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HD-11细胞感染H9N2流感病毒后先天性免疫相关基因mRNA表达变化的研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 禽流感病毒研究进展第10-18页
    1.1 禽流感概述第10-12页
        1.1.1 病原学第10-11页
        1.1.2 中国H9N2禽流感流行现状第11-12页
    1.2 AIV的致病机理第12页
    1.3 细胞病理学机制第12-13页
    1.4 低致病性禽流感引起的病理学变化第13-14页
        1.4.1 临床症状第13-14页
        1.4.2 大体病变第14页
        1.4.3 组织学病变和免疫功能变化第14页
    1.5 流感病毒感染宿主后对细菌黏附的影响第14-15页
    1.6 细胞因子造成免疫损伤第15-17页
    1.7 鸡巨噬细胞的功能与作用第17页
    1.8 目的与意义第17-18页
第二章 HD-11细胞感染H9N2 AIV后先天性免疫相关基因mRNA表达的变化第18-37页
    2.1 材料第18-20页
        2.1.1 病毒和细胞第18-19页
        2.1.2 试验动物第19页
        2.1.3 主要试剂第19页
        2.1.4 主要溶液的配制第19页
        2.1.5 主要仪器第19-20页
    2.2 实验方法第20-25页
        2.2.1 病毒的增殖第20页
        2.2.2 H9N2 AIV感染HD-11细胞后CPE观察及血凝价测定第20页
        2.2.3 H9N2 AIV TCID50的测定第20-21页
        2.2.4 直接免疫荧光检测细胞中病毒抗原第21页
            2.2.4.1 直接免疫荧光第21页
            2.2.4.2 结果的判定第21页
        2.2.5 引物的设计及合成第21-22页
        2.2.6 H9N2 AIV感染HD-11细胞后chTLR7,chMDA5 mRNA表达量测定第22-24页
            2.2.6.1 细胞总RNA的提取第23页
            2.2.6.2 cDNA的合成第23页
            2.2.6.3 实时荧光定量PCR反应条件优化第23-24页
            2.2.6.4 实时荧光定量PCR反应条件第24页
        2.2.7 H9N2 AIV感染HD-11细胞后IL-1β,IL-2,IL-6,IFN-α,IFN-β 细胞因子mRNA表达量测定第24页
        2.2.8 H9N2 AIV感染HD-11细胞后XCL1,CXCLi1,CXCLi2趋化因子mRNA表达量测定第24页
        2.2.9 H9N2 AIV感染HD-11细胞后iNOS mRNA表达量测定第24页
        2.2.10 数据分析第24-25页
    2.3 结果第25-35页
        2.3.1 细胞病变(CPE)的观察第25页
        2.3.2 H9N2 AIV TCID50检测结果第25-26页
        2.3.3 免疫荧光染色结果第26页
        2.3.4 chTLR7,chMDA5 mRNA相对荧光定量结果第26-28页
            2.3.4.1 chTLR7,chMDA5 mRNA以及 β-actin的溶解曲线第26-27页
            2.3.4.2 chTLR7,MDA5 mRNA随着时间变化相对表达结果第27-28页
        2.3.5 IL-1β,IL-2,IL-6, IFN-α, IFN-β 细胞因子mRNA表达的变化第28-33页
            2.3.5.1 IL-1β,IL-2,IL-6, IFN-α,IFN-β 细胞因子mRNA的溶解曲线 .. 20第29-30页
            2.3.5.2 IL-1β,IL-2, IL-6,IFN-α,IFN-β mRNA随着时间变化相对表达结果第30-33页
        2.3.6 XCL1,CXCLi1,CXCLi2趋化因子mRNA表达的变化第33-34页
        2.3.7 iNOS mRNA表达的变化第34-35页
    2.4 讨论第35-36页
    2.5 结论第36-37页
参考文献第37-43页
致谢第43-44页
作者简介第44页

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