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裂殖酵母全基因组范围内转录起始位点研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 绪论第11-23页
   ·基因转录起始位点研究的意义第11-13页
     ·转录调控是基因表达调控中的重要组分第11页
     ·真核生物的转录研究第11-12页
       ·真核生物转录组的复杂性第11-12页
       ·转录起始是转录水平调控中最关键的步骤第12页
     ·核心启动子(core promoter)第12-13页
       ·核心启动子在转录起始中的重要地位第12-13页
       ·核心启动子的鉴别方法第13页
   ·研究基因转录起始位点的方法第13-19页
     ·帽分析基因表达法(Cap Analysis of Gene Expression;CAGE)第13-16页
       ·CAGE 方法简介第13-15页
       ·从转录起始位点到核心启动子第15-16页
     ·其他方法第16-19页
       ·快速放大 cDNA5’末端法(5’RACE)第16-17页
       ·5’SAGE第17-18页
       ·nanoCAGE第18页
       ·GIS-PET第18-19页
   ·真核生物的转录起始模式第19-23页
     ·哺乳动物的转录起始模式第19-21页
     ·果蝇的转录起始模式第21-23页
第二章 CAGE 技术的建立第23-45页
   ·引言第23-24页
   ·实验材料第24-26页
     ·试剂第24页
     ·仪器第24-25页
     ·引物与接头序列第25-26页
   ·实验方法第26-38页
     ·酵母总 RNA 的提取:比较 Trizol 和裂解液破壁对总 RNA 质量的影响第26-27页
     ·Rnase I 酶切条件的优化第27-34页
     ·CAGE 短标签文库的构建第34-38页
   ·实验结果第38-44页
     ·提取酵母总 RNA 的电泳结果第38-39页
     ·RNase I 酶切条件的优化第39-40页
       ·不同酶量的 RNase I 处理比较第39页
       ·RNase I 处理不同次数比较第39-40页
       ·短暂升温对酶切效果的影响第40页
     ·短标签 CAGE 文库方法的建立第40-44页
       ·双链 cDNA 的电泳检测第40-41页
       ·短标签文库扩增产物第41-42页
       ·短标签文库结构第42-44页
   ·本章小结第44-45页
第三章 利用 CAGE 技术研究裂殖酵母 S.pombe 的转录起始位点第45-53页
   ·引文第45页
   ·实验材料第45-46页
   ·实验方法第46页
   ·实验结果第46-51页
     ·克隆测序结果第46页
     ·高通量测序结果比对第46页
     ·核糖体 RNA 的比例第46-47页
     ·CAGE 标签的分布第47-48页
     ·核心启动子形状第48-51页
   ·本章小结第51-53页
第四章 结束语第53-55页
   ·主要工作与创新点第53页
   ·后续研究工作第53-55页
参考文献第55-58页
致谢第58页

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