中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
全文重要名词缩写 | 第10-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-52页 |
1.1 肠道微生物与健康 | 第20-22页 |
1.2 肠道微生物与代谢综合征 | 第22-33页 |
1.2.1 代谢综合征概述 | 第22-23页 |
1.2.2 MS的病症基础与发病机制 | 第23-24页 |
1.2.2.1 肥胖 | 第23页 |
1.2.2.2 胰岛素抵抗 | 第23页 |
1.2.2.3 糖代谢异常 | 第23-24页 |
1.2.2.4 脂代谢紊乱 | 第24页 |
1.2.2.5 高血压 | 第24页 |
1.2.2.6 其他成分 | 第24页 |
1.2.3 代谢综合症的治疗 | 第24页 |
1.2.4 代谢综合征与肠道微生物相关性研究概述 | 第24-30页 |
1.2.4.1 肥胖与肠道微生物 | 第25-26页 |
1.2.4.2 血糖代谢障碍与肠道微生物 | 第26-27页 |
1.2.4.3 脂代谢与肠道微生物 | 第27页 |
1.2.4.4 非酒精性脂肪性肝病与肠道微生物 | 第27-29页 |
1.2.4.5 血压与肠道微生物 | 第29-30页 |
1.2.4.6 炎症反应与肠道微生物 | 第30页 |
1.2.5 饮食因素对代谢综合征、肠道微生物的影响 | 第30-33页 |
1.2.5.1 膳食结构 | 第30-31页 |
1.2.5.2 益生菌和益生元 | 第31-33页 |
1.3 茶树鲜叶的主要化学成分 | 第33-34页 |
1.4 微生物——后发酵普洱茶品质形成的关键 | 第34-39页 |
1.4.1 微生物种类及相对含量 | 第34-35页 |
1.4.2 微生物对普洱茶汤色的影响 | 第35-36页 |
1.4.3 微生物对普洱茶香气的影响 | 第36-37页 |
1.4.4 微生物对普洱茶滋味物质的影响 | 第37-39页 |
1.4.4.1 茶多酚 | 第37页 |
1.4.4.2 咖啡碱 | 第37页 |
1.4.4.3 氨基酸 | 第37-38页 |
1.4.4.4 其他代谢产物 | 第38-39页 |
1.5 发酵前后普洱茶主要组分的变化 | 第39页 |
1.6 后发酵普洱茶及其主要组分对代谢综合征相关疾病的调节作用 | 第39-45页 |
1.6.1 降脂减肥作用 | 第39-41页 |
1.6.2 降脂减肥作用活性组分 | 第41-43页 |
1.6.2.1 多酚类物质 | 第41页 |
1.6.2.2 茶色素 | 第41-42页 |
1.6.2.3 茶多糖 | 第42页 |
1.6.2.4 咖啡因 | 第42页 |
1.6.2.5 其他物质 | 第42-43页 |
1.6.3 降脂减肥作用机制 | 第43-44页 |
1.6.4 降血糖作用 | 第44页 |
1.6.5 降低心脑血管疾病患病风险 | 第44页 |
1.6.6 改善代谢综合征 | 第44-45页 |
1.7 茶叶及其主要活性组分与肠道微生物的互作研究概述 | 第45-48页 |
1.7.1 茶叶提取物及茶叶中多酚类物质对肠道微生物的调节作用 | 第45-46页 |
1.7.2 肠道微生物在食物多酚代谢中的作用 | 第46-48页 |
1.8 微生物分子生态学技术概述 | 第48-49页 |
1.8.1 传统方法 | 第48-49页 |
1.8.2 高通量测序技术 | 第49页 |
1.9 本研究的目的和意义 | 第49-52页 |
第二章 普洱茶(熟)对健康青年志愿者肠道菌群及血清生化指标的影响 | 第52-78页 |
2.1 前言 | 第52页 |
