| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第11-26页 |
| 1.1 miRNA的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 miRNA的发现历程 | 第11页 |
| 1.1.2 miRNA的产生机制 | 第11-12页 |
| 1.1.3 miRNA的结构及其特征 | 第12-13页 |
| 1.1.4 miRNA的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.1.5 miRNA的功能 | 第14-15页 |
| 1.2 果蝇的免疫研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 果蝇的生物学特性以及优势 | 第15页 |
| 1.2.2 果蝇的免疫学概况 | 第15-16页 |
| 1.2.3 果蝇与病原微生物 | 第16页 |
| 1.2.4 果蝇的体液免疫 | 第16-19页 |
| 1.2.5 果蝇的细胞免疫 | 第19-20页 |
| 1.2.6 果蝇的黑化反应 | 第20-21页 |
| 1.3 miRNA调控果蝇免疫的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.3.1 miRNA调控调控抗菌肽的表达 | 第21-22页 |
| 1.3.2 果蝇免疫的其他方面 | 第22页 |
| 1.3.3 研究果蝇miRNA与免疫关系的意义 | 第22-23页 |
| 1.3.4 miR-981调控果蝇免疫的机制研究研究现状 | 第23页 |
| 1.4 本论文研究的意义和创新点 | 第23-25页 |
| 1.5 本论文的技术路线 | 第25-26页 |
| 第2章 miR-981在E.coli刺激后的果蝇体内的表达模式分析 | 第26-36页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料、试剂和仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.2.2 试剂 | 第27页 |
| 2.2.3 仪器 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.3.1 果蝇的饲养 | 第27-28页 |
| 2.3.2 果蝇样品的收集 | 第28页 |
| 2.3.3 果蝇的菌种刺激 | 第28页 |
| 2.3.4 果蝇的总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.5 果蝇的miRNA实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
| 2.3.6 果蝇的基因实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第32-34页 |
| 2.4.1 野生型果蝇受E.coli刺激后Diptericin的时间点变化检测 | 第32-33页 |
| 2.4.2 野生型果蝇受E.coli刺激后激发miR-981的时间点变化检测 | 第33-34页 |
| 2.5 讨论 | 第34-36页 |
| 第3章 miR-981负调控果蝇的Imd通路 | 第36-48页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料、试剂和仪器 | 第36-37页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.2.2 试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.3 仪器 | 第37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.3.1 果蝇的杂交 | 第37页 |
| 3.3.2 果蝇的菌种刺激 | 第37-38页 |
| 3.3.3 果蝇的总RNA的提取 | 第38页 |
| 3.3.4 果蝇的基因实时荧光定量PCR | 第38-40页 |
| 3.3.5 果蝇总蛋白的提取 | 第40页 |
| 3.3.6 Western Blots | 第40-42页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第42-46页 |
| 3.4.1 miR-981高表达果蝇株 | 第42-43页 |
| 3.4.2 miR-981高表达果蝇体内受E.coli刺激后Imd通路Diptericin的表达量 | 第43-45页 |
| 3.4.3 miR-981高表达果蝇体内受E.coli刺激后Imd通路其他重要抗菌肽的表达量 | 第45-46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-48页 |
| 第4章 miR-981靶基因的预测和筛选 | 第48-51页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 miRanda预测软件 | 第49页 |
| 4.2.2 TargetScan预测软件 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第49-50页 |
| 4.4.1 miR-981与靶基因Diptericin的靶位点预测 | 第49-50页 |
| 4.5 讨论 | 第50-51页 |
| 第5章 体外验证miR-981和Diptericin的靶标关系 | 第51-57页 |
| 5.1 引言 | 第51页 |
| 5.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 5.2.2 试剂 | 第51页 |
| 5.2.3 仪器 | 第51-52页 |
| 5.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 5.3.1 果蝇S2细胞的培养 | 第52页 |
| 5.3.2 双荧光素酶报告系统实验的构建和检测 | 第52-54页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第54-56页 |
| 5.4.1 miR-981与Diptericin的靶位点 | 第54-55页 |
| 5.4.2 验证miR-981与Diptericin的靶标关系 | 第55-56页 |
| 5.5 讨论 | 第56-57页 |
| 第6章 体内验证miR-981与Diptericin的靶标关系 | 第57-61页 |
| 6.1 引言 | 第57页 |
| 6.2 实验材料、试剂和仪器 | 第57-58页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第57页 |
| 6.2.2 试剂 | 第57页 |
| 6.2.3 仪器 | 第57-58页 |
| 6.3 实验方法 | 第58页 |
| 6.3.1 果蝇的杂交 | 第58页 |
| 6.3.2 果蝇的菌种刺激 | 第58页 |
| 6.3.3 果蝇的总RNA的提取 | 第58页 |
| 6.3.4 果蝇的基因实时荧光定量PCR | 第58页 |
| 6.4 实验结果与分析 | 第58-60页 |
| 6.4.1 miR-981表达量回复果蝇的构建 | 第58-59页 |
| 6.4.2 miR-981表达量回复果蝇体内Diptericin表达量的检测 | 第59-60页 |
| 6.5 讨论 | 第60-61页 |
| 第7章 结论 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
