摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
主要缩略语英文索引 | 第10-16页 |
第1章 绪论 | 第16-20页 |
第2章 实验材料 | 第20-24页 |
2.1 实验动物 | 第20页 |
2.2 细胞株、菌株和质粒 | 第20页 |
2.3 主要实验仪器 | 第20-21页 |
2.4 主要实验试剂及试剂盒 | 第21-24页 |
第3章 实验方法 | 第24-42页 |
3.1 Tp的复苏与基因组DNA的提取 | 第24页 |
3.2 tp0868、tp0792、tp0870全基因序列扩增 | 第24-25页 |
3.3 pET28a-Tp0868、pET28a-Tp0792、pET28a-Tp0870原核表达载体的构建与鉴定 | 第25-29页 |
3.4 重组蛋白的表达与鉴定 | 第29-31页 |
3.5 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3的Western blot鉴定 | 第31页 |
3.6 重组鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3纯化以及浓度测定 | 第31-34页 |
3.7 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3去除内毒素后的内毒素浓度测定 | 第34-35页 |
3.8 THP-1 细胞培养 | 第35页 |
3.9 重组鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3刺激THP-1 细胞实验 | 第35-36页 |
3.10 RT-PCR检测NLRC4、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、IL-12mRNA转录 | 第36-39页 |
3.11 Western blot检测蛋白表达 | 第39-40页 |
3.12 ELISA 检测 IL-1β、IL-18 分泌 | 第40页 |
3.13 NLRC4-siRNA转染及干扰 | 第40-41页 |
3.14 Caspase-1 特异性抑制剂VX-765 对重组蛋白诱导巨噬细胞的影响 | 第41页 |
3.15 统计学分析 | 第41-42页 |
第4章 实验结果 | 第42-66页 |
4.1 tp0868、tp0792、tp0870基因的PCR扩增 | 第42页 |
4.2 pET28a-Tp0868、pET28a-Tp0792、pET28a-Tp0870重组质粒的构建与鉴定 | 第42页 |
4.3 pET28a-Tp0868、pET28a-Tp0792、pET28a-Tp0870重组质粒诱导表达条件的优化 | 第42-48页 |
4.4 His-tagged重组鞭毛蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3的表达与纯化 | 第48-49页 |
4.5 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3的Western blot鉴定 | 第49页 |
4.6 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3浓度测定 | 第49-50页 |
4.7 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3内毒素的测定 | 第50-51页 |
4.8 重组蛋白FlaB1、FlaB2和FlaB3刺激人巨噬细胞对NLRC4炎症小体活化及IL-1β、IL-18 的影响 | 第51-61页 |
4.9 NLRC4-siRNA对重组蛋白FlaB3刺激巨噬细胞中NLRC4炎症小体及IL-1β、IL-18 的影响 | 第61-63页 |
4.10 caspase-1 特异性抑制剂VX-765 对重组蛋白FlaB3刺激巨噬细胞中NLRC4炎症小体及IL-1β、IL-18 的影响 | 第63-66页 |
第5章 讨论 | 第66-70页 |
第6章 结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
综述:NLRC4 炎症小体在细菌感染中的免疫调控作用 | 第76-88页 |
参考文献 | 第83-88页 |
硕士期间发表论文 | 第88-90页 |
硕士期间参与的课题 | 第90-92页 |
资助项目 | 第92-94页 |
致谢 | 第94页 |