2.2 人体干预试验设计 | 第52-55页 |
2.2.1 志愿者的募集 | 第52-53页 |
2.2.1.1 纳入标准 | 第52-53页 |
2.2.1.2 排除标准 | 第53页 |
2.2.2 普洱茶(熟)汤的制备 | 第53页 |
2.2.3 试验流程 | 第53-54页 |
2.2.4 志愿者参试有效性的认定 | 第54-55页 |
2.2.5 血液、粪便样品采集、预处理 | 第55页 |
2.3 实验方法 | 第55-63页 |
2.3.1 材料与设备 | 第55-59页 |
2.3.1.1 仪器与设备 | 第55-56页 |
2.3.1.2 主要药品 | 第56-57页 |
2.3.1.3 主要试剂盒 | 第57-58页 |
2.3.1.4 培养基的配制 | 第58页 |
2.3.1.5 DGGE实验所需溶液的配制 | 第58页 |
2.3.1.6 DH5α 感受态制备所需试剂 | 第58-59页 |
2.3.2 志愿者血清生化指标的检测 | 第59页 |
2.3.3 志愿者粪便中细菌总DNA的提取 | 第59-60页 |
2.3.4 PCR-DGGE评价普洱茶(熟)干预过程中志愿者肠道微生物群落结构变化 | 第60-62页 |
2.3.4.1 巢式PCR (Nest-PCR) | 第60-61页 |
2.3.4.2 PCR产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析 | 第61-62页 |
2.3.5 志愿者粪便微生物中特定细菌类群的荧光定量PCR | 第62-63页 |
2.3.5.1 标准质粒的构建 | 第62页 |
2.3.5.2 标准曲线的绘制 | 第62-63页 |
2.3.5.3 样本中特定微生物的定量分析 | 第63页 |
2.4 数据分析 | 第63-66页 |
2.5 结果与分析 | 第66-75页 |
2.5.1 对志愿者人体测量参数及血清代谢指标的影响 | 第66-68页 |
2.5.1.1 人体测量参数 | 第66页 |
2.5.1.2 空腹血糖和血脂四项 | 第66-67页 |
2.5.1.3 肝脏、肾脏功能和炎症相关指标 | 第67-68页 |
2.5.2 普洱茶(熟)干预过程中志愿者(整体)粪便微生物的动态变化 | 第68-70页 |
2.5.2.1 干预过程中志愿者(整体)粪便微生物群落结构变化 | 第68-69页 |
2.5.2.2 干预过程中志愿者(整体)粪便微生物门水平变化 | 第69页 |
2.5.2.3 干预过程中志愿者(整体)粪便微生物科水平变化 | 第69页 |
2.5.2.4 干预过程中志愿者(整体)粪便微生物属水平变化 | 第69-70页 |
2.5.3 普洱茶干预前后志愿者(个体)粪便微生物群落结构变化 | 第70-73页 |
2.5.3.1 普洱茶干预前后志愿者(个体)粪便微生物群落结构变化 | 第70页 |
2.5.3.2 普洱茶(熟)干预前后健康青年志愿者微生物多样性变化 | 第70-73页 |
2.5.4 对志愿者粪便菌群中特定类群微生物的影响 | 第73-74页 |
2.5.5 特定类群微生物与血生化指标间的相关性分析 | 第74-75页 |
2.6 讨论 | 第75-77页 |
2.7 本章小结 | 第77-78页 |
第三章 普洱茶(熟)及其主要活性组分对基础和高脂饮食小鼠糖脂代谢、炎症和肠道微生态的影响 | 第78-136页 |
3.1 前言 | 第78-79页 |
3.2 材料与方法 | 第79-91页 |
3.2.1 主要仪器与设备 | 第79页 |
3.2.2 主要试剂 | 第79-80页 |
3.2.3 普洱茶(熟)及其主要活性组分(PEAC) | 第80-82页 |
3.2.4 动物饲料配伍 | 第82页 |
3.2.5 动物试验设计 | 第82-85页 |
