| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 造血干细胞 | 第11-13页 |
| 1.1.1 造血干细胞生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 造血干细胞临床应用瓶颈及其解决方法 | 第12-13页 |
| 1.2 造血干细胞体外扩增 | 第13-14页 |
| 1.2.1 游离细胞因子刺激扩增 | 第13页 |
| 1.2.2 基质细胞支持扩增 | 第13-14页 |
| 1.3 骨髓造血微环境 | 第14-17页 |
| 1.4 间充质干细胞与造血干细胞共培养研究现状 | 第17-18页 |
| 1.5 本文研究内容和意义 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2.1 仪器与设备 | 第20页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.1 细胞分离试剂 | 第20页 |
| 2.2.2 培养基 | 第20-21页 |
| 2.2.3 细胞因子 | 第21页 |
| 2.2.4 免疫荧光抗体 | 第21页 |
| 2.2.5 细胞活性分析 | 第21页 |
| 2.2.6 其他试剂 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.3.1 脐血单个核细胞分离与CD34~+细胞纯化 | 第21-22页 |
| 2.3.2 羊膜间充质干细胞的分离 | 第22页 |
| 2.3.3 羊膜间充质干细胞的培养 | 第22页 |
| 2.3.4 羊膜间充质干细胞细胞成骨诱导 | 第22页 |
| 2.3.5 成骨诱导茜素红染色 | 第22-23页 |
| 2.3.6 成骨诱导钙含量测定 | 第23页 |
| 2.3.7 羊膜间充质干细胞脂肪诱导 | 第23页 |
| 2.3.8 脂肪诱导油红染色 | 第23页 |
| 2.3.9 脂肪诱导油红定量分析 | 第23页 |
| 2.3.10 羊膜间充质干细胞成软骨诱导 | 第23页 |
| 2.3.11 成软骨分化甲基胺蓝染色 | 第23页 |
| 2.3.12 成软骨分化GAG含量测定 | 第23页 |
| 2.3.13 海藻酸钠凝胶球制备 | 第23页 |
| 2.3.14 海藻酸钠凝胶球表面结构测定 | 第23-24页 |
| 2.3.15 海藻酸钠凝胶球生物学稳定性测定 | 第24页 |
| 2.3.16 海藻酸钠凝胶球蛋白释放能力测定 | 第24页 |
| 2.3.17 海藻酸钠凝胶球生物学毒性测定 | 第24页 |
| 2.3.18 海藻酸钠-MSC凝胶球制备 | 第24页 |
| 2.3.19 海藻酸钠-MSC凝胶球中细胞活性分析 | 第24-25页 |
| 2.3.20 游离细胞因子刺激下CD34~+细胞体外培养 | 第25页 |
| 2.3.21 CD34~+细胞与MSC共培养 | 第25页 |
| 2.3.22 CD34~+细胞与海藻酸钠-MSC凝胶球共培养 | 第25页 |
| 2.3.23 细胞计数与活性分析 | 第25页 |
| 2.3.24 集落形成能力分析 | 第25页 |
| 2.3.25 细胞表型分析 | 第25-26页 |
| 2.3.26 细胞周期分析 | 第26页 |
| 2.3.27 细胞凋亡分析 | 第26页 |
| 2.3.28 统计学分析 | 第26-27页 |
| 第3章 共培养方式对造血干细胞体外扩增特性的影响 | 第27-36页 |
| 3.1 羊膜间充质干细胞的分离与鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2 CD34~+细胞接种密度对体外共培养过程中CD34~+细胞扩增特性的影响 | 第28-30页 |
| 3.3 CD34~+细胞与MSC接触方式对CD34~+细胞体外扩增的影响 | 第30-35页 |
| 3.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第4章 基于海藻酸钠包埋的MSC与CD34~+细胞共培养体系研究 | 第36-46页 |
| 4.1 海藻酸钠凝胶球的制备与性能测定 | 第36-39页 |
| 4.2 海藻酸钠-MSC凝胶球中MSC包埋密度确定 | 第39-40页 |
| 4.3 海藻酸钠-MSC凝胶球与CD34~+细胞共培养体系研究 | 第40-45页 |
| 4.3.1 共培养体系中总细胞扩增 | 第40-41页 |
| 4.3.2 共培养体系中CD34~+细胞扩增 | 第41-43页 |
| 4.3.3 共培养体系中扩增细胞的细胞周期分析 | 第43页 |
| 4.3.4 共培养体系中扩增后细胞的细胞凋亡分析 | 第43-44页 |
| 4.3.5 共培养体系扩增后CD34~+细胞集落形成能力分析 | 第44-45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第46-48页 |
| 5.1 全文总结 | 第46-47页 |
| 5.2 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
