-46页 |
2.3.11 相关抑制剂及抗体处理细胞 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-66页 |
3.1 Resistin疑似受体的功能验证 | 第47-48页 |
3.2 Resistin经由PKC激活PKG | 第48-53页 |
3.2.1 PKA不参与resistin调控线粒体 | 第48-49页 |
3.2.2 Resistin激活PKC和PKG | 第49-51页 |
3.2.3 Resistin经由PKC激活PKG | 第51-53页 |
3.3 Resistin下调线粒体通过激活NF-κB信号途径 | 第53-59页 |
3.3.1 基因芯片技术研究resistin可能作用的信号途径 | 第53-54页 |
3.3.2 Resistin下调线粒体数量通过激活NF-κB信号途径 | 第54-55页 |
3.3.3 Resistin下调线粒体数量通过激活P65 | 第55-57页 |
3.3.4 Resistin经由PKG激活p65 | 第57-59页 |
3.4 Resistin抑制PGC1α | 第59-62页 |
3.4.1 超表达PGC1α挽救线粒体数量被resistin下调 | 第59-60页 |
3.4.2 Resistin促进p65与PGC1α相互结合 | 第60-61页 |
3.4.3 p65下调PGC1α启动子的活性 | 第61-62页 |
3.5 Resistin受体信号途径的进一步探索 | 第62-66页 |
3.5.1 p62参与resistin对线粒体数量的调控 | 第62-64页 |
3.5.2 TNFR1可能参与resistin对线粒体数量的调控 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-69页 |
5 结论与创新点 | 第69-71页 |
5.1 结论 | 第69页 |
5.2 创新点 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
研究生在读期间论文发表的情况 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |