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SrGAP家族分子调控树突发育和神经元分化的功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
缩略语表第11-15页
第一章 绪论第15-26页
   ·F-BAR蛋白第15-19页
     ·F-BAR蛋白概述第15-18页
     ·F-BAR蛋白与神经元发育第18-19页
   ·SrGAP家族第19-20页
     ·SrGAP家族分子及功能结构域第19页
     ·SrGAP家族分子在神经元发育中的重要作用第19-20页
   ·树突发育第20-26页
     ·树突发育的重要性第20-21页
     ·树突发育的调控第21-26页
第二章 材料和方法第26-35页
   ·实验材料第26-30页
     ·抗体第26页
     ·细胞系第26页
     ·载体和质粒第26页
     ·引物第26页
     ·主要试剂第26-28页
     ·溶液配制第28-30页
     ·实验仪器第30页
     ·实验动物第30页
   ·实验方法第30-35页
     ·感受态细胞的制备第30-31页
     ·HEK293FT,Neuro2A等细胞的培养及细胞转染第31页
     ·大鼠大脑皮层神经元的培养第31页
     ·蛋白抽提及蛋白样品的制备第31-32页
     ·亚细胞组分蛋白样品的制备第32页
     ·免疫细胞染色第32页
     ·免疫共沉淀反应第32-33页
     ·RhoGAP pull-down反应第33页
     ·蛋白免疫印迹(Western blot)第33页
     ·RNA干扰第33-34页
     ·Neuro2A细胞诱导神经元分化模型第34页
     ·数据分析第34-35页
第三章 实验结果第35-50页
   ·构建同时靶向srGAP1、srGAP2和srGAP3的串联shRNA干扰载体第35-38页
     ·靶向srGAP1、srGAP2和srGAP3的串联shRNA干扰载体的构建第35-37页
     ·验证J1+2+3的干扰效果第37-38页
   ·SrGAP分子对神经元树突发育的影响第38页
   ·SrGAP1、srGAP2和srGAP3分子间的相互作用及细胞内共定位第38-42页
     ·外源的srGAP1、srGAP2和srGAP3分子间可以相互作用第38-41页
     ·SrGAP2和srGAP3的相互作用是通过F-BAR结构域介导的第41页
     ·SrGAP2和srGAP3分子在细胞内存在共定位第41页
     ·内源性srGAP2与srGAP3存在相互作用第41-42页
   ·SrGAP分子与神经元分化第42-50页
     ·SrGAP1和srGAP2分子抑制VPA诱导的Neuro2A细胞的神经元分化和突起生长第42-43页
     ·单独下调内源的srGAP2不能促进Neuro2A细胞的神经元分化第43-46页
     ·SrGAP3对于过表达srGAP2引起的神经元分化的抑制效应是必需的第46-47页
     ·内源的srGAP2针对Rac1具有极微弱的RhoGAP活性第47-49页
     ·阻断Slit-Robo信号通路可以促进神经元的分化第49-50页
第四章 讨论第50-54页
   ·串联miR-shRNA是一种有效的下调srGAP家族的手段第50-51页
   ·SrGAP分子影响神经元树突发育第51-52页
   ·SrGAP分子在调控神经元分化方面存在功能上的独立性与重叠性第52-54页
第五章 结论和展望第54-55页
参考文献第55-63页
致谢第63-64页
学术论文和科研成果第64页

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