摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 灰飞虱概况 | 第10-13页 |
1.1.1 灰飞虱的形态特征 | 第10-11页 |
1.1.2 灰飞虱的分布及生活史 | 第11页 |
1.1.3 灰飞虱获毒及传毒特性 | 第11-12页 |
1.1.4 灰飞虱危害特点 | 第12页 |
1.1.5 灰飞虱的大发生 | 第12-13页 |
1.2 水稻条纹叶枯病毒(RSV)的研究概述 | 第13-14页 |
1.2.1 水稻条纹叶枯病毒的生物学特性 | 第13页 |
1.2.2 水稻条纹叶枯病的发生症状 | 第13-14页 |
1.2.3 RSV与灰飞虱相互作用的研究进展 | 第14页 |
1.3 灰飞虱免疫相关基因概述 | 第14-17页 |
1.3.1 肽聚糖识别蛋白(PGRPs) | 第14-16页 |
1.3.2 革兰氏阴性菌结合蛋白(GRPs) | 第16页 |
1.3.3 TLRs | 第16-17页 |
1.3.4 Defensin B | 第17页 |
1.4 论文研究的意义及创新点 | 第17-19页 |
1.5 技术路线 | 第19-20页 |
第二章 灰飞虱免疫相关基因的片段获得及全长克隆 | 第20-43页 |
2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第20-21页 |
2.1.1 灰飞虱的来源与养殖 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
2.1.3 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-32页 |
2.2.1 灰飞虱免疫相关基因的片段及全长序列的获得 | 第21-32页 |
2.3 实验结果与分析 | 第32-42页 |
2.3.1 Trizol法提取灰飞虱的总RNA | 第32页 |
2.3.2 灰飞虱的八个免疫相关基因的全长克隆 | 第32-42页 |
2.4 讨论 | 第42-43页 |
第三章 带毒与无毒灰飞虱体内免疫相关基因表达量分析 | 第43-52页 |
3.1 实验材料、试剂与仪器等 | 第43页 |
3.1.1 灰飞虱群体的筛选 | 第43页 |
3.1.2 实验材料、试剂 | 第43页 |
3.1.3 实验仪器 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-46页 |
3.2.1 灰飞虱带毒率的检测 | 第43-44页 |
3.2.2 引物设计 | 第44页 |
3.2.3 带毒与无毒灰飞虱体内八个免疫相关基因的表达 | 第44-45页 |
3.2.4 E.coli免疫刺激带毒灰飞虱后对其LsToll-8、LsToll-13、RSV-RNP的表达的影响 | 第45-46页 |
3.2.5 qRT-PCR结果数据的分析 | 第46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-51页 |
3.3.1 带毒与无毒灰飞虱体内八个免疫相关基因的表达情况 | 第46-50页 |
3.3.2 E.coli免疫刺激带毒灰飞虱后LsToll-8、LsToll-13、RSV-RNP的表达量的变化 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-52页 |
第四章 饲喂法RNAi技术探究相应免疫基因的功能 | 第52-60页 |
4.1 实验试剂与仪器 | 第52页 |
4.1.1 实验试剂 | 第52页 |
4.1.2 实验仪器 | 第52页 |
4.2 实验方法 | 第52-55页 |
4.2.1 人工饲养液的配制 | 第52-53页 |
4.2.2 dsRNA的合成 | 第53-54页 |
4.2.3 饲喂法RNAi实验 | 第54-55页 |
4.2.4 目标基因及相应的RSV-RNP表达量的qRT-PCR测定 | 第55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-58页 |
4.3.1 干扰目标基因后对灰飞虱的存活率的影响 | 第55页 |
4.3.2 干扰后目标基因的沉默效果及相应RSV的积累量的变化 | 第55-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
第五章 灰飞虱LsToll-13基因的生物信息学分析 | 第60-66页 |
5.1 实验材料与方法 | 第60页 |
5.2 结果与分析 | 第60-65页 |
5.2.1 LsToll-13基因序列、结构域及理化性质分析 | 第60-62页 |
5.2.2 LsToll-13蛋白同源性分析 | 第62页 |
5.2.3 LsToll-13基因的进化分析 | 第62-64页 |
5.2.4 LsToll-13蛋白三级结构的相关分析 | 第64-65页 |
5.3 讨论 | 第65-66页 |
总结 | 第66-67页 |
附录 | 第67-70页 |
参考文献 | 第70-74页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |