| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| 1.1 线粒体凋亡途径 | 第10-15页 |
| 1.1.1 细胞凋亡 | 第10-11页 |
| 1.1.2 线粒体凋亡机理 | 第11-12页 |
| 1.1.3 BCL-2家族蛋白 | 第12-15页 |
| 1.2 PUMA简介 | 第15-22页 |
| 1.2.1 PUMA的发现 | 第15页 |
| 1.2.2 PUMA的结构特点 | 第15-17页 |
| 1.2.3 PUMA转录调节 | 第17-19页 |
| 1.2.4 PUMA的促凋亡机制 | 第19-22页 |
| 1.3 PUMA与癌症治疗 | 第22-25页 |
| 1.3.1 PUMA在癌症发展与治疗中的作用 | 第22-24页 |
| 1.3.2 PUMA在癌症治疗中的前景 | 第24-25页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 2 实验材料与方法 | 第26-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-34页 |
| 2.1.1 目的基因序列 | 第26页 |
| 2.1.2 质粒及菌种 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第28-30页 |
| 2.1.5 培养基和主要溶液的配制 | 第30-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-54页 |
| 2.2.1 目的基因的克隆 | 第34-43页 |
| 2.2.2 目的蛋白的诱导表达及检测 | 第43-45页 |
| 2.2.3 目的蛋白的纯化 | 第45-48页 |
| 2.2.4 目的蛋白的结晶 | 第48-52页 |
| 2.2.5 蛋白质的LC-MS/MS分析 | 第52-54页 |
| 3 实验结果 | 第54-79页 |
| 3.1 PUMA全长截取的表达 | 第54-62页 |
| 3.1.1 PUMAFL-truncation的克隆表达及纯化 | 第54-60页 |
| 3.1.2 模拟磷酸化PUMA的表达 | 第60-62页 |
| 3.2 PUMA的N端和C端的选取 | 第62-67页 |
| 3.2.1 PUMA△C30和PUMA△C44的克隆表达纯化 | 第62-64页 |
| 3.2.2 PUMA N端和C端的确定 | 第64-67页 |
| 3.3 PUMA59-163和PUMA61-149的表达纯化 | 第67-72页 |
| 3.3.1 PUMA59-163的纯化与结晶 | 第67-70页 |
| 3.3.2 PUMA61-149的表达纯化结晶 | 第70-72页 |
| 3.4 PUMA与BCL-xL/BCL-2的相互作用研究 | 第72-79页 |
| 3.4.1 PUMA与BCL-xL相互作用研究 | 第72-77页 |
| 3.4.2 PUMA与BCL-2相互作用研究 | 第77-79页 |
| 4 分析与讨论 | 第79-82页 |
| 5 总结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
