| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 研究背景 | 第13-33页 |
| 1.1 “腺苷酸能量转换”调节激酶的发现 | 第13-14页 |
| 1.2 AMPK的亚基结构和组织分布 | 第14-19页 |
| 1.3 AMPK活性的调节 | 第19-25页 |
| 1.3.1 AMPK的上游激酶 | 第20-21页 |
| 1.3.2 通过AMP和ATP的调节 | 第21-22页 |
| 1.3.3 AMPK复合物自身的调节 | 第22页 |
| 1.3.4 激活剂 | 第22-24页 |
| 1.3.5 通过AMP非依赖通路调节 | 第24-25页 |
| 1.4 AMPK下游靶标和生物学效应 | 第25-27页 |
| 1.4.1 AMPK对糖代谢的调节 | 第25页 |
| 1.4.2 AMPK对脂类代谢的调节 | 第25-26页 |
| 1.4.3 AMPK对蛋白质代谢的调节 | 第26-27页 |
| 1.4.4 AMPK对细胞生长和凋亡的调节 | 第27页 |
| 1.5 AMPK失调引起的疾病 | 第27-33页 |
| 1.5.1 肥胖及代谢综合症 | 第28-29页 |
| 1.5.2 心血管疾病和炎症 | 第29-30页 |
| 1.5.3 癌症 | 第30-31页 |
| 1.5.4 痴呆、神经再生和中风 | 第31页 |
| 1.5.5 衰老与长寿 | 第31-33页 |
| 第二章 实验材料、设备与方法 | 第33-47页 |
| 2.1 本研究中所用重组质粒的构建 | 第33-37页 |
| 2.2 本研究中所用蛋白质的表达和纯化 | 第37-40页 |
| 2.2.1 蛋白质表达的检测 | 第38-39页 |
| 2.2.2 蛋白质的超量表达和纯化 | 第39-40页 |
| 2.3 蛋白质结晶和数据收集 | 第40-44页 |
| 2.3.1 蛋白质结晶的原理与方法 | 第40-42页 |
| 2.3.2 晶体的初筛与优化 | 第42-43页 |
| 2.3.3 衍射数据的收集、晶体结构的解析与精修 | 第43-44页 |
| 2.4 Alpha Screen实验 | 第44-45页 |
| 2.5 蛋白质磷酸化和酶活性检测 | 第45-46页 |
| 2.6 磷酸酶反应和免疫印迹 | 第46-47页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第47-86页 |
| 3.1 人源AMPK复合物的晶体结构研究 | 第47-59页 |
| 3.1.1 人源AMPK全长序列复合物的表达、纯化与结晶 | 第47-50页 |
| 3.1.2 人源AMPK融合蛋白的表达、纯化与结晶 | 第50-54页 |
| 3.1.3 人源AMPK截短的三亚基共表达复合物的表达、纯化与结晶 | 第54-59页 |
| 3.2 核苷酸对于AMPK的调节 | 第59-69页 |
| 3.2.1 AMP和ATP的结合会诱导AMPK构象发生明显改变 | 第59-62页 |
| 3.2.2 在核苷酸的变构调节中α-hook区域没有很大的贡献 | 第62-65页 |
| 3.2.3 核苷酸结合调节AID-RIM和核心复合物(core AMPK)的相互作用 | 第65-69页 |
| 3.3 人源AMPK催化亚基α 1的KD-AID片段的晶体结构研究 | 第69-81页 |
| 3.3.1 人源催化亚基KD-AID片段的表达、纯化与结晶 | 第70-73页 |
| 3.3.2 人源AMPK催化亚基KD-AID片段的衍射数据收集以及数据处理 | 第73-74页 |
| 3.3.3 人源AMPK催化亚基KD-AID的结构 | 第74-77页 |
| 3.3.4 人源AMPK的自动抑制结构域(AID)对于催化结构域(KD)具有酶活性的调节功能 | 第77-81页 |
| 3.4 AMP的结合对AMPK复合物中AID-KD的相互作用的影响 | 第81-86页 |
| 第四章 实验结果和讨论的总结 | 第86-89页 |
| 本文小结 | 第89-91页 |
| 附录 | 第91-101页 |
| 参考文献 | 第101-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 在读期间（待）发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第113页 |
