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梅毒螺旋体鞭毛蛋白经激活NLRC4炎症小体诱导人巨噬细胞表达IL-1β和IL-18

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
主要缩略语英文索引第10-16页
第1章 绪论第16-20页
第2章 实验材料第20-24页
    2.1 实验动物第20页
    2.2 细胞株、菌株和质粒第20页
    2.3 主要实验仪器第20-21页
    2.4 主要实验试剂及试剂盒第21-24页
第3章 实验方法第24-42页
    3.1 Tp的复苏与基因组DNA的提取第24页
    3.2 tp0868、tp0792、tp0870全基因序列扩增第24-25页
    3.3 pET28a-Tp0868、pET28a-Tp0792、pET28a-Tp0870原核表达载体的构建与鉴定第25-29页
    3.4 重组蛋白的表达与鉴定第29-31页
    3.5 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3的Western blot鉴定第31页
    3.6 重组鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3纯化以及浓度测定第31-34页
    3.7 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3去除内毒素后的内毒素浓度测定第34-35页
    3.8 THP-1 细胞培养第35页
    3.9 重组鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3刺激THP-1 细胞实验第35-36页
    3.10 RT-PCR检测NLRC4、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、IL-12mRNA转录第36-39页
    3.11 Western blot检测蛋白表达第39-40页
    3.12 ELISA 检测 IL-1β、IL-18 分泌第40页
    3.13 NLRC4-siRNA转染及干扰第40-41页
    3.14 Caspase-1 特异性抑制剂VX-765 对重组蛋白诱导巨噬细胞的影响第41页
    3.15 统计学分析第41-42页
第4章 实验结果第42-66页
    4.1 tp0868、tp0792、tp0870基因的PCR扩增第42页
    4.2 pET28a-Tp0868、pET28a-Tp0792、pET28a-Tp0870重组质粒的构建与鉴定第42页
    4.3 pET28a-Tp0868、pET28a-Tp0792、pET28a-Tp0870重组质粒诱导表达条件的优化第42-48页
    4.4 His-tagged重组鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3的表达与纯化第48-49页
    4.5 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3的Western blot鉴定第49页
    4.6 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3浓度测定第49-50页
    4.7 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3内毒素的测定第50-51页
    4.8 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3刺激人巨噬细胞对NLRC4炎症小体活化及IL-1β、IL-18 的影响第51-61页
    4.9 NLRC4-siRNA对重组蛋白FlaB3刺激巨噬细胞中NLRC4炎症小体及IL-1β、IL-18 的影响第61-63页
    4.10 caspase-1 特异性抑制剂VX-765 对重组蛋白FlaB3刺激巨噬细胞中NLRC4炎症小体及IL-1β、IL-18 的影响第63-66页
第5章 讨论第66-70页
第6章 结论第70-72页
参考文献第72-76页
综述:NLRC4 炎症小体在细菌感染中的免疫调控作用第76-88页
    参考文献第83-88页
硕士期间发表论文第88-90页
硕士期间参与的课题第90-92页
资助项目第92-94页
致谢第94页

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