| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-28页 |
| 1.1 昆虫几丁质及其降解系统 | 第11-14页 |
| 1.1.1 几丁质 | 第11页 |
| 1.1.2 几丁质的结构 | 第11页 |
| 1.1.3 几丁质的分布 | 第11-12页 |
| 1.1.4 昆虫几丁质的降解 | 第12-14页 |
| 1.2 昆虫几丁质酶 | 第14-19页 |
| 1.2.1 18家族几丁质酶 | 第14页 |
| 1.2.2 昆虫几丁质酶的分类 | 第14-16页 |
| 1.2.3 昆虫几丁质酶的晶体结构 | 第16-17页 |
| 1.2.4 昆虫几丁质酶的序列保守性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 昆虫几丁质酶的生理功能 | 第18-19页 |
| 1.3 20家族β-N-乙酰己糖胺酶 | 第19-22页 |
| 1.3.1 20家族β-N-乙酰己糖胺酶概述 | 第19页 |
| 1.3.2 昆虫20家族β-N-乙酰己糖胺酶的分类 | 第19页 |
| 1.3.3 昆虫20家族β-N-乙酰己糖胺酶的晶体结构 | 第19-21页 |
| 1.3.4 昆虫20家族β-N-乙酰己糖胺酶的生理功能 | 第21-22页 |
| 1.4 18家族几丁质酶及20家族β-N-乙酰己糖胺酶的抑制剂 | 第22-25页 |
| 1.4.1 18家族几丁质酶的抑制剂 | 第22-24页 |
| 1.4.2 20家族β-N-乙酰己糖胺酶的抑制剂 | 第24-25页 |
| 1.5 本论文的选题依据和研究内容 | 第25-28页 |
| 1.5.1 选题依据 | 第25-27页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 2 亚洲玉米螟Ⅳ家族几丁质酶基因OfCHTⅣ的调取及序列分析 | 第28-37页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 总RNA的提取与cDNA合成 | 第28-29页 |
| 2.2.2 同源序列的获取 | 第29-30页 |
| 2.2.3 3'RACE获得3'端序列 | 第30页 |
| 2.2.4 5'RACE获得5'端序列 | 第30-31页 |
| 2.2.5 序列分析 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第32-36页 |
| 2.3.1 亚洲玉米螟Ⅳ家族几丁质酶基因OfCHTIV | 第32页 |
| 2.3.2 OfCHTIV编码蛋白质性质的预测 | 第32页 |
| 2.3.3 OfCHTIV的进化分析 | 第32-34页 |
| 2.3.4 OfCHTIV编码氨基酸的多重序列比对 | 第34-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 3 亚洲玉米螟OfChtⅣ的重组表达、分离纯化与性质表征 | 第37-50页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第37-41页 |
| 3.2.1 pPIC9-OfChtⅣ表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.2 pPIC9-OfChtⅣ表达载体转化毕赤酵母GS115 | 第38页 |
| 3.2.3 重组OfChtⅣ的诱导表达 | 第38-39页 |
| 3.2.4 重组OfChtⅣ的分离纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.5 重组OfChtⅣ的糖基化测定 | 第40页 |
| 3.2.6 重组OfChtⅣ的酶活测定 | 第40-41页 |
| 3.2.7 重组OfChtⅣ的最适pH测定 | 第41页 |
| 3.2.8 重组OfChtⅣ的动力学参数测定 | 第41页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第41-48页 |
| 3.3.1 pPIC9-OfChtⅣ载体的构建和酵母的转化 | 第41-43页 |
| 3.3.2 重组OfChtⅣ的诱导表达 | 第43页 |
| 3.3.3 重组OfChtⅣ的分离纯化 | 第43-44页 |
| 3.3.4 重组OfChtⅣ的糖基化分析 | 第44-45页 |
| 3.3.5 重组OfChtⅣ反应的最适pH | 第45-46页 |
| 3.3.6 重组OfChtⅣ的动力学参数 | 第46-47页 |
| 3.3.7 重组OfChtⅣ及OfChtⅠ生化性质比较 | 第47-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-50页 |
| 4 OfChtⅣ与亚洲玉米螟β-N-乙酰己糖胺酶OfHex1抑制剂的研究 | 第50-62页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第50-53页 |
| 4.2.1 萘酰亚胺类化合物对OfChtⅣ抑制活性的测定 | 第50-52页 |
| 4.2.2 壳寡糖的来源 | 第52页 |
| 4.2.3 壳寡糖对OfChtⅣ抑制活性的测定 | 第52页 |
| 4.2.4 NGT及其衍生物对OfHex1抑制活性的测定 | 第52-53页 |
| 4.2.5 OfHex1-NGT复合物晶体的获得 | 第53页 |
| 4.2.6 NGT与20家族β-N-乙酰己糖胺酶形成的复合物结构的比较 | 第53页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第53-60页 |
| 4.3.1 萘酰亚胺类化合物对OfChtⅣ的抑制 | 第53-54页 |
| 4.3.2 壳寡糖对OfChtⅣ的抑制 | 第54-56页 |
| 4.3.3 OfHex1-NGT复合物晶体揭示NGT与OfHex1的结合模式 | 第56-57页 |
| 4.3.4 NGT与20家族β-N-乙酰己糖胺酶形成的复合物结构的比较 | 第57-59页 |
| 4.3.5 OfHex1高效抑制剂NMAGT的设计及其抑制活性的评价 | 第59-60页 |
| 4.4 小结 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附录a | 第69-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
