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人肝细胞生长因子诱导非小细胞肺癌细胞对厄洛替尼耐药及机制研究

中文摘要第6-10页
Abstract第10-14页
英文缩略语表第15-21页
前言第21-26页
第一部分 人肝细胞生长因子诱导非小细胞肺癌细胞对厄洛替尼耐药及机制的体外研究第26-49页
    第一章 前言第26-27页
    第二章 材料与方法第27-34页
        2.1. 实验材料与仪器第27-28页
            2.1.1 细胞株第27页
            2.1.2 实验试剂第27页
            2.1.3 实验仪器第27-28页
        2.2 实验方法第28-34页
            2.2.1 细胞复苏和传代培养第28页
            2.2.2 药物配置第28-29页
            2.2.3 MTT法实验检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞增殖的影响第29页
            2.2.4 流式细胞术检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞凋亡的影响第29页
            2.2.5 流式细胞术检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞周期的影响第29-30页
            2.2.6 提取细胞总蛋白第30页
            2.2.7 BCA蛋白定量第30-31页
            2.2.8 Western blotting检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞内EGFR和c-Met及其下游通道蛋白表达的影响第31-32页
            2.2.9 慢病毒包装干扰RNA感染NSCLC细胞株第32页
            2.2.10 RT-PCR第32-33页
            2.2.11 统计学处理方法第33-34页
    第三章 实验结果第34-43页
        3.1 HGF诱导NSCLC细胞对厄洛替尼耐药第34-38页
            3.1.1 不同NSCLC细胞p-Met及c-Met的表达水平第34页
            3.1.2 HGF刺激不同时间对NSCLC细胞中c-Met及其下游通道蛋白表达水平第34-35页
            3.1.3 厄洛替尼或/和HGF处理的药物浓度-生长曲线第35-36页
            3.1.4 厄洛替尼或/和HGF处理对NSCLC细胞凋亡的影响第36页
            3.1.5 厄洛替尼或/和HGF处理对NSCLC细胞周期的影响第36-37页
            3.1.6 厄洛替尼或/和HGF处理对NSCLC细胞中c-Met及其下游通道蛋白表达的影响第37-38页
        3.2 HGF激活c-Met磷酸化及其下游通道蛋白第38-43页
            3.2.1 慢病毒包装干扰RNA感染NSCLC细胞第39页
            3.2.2 RT-PCR检测干扰后c-Met-mRNA及蛋白的表达第39-40页
            3.2.3 干扰c-Met对NSCLC细胞增殖的影响第40-41页
            3.2.4 厄洛替尼或/和HGF处理c-Met-shRNA感染的NSCLC细胞中c-Met及其下游通道蛋白表达的影响第41-43页
    第四章 讨论第43-48页
    第五章 结论第48-49页
第二部分 人肝细胞生长因子诱导非小细胞肺癌细胞对厄洛替尼耐药及机制的体内研究第49-69页
    第一章 前言第49-50页
    第二章 材料与方法第50-56页
        2.1 实验材料与仪器第50-51页
            2.1.1 细胞株第50页
            2.1.2 实验动物第50页
            2.1.3 实验试剂第50页
            2.1.4 实验仪器第50-51页
        2.2 试剂配制第51页
            2.2.1 厄洛替尼原料第51页
            2.2.2 厄洛替尼灌胃用药第51页
            2.2.3 配制含双抗及10%含胎牛血清DMEM培养液第51页
        2.3 实验方法第51-56页
            2.3.1 细胞复苏和传代培养第51-52页
            2.3.2 ELISA法检测细胞培养上清液中HGF浓度第52页
            2.3.3 提取细胞总蛋白第52页
            2.3.4 BCA蛋白定量第52-53页
            2.3.5 Western Blotting法检测MRC-5细胞培养上清液诱导PC9、H292细胞c-Met及下游信号通道蛋白表达情况第53-54页
            2.3.6 裸鼠移植瘤模型的建立及药物抑瘤的分析第54-55页
            2.3.7 免疫组化法检测移植瘤组织中c-Met及下游信号通道蛋白表达水平第55页
            2.3.8 统计学处理方法第55-56页
    第三章 实验结果第56-64页
        3.1 ELISA法检测细胞上清液中HGF浓度结果第56页
        3.2 MRC-5细胞培养上清液中的HGF对NSCLC细胞c-Met及其下游通道蛋白的影响第56-57页
        3.3 各组不同时间点PC9、H292细胞移植瘤体积比较第57-59页
        3.4 各组PC9、H292细胞移植瘤重量比较第59-61页
        3.5 移植瘤组织中c-Met及下游信号通道蛋白表达水平第61-64页
    第四章 讨论第64-68页
    第五章 结论第68-69页
结论第69-70页
参考文献第70-78页
致谢第78-79页
综述第79-102页
    文献综述一第79-94页
        参考文献第88-94页
    文献综述二第94-102页
        参考文献第99-102页
附录A (攻读学位期间发表论文目录)第102页

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