中文摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
英文缩略语表 | 第15-21页 |
前言 | 第21-26页 |
第一部分 人肝细胞生长因子诱导非小细胞肺癌细胞对厄洛替尼耐药及机制的体外研究 | 第26-49页 |
第一章 前言 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-34页 |
2.1. 实验材料与仪器 | 第27-28页 |
2.1.1 细胞株 | 第27页 |
2.1.2 实验试剂 | 第27页 |
2.1.3 实验仪器 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-34页 |
2.2.1 细胞复苏和传代培养 | 第28页 |
2.2.2 药物配置 | 第28-29页 |
2.2.3 MTT法实验检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞增殖的影响 | 第29页 |
2.2.4 流式细胞术检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞凋亡的影响 | 第29页 |
2.2.5 流式细胞术检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞周期的影响 | 第29-30页 |
2.2.6 提取细胞总蛋白 | 第30页 |
2.2.7 BCA蛋白定量 | 第30-31页 |
2.2.8 Western blotting检测HGF与厄洛替尼单独或联用对NSCLC细胞内EGFR和c-Met及其下游通道蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
2.2.9 慢病毒包装干扰RNA感染NSCLC细胞株 | 第32页 |
2.2.10 RT-PCR | 第32-33页 |
2.2.11 统计学处理方法 | 第33-34页 |
第三章 实验结果 | 第34-43页 |
3.1 HGF诱导NSCLC细胞对厄洛替尼耐药 | 第34-38页 |
3.1.1 不同NSCLC细胞p-Met及c-Met的表达水平 | 第34页 |
3.1.2 HGF刺激不同时间对NSCLC细胞中c-Met及其下游通道蛋白表达水平 | 第34-35页 |
3.1.3 厄洛替尼或/和HGF处理的药物浓度-生长曲线 | 第35-36页 |
3.1.4 厄洛替尼或/和HGF处理对NSCLC细胞凋亡的影响 | 第36页 |
3.1.5 厄洛替尼或/和HGF处理对NSCLC细胞周期的影响 | 第36-37页 |
3.1.6 厄洛替尼或/和HGF处理对NSCLC细胞中c-Met及其下游通道蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
3.2 HGF激活c-Met磷酸化及其下游通道蛋白 | 第38-43页 |
3.2.1 慢病毒包装干扰RNA感染NSCLC细胞 | 第39页 |
3.2.2 RT-PCR检测干扰后c-Met-mRNA及蛋白的表达 | 第39-40页 |
3.2.3 干扰c-Met对NSCLC细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
3.2.4 厄洛替尼或/和HGF处理c-Met-shRNA感染的NSCLC细胞中c-Met及其下游通道蛋白表达的影响 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-48页 |
第五章 结论 | 第48-49页 |
第二部分 人肝细胞生长因子诱导非小细胞肺癌细胞对厄洛替尼耐药及机制的体内研究 | 第49-69页 |
第一章 前言 | 第49-50页 |
第二章 材料与方法 | 第50-56页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第50-51页 |
2.1.1 细胞株 | 第50页 |
2.1.2 实验动物 | 第50页 |
2.1.3 实验试剂 | 第50页 |
2.1.4 实验仪器 | 第50-51页 |
2.2 试剂配制 | 第51页 |
2.2.1 厄洛替尼原料 | 第51页 |
2.2.2 厄洛替尼灌胃用药 | 第51页 |
2.2.3 配制含双抗及10%含胎牛血清DMEM培养液 | 第51页 |
2.3 实验方法 | 第51-56页 |
2.3.1 细胞复苏和传代培养 | 第51-52页 |
2.3.2 ELISA法检测细胞培养上清液中HGF浓度 | 第52页 |
2.3.3 提取细胞总蛋白 | 第52页 |
2.3.4 BCA蛋白定量 | 第52-53页 |
2.3.5 Western Blotting法检测MRC-5细胞培养上清液诱导PC9、H292细胞c-Met及下游信号通道蛋白表达情况 | 第53-54页 |
2.3.6 裸鼠移植瘤模型的建立及药物抑瘤的分析 | 第54-55页 |
2.3.7 免疫组化法检测移植瘤组织中c-Met及下游信号通道蛋白表达水平 | 第55页 |
2.3.8 统计学处理方法 | 第55-56页 |
第三章 实验结果 | 第56-64页 |
3.1 ELISA法检测细胞上清液中HGF浓度结果 | 第56页 |
3.2 MRC-5细胞培养上清液中的HGF对NSCLC细胞c-Met及其下游通道蛋白的影响 | 第56-57页 |
3.3 各组不同时间点PC9、H292细胞移植瘤体积比较 | 第57-59页 |
3.4 各组PC9、H292细胞移植瘤重量比较 | 第59-61页 |
3.5 移植瘤组织中c-Met及下游信号通道蛋白表达水平 | 第61-64页 |
第四章 讨论 | 第64-68页 |
第五章 结论 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
综述 | 第79-102页 |
文献综述一 | 第79-94页 |
参考文献 | 第88-94页 |
文献综述二 | 第94-102页 |
参考文献 | 第99-102页 |
附录A (攻读学位期间发表论文目录) | 第102页 |