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橘色双冠丽鱼体色发育变化及体色相关基因TYR的克隆与表达研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 引言第11-21页
    1. 胚胎与体色细胞的发育第11-12页
    2. 色素细胞的类型与分布第12页
    3. 影响鱼类体色色素的因素第12-16页
        3.1 自身因素第12-13页
        3.2 饲料因素第13-14页
        3.3 着色剂来源与质量第14页
        3.4 着色水平和着色时间第14-15页
        3.5 环境因素第15-16页
            3.5.1 光照第15页
            3.5.2 水温第15页
            3.5.3 水的深度第15页
            3.5.4 重金属污染第15-16页
            3.5.5 背景色第16页
            3.5.6 其他因子第16页
    4. 改变鱼类体色的方法第16-17页
        4.1 性反转法第16-17页
        4.2 人工雌核发育第17页
        4.3 转基因技术第17页
    5. 鱼类体色的分子机理第17-19页
    6. 研究的意义和设计思路第19-21页
        6.1 研究意义第19-20页
        6.2 设计思路第20-21页
第二章 橘色双冠丽鱼早期胚胎发育的观察第21-29页
    1. 材料与方法第21页
        1.1 实验材料第21页
        1.2 观察方法第21页
    2. 结果第21-25页
        2.1 受精卵第21-22页
        2.2 卵裂期第22页
        2.3 囊胚期第22页
        2.4 原肠期第22-23页
        2.5 神经胚期第23页
        2.6 器官形成期第23页
        2.7 血液循环期第23页
        2.8 出膜期第23-25页
    3. 讨论第25-29页
第三章 不同环境对橘色双冠丽鱼褪色率的影响第29-35页
    1. 实验材料与方法第29-30页
        1.1 实验材料第29页
        1.2 实验条件和饲养管理第29-30页
        1.3 实验方法第30页
    2. 结果第30-32页
        2.1 食物营养对体色的影响第30-31页
        2.2 光照对体色的影响第31页
        2.3 密度对体色的影响第31-32页
    3. 讨论第32-34页
        3.1 食物营养对橘色双冠丽鱼体色的影响第32-33页
        3.2 光照对橘色双冠丽鱼体色的影响第33页
        3.3 密度对体色的影响第33-34页
    4. 小结第34-35页
第四章 橘色双冠丽鱼TYR基因的克隆及表达分析第35-55页
    1. 实验材料和方法第35-44页
        1.1 实验材料第35-36页
            1.1.1 样品采集第35页
            1.1.2 实验试剂第35-36页
            1.1.3 实验仪器第36页
        1.2 实验方法第36-44页
            1.2.1 总RNA的提取第36-37页
            1.2.2 RNA质量的鉴定第37页
                1.2.2.1 RNA完整性检测第37页
                1.2.2.2 RNA纯度及浓度检测第37页
            1.2.3 反转录反应第37-38页
            1.2.4 TYR基因CDS区扩增第38页
            1.2.5 RACE引物设计第38页
            1.2.6 3’RACE实验第38-40页
                1.2.6.1 3’RACE- c DNA合成第38-39页
                1.2.6.2 3′RACE扩增反应第39-40页
            1.2.7 5’RACE实验第40-41页
                1.2.7.1 5’RACE-c DNA合成第40页
                1.2.7.2 5′RACE扩增反应第40-41页
            1.2.8 TYR原核表达载体的构建第41-42页
            1.2.9 重组TYR在大肠杆菌中的表达第42页
            1.2.10 Western Blot检测第42页
            1.2.11 序列分析第42-43页
            1.2.12 q RT-PCR分析第43-44页
    2. 结果第44-52页
        2.1 TYR基因c DNA和编码蛋白序列分析第44-46页
        2.2 同源性比较与系统发育树第46-47页
        2.3 TYR基因表达差异分析第47-49页
            2.3.1 胚胎不同时期TYR基因的表达差异第47-48页
            2.3.2 三个典型体色过渡期TYR基因的表达变化第48页
            2.3.3 不同组织表达差异第48-49页
        2.4 TYR编码蛋白的基本理化性质预测第49页
        2.5 原核表达载体的构建和重组子鉴定第49-50页
        2.6 SDS-PAGE分析第50-52页
    3. 讨论第52-54页
        3.1 序列分析第52-53页
        3.2 组织表达差异分析第53-54页
        3.3 原核表达分析第54页
    4. 小结第54-55页
结论第55-57页
    1. 橘色双冠丽鱼早期胚胎发育的观察第55页
    2. 不同环境对橘色双冠丽鱼褪色率的影响第55页
    3. 橘色双冠丽鱼TYR基因的克隆及表达分析第55-57页
参考文献第57-64页
附录:研究生期间发表论文第64-65页
致谢第65页

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