摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
缩略语表 | 第11-15页 |
第一章 绪论 | 第15-26页 |
·F-BAR蛋白 | 第15-19页 |
·F-BAR蛋白概述 | 第15-18页 |
·F-BAR蛋白与神经元发育 | 第18-19页 |
·SrGAP家族 | 第19-20页 |
·SrGAP家族分子及功能结构域 | 第19页 |
·SrGAP家族分子在神经元发育中的重要作用 | 第19-20页 |
·树突发育 | 第20-26页 |
·树突发育的重要性 | 第20-21页 |
·树突发育的调控 | 第21-26页 |
第二章 材料和方法 | 第26-35页 |
·实验材料 | 第26-30页 |
·抗体 | 第26页 |
·细胞系 | 第26页 |
·载体和质粒 | 第26页 |
·引物 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-28页 |
·溶液配制 | 第28-30页 |
·实验仪器 | 第30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-35页 |
·感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
·HEK293FT,Neuro2A等细胞的培养及细胞转染 | 第31页 |
·大鼠大脑皮层神经元的培养 | 第31页 |
·蛋白抽提及蛋白样品的制备 | 第31-32页 |
·亚细胞组分蛋白样品的制备 | 第32页 |
·免疫细胞染色 | 第32页 |
·免疫共沉淀反应 | 第32-33页 |
·RhoGAP pull-down反应 | 第33页 |
·蛋白免疫印迹(Western blot) | 第33页 |
·RNA干扰 | 第33-34页 |
·Neuro2A细胞诱导神经元分化模型 | 第34页 |
·数据分析 | 第34-35页 |
第三章 实验结果 | 第35-50页 |
·构建同时靶向srGAP1、srGAP2和srGAP3的串联shRNA干扰载体 | 第35-38页 |
·靶向srGAP1、srGAP2和srGAP3的串联shRNA干扰载体的构建 | 第35-37页 |
·验证J1+2+3的干扰效果 | 第37-38页 |
·SrGAP分子对神经元树突发育的影响 | 第38页 |
·SrGAP1、srGAP2和srGAP3分子间的相互作用及细胞内共定位 | 第38-42页 |
·外源的srGAP1、srGAP2和srGAP3分子间可以相互作用 | 第38-41页 |
·SrGAP2和srGAP3的相互作用是通过F-BAR结构域介导的 | 第41页 |
·SrGAP2和srGAP3分子在细胞内存在共定位 | 第41页 |
·内源性srGAP2与srGAP3存在相互作用 | 第41-42页 |
·SrGAP分子与神经元分化 | 第42-50页 |
·SrGAP1和srGAP2分子抑制VPA诱导的Neuro2A细胞的神经元分化和突起生长 | 第42-43页 |
·单独下调内源的srGAP2不能促进Neuro2A细胞的神经元分化 | 第43-46页 |
·SrGAP3对于过表达srGAP2引起的神经元分化的抑制效应是必需的 | 第46-47页 |
·内源的srGAP2针对Rac1具有极微弱的RhoGAP活性 | 第47-49页 |
·阻断Slit-Robo信号通路可以促进神经元的分化 | 第49-50页 |
第四章 讨论 | 第50-54页 |
·串联miR-shRNA是一种有效的下调srGAP家族的手段 | 第50-51页 |
·SrGAP分子影响神经元树突发育 | 第51-52页 |
·SrGAP分子在调控神经元分化方面存在功能上的独立性与重叠性 | 第52-54页 |
第五章 结论和展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
学术论文和科研成果 | 第64页 |