摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 禽流感病毒研究进展 | 第10-18页 |
1.1 禽流感概述 | 第10-12页 |
1.1.1 病原学 | 第10-11页 |
1.1.2 中国H9N2禽流感流行现状 | 第11-12页 |
1.2 AIV的致病机理 | 第12页 |
1.3 细胞病理学机制 | 第12-13页 |
1.4 低致病性禽流感引起的病理学变化 | 第13-14页 |
1.4.1 临床症状 | 第13-14页 |
1.4.2 大体病变 | 第14页 |
1.4.3 组织学病变和免疫功能变化 | 第14页 |
1.5 流感病毒感染宿主后对细菌黏附的影响 | 第14-15页 |
1.6 细胞因子造成免疫损伤 | 第15-17页 |
1.7 鸡巨噬细胞的功能与作用 | 第17页 |
1.8 目的与意义 | 第17-18页 |
第二章 HD-11细胞感染H9N2 AIV后先天性免疫相关基因mRNA表达的变化 | 第18-37页 |
2.1 材料 | 第18-20页 |
2.1.1 病毒和细胞 | 第18-19页 |
2.1.2 试验动物 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第19页 |
2.1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 病毒的增殖 | 第20页 |
2.2.2 H9N2 AIV感染HD-11细胞后CPE观察及血凝价测定 | 第20页 |
2.2.3 H9N2 AIV TCID50的测定 | 第20-21页 |
2.2.4 直接免疫荧光检测细胞中病毒抗原 | 第21页 |
2.2.4.1 直接免疫荧光 | 第21页 |
2.2.4.2 结果的判定 | 第21页 |
2.2.5 引物的设计及合成 | 第21-22页 |
2.2.6 H9N2 AIV感染HD-11细胞后chTLR7,chMDA5 mRNA表达量测定 | 第22-24页 |
2.2.6.1 细胞总RNA的提取 | 第23页 |
2.2.6.2 cDNA的合成 | 第23页 |
2.2.6.3 实时荧光定量PCR反应条件优化 | 第23-24页 |
2.2.6.4 实时荧光定量PCR反应条件 | 第24页 |
2.2.7 H9N2 AIV感染HD-11细胞后IL-1β,IL-2,IL-6,IFN-α,IFN-β 细胞因子mRNA表达量测定 | 第24页 |
2.2.8 H9N2 AIV感染HD-11细胞后XCL1,CXCLi1,CXCLi2趋化因子mRNA表达量测定 | 第24页 |
2.2.9 H9N2 AIV感染HD-11细胞后iNOS mRNA表达量测定 | 第24页 |
2.2.10 数据分析 | 第24-25页 |
2.3 结果 | 第25-35页 |
2.3.1 细胞病变(CPE)的观察 | 第25页 |
2.3.2 H9N2 AIV TCID50检测结果 | 第25-26页 |
2.3.3 免疫荧光染色结果 | 第26页 |
2.3.4 chTLR7,chMDA5 mRNA相对荧光定量结果 | 第26-28页 |
2.3.4.1 chTLR7,chMDA5 mRNA以及 β-actin的溶解曲线 | 第26-27页 |
2.3.4.2 chTLR7,MDA5 mRNA随着时间变化相对表达结果 | 第27-28页 |
2.3.5 IL-1β,IL-2,IL-6, IFN-α, IFN-β 细胞因子mRNA表达的变化 | 第28-33页 |
2.3.5.1 IL-1β,IL-2,IL-6, IFN-α,IFN-β 细胞因子mRNA的溶解曲线 .. 20 | 第29-30页 |
2.3.5.2 IL-1β,IL-2, IL-6,IFN-α,IFN-β mRNA随着时间变化相对表达结果 | 第30-33页 |
2.3.6 XCL1,CXCLi1,CXCLi2趋化因子mRNA表达的变化 | 第33-34页 |
2.3.7 iNOS mRNA表达的变化 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-36页 |
2.5 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
作者简介 | 第44页 |