| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第11-19页 |
| 1 补体C3研究进展 | 第11-13页 |
| 2 罗非鱼链球菌病疫苗的研究进展 | 第13-15页 |
| 2.1 灭活疫苗 | 第13页 |
| 2.2 弱毒疫苗 | 第13-14页 |
| 2.3 基因工程亚单位疫苗 | 第14页 |
| 2.4 DNA疫苗 | 第14-15页 |
| 3 无乳链球菌C5a肽酶（Scp B）研究进展 | 第15页 |
| 4. 本研究的目的意义及技术路线 | 第15-19页 |
| 第一章 尼罗罗非鱼补体C3基因的克隆及序列分析 | 第19-37页 |
| 1 材料与方法 | 第19-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1.1 实验鱼 | 第19页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-28页 |
| 1.2.1 引物设计 | 第20-21页 |
| 1.2.2 尼罗罗非鱼组织总RNA提取 | 第21-22页 |
| 1.2.3 cDNA合成 | 第22-24页 |
| 1.2.4 补体C3基因的c DNA克隆及验证 | 第24-25页 |
| 1.2.5 PCR产物琼脂糖凝胶回收 | 第25-26页 |
| 1.2.6 PCR纯化产物的克隆 | 第26页 |
| 1.2.7 连接产物的转化 | 第26-27页 |
| 1.2.8 阳性菌落检测及测序 | 第27页 |
| 1.2.9 补体C3序列分析 | 第27页 |
| 1.2.10 补体C3氨基酸序列同源性比较 | 第27-28页 |
| 2 结果 | 第28-35页 |
| 2.1 尼罗罗非鱼组织总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2 补体C3基因的c DNA克隆 | 第28-33页 |
| 2.3 同源比较和系统进化分析 | 第33-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第二章 Scp B免疫及GBS人工感染前后的罗非鱼补体C3的组织表达分析 | 第37-52页 |
| 1 材料与方法 | 第37-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 1.1.1 实验鱼及免疫蛋白 | 第37页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第37-39页 |
| 1.2 实验方法 | 第39-45页 |
| 1.2.1 Scp B蛋白的诱导表达及包涵体复性 | 第39-40页 |
| 1.2.2 重组蛋白纯化 | 第40-42页 |
| 1.2.3 Scp B蛋白的Western blot分析 | 第42-43页 |
| 1.2.4 Scp B蛋白疫苗制备 | 第43页 |
| 1.2.5 罗非鱼补体C3基因组织表达分析 | 第43-45页 |
| 1.2.6 Scp B免疫及GBS人工感染后的组织表达分析 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-51页 |
| 2.1 Scp B蛋白疫苗制备 | 第45-47页 |
| 2.2 健康尼罗罗非鱼补体C3基因的组织表达 | 第47-48页 |
| 2.3 Scp B免疫及GBS人工感染后的组织表达分析 | 第48-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 第三章 补体C3肝脏组织定位分析 | 第52-61页 |
| 1 材料与方法 | 第52-56页 |
| 1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 1.1.1 实验用鱼 | 第52页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第52-53页 |
| 1.2 实验方法 | 第53-56页 |
| 1.2.1 RNA探针制备 | 第53-54页 |
| 1.2.2 组织包埋与冷冻切片 | 第54-55页 |
| 1.2.3 原位杂交实验 | 第55-56页 |
| 2 结果 | 第56-60页 |
| 2.1 RNA探针构建 | 第56-57页 |
| 2.2 补体C3基因在肝脏组织定位分析 | 第57-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录一 缩略词表 | 第68-69页 |
| 附录二 在研期间发表的论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