3.2.5.1 小鼠饲养与试验分组 | 第82-83页 |
3.2.5.2 动物试验流程 | 第83-84页 |
3.2.5.3 小鼠解剖和组织收集 | 第84-85页 |
3.2.6 口服葡萄糖耐量测试(OGTT) | 第85页 |
3.2.7 血清生化分析 | 第85页 |
3.2.8 组织学分析 | 第85页 |
3.2.9 小鼠组织RNA提取及RT-q PCR法测定功能基因m RNA表达 | 第85-86页 |
3.2.10 盲肠内含物及粪便微生物DNA的提取 | 第86页 |
3.2.11 PCR-DGGE评价PEAC对基础和高脂饮食小鼠肠道菌群结构的影响 | 第86页 |
3.2.12 特定微生物的荧光定量PCR | 第86-88页 |
3.2.13 免疫蛋白印迹试验(Western bolt ) | 第88-90页 |
3.2.13.1 腹股沟脂肪组织中总蛋白的提取及定量 | 第88页 |
3.2.13.2 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第88-89页 |
3.2.13.3 转膜 | 第89-90页 |
3.2.13.4 封闭及抗体孵育 | 第90页 |
3.2.14 数据分析 | 第90-91页 |
3.2.15 核酸序列登录号 | 第91页 |
3.3 结果与分析 | 第91-127页 |
3.3.1 PEAC对基础和高脂饮食小鼠体重的影响 | 第91-93页 |
3.3.2 PEAC对能量摄入及转化效率的影响 | 第93页 |
3.3.3 对机体组成的影响 | 第93-98页 |
3.3.3.1 对脂肪组织重量的影响 | 第93-96页 |
3.3.3.2 对肝脏重量的影响 | 第96-97页 |
3.3.3.3 对盲肠重量的影响 | 第97-98页 |
3.3.4 对循环系统炎症、组织炎症的影响 | 第98-102页 |
3.3.4.1 对血清内毒素(LPS)、促炎细胞因子的影响 | 第98-99页 |
3.3.4.2 对肝脏组织形态学、肝脏促炎细胞因子m RNA表达的影响 | 第99-102页 |
3.3.5 PEAC对基础和高脂饮食小鼠糖代谢的影响 | 第102-105页 |
3.3.5.1 对空腹血糖的影响 | 第102-103页 |
3.3.5.2 对口服葡萄糖耐受性的影响 | 第103-104页 |
3.3.5.3 对空腹血清胰岛素水平和胰岛素敏感性的影响 | 第104-105页 |
3.3.5.4 对葡萄糖转运和异生作用相关基因m RNA表达的影响 | 第105页 |
3.3.6 PEAC对基础和高脂饮食小鼠脂质代谢的影响 | 第105-115页 |
3.3.6.1 对血脂四项、血清LOX-1 含量的影响 | 第105-106页 |
3.3.6.2 对肝脏组织脂质代谢的影响 | 第106-108页 |
3.3.6.3 对附睾脂肪组织脂肪细胞形态影响 | 第108-109页 |
3.3.6.4 对附睾脂肪组织脂肪生成、氧化等相关功能基因表达的影响 | 第109-111页 |
3.3.6.5 对附睾脂肪组织相关炎症因子m RNA表达的影响 | 第111-112页 |
3.3.6.6 对腹股沟白色脂肪组织褐化的影响 | 第112-115页 |
3.3.7 PEAC对基础和高脂饮食小鼠肠道稳态的影响 | 第115-120页 |
3.3.7.1 对肠道组织形态的影响 | 第115-116页 |
3.3.7.2 对肠道组织促炎细胞因子m RNA表达的影响 | 第116页 |
3.3.7.3 对肠道屏障、抗菌肽相关基因表达的影响 | 第116-120页 |
3.3.7.4 对肠道屏障完整性相关基因表达的影响 | 第120页 |
3.3.8 PEAC对正常和高脂饮食小鼠肠道菌群结构的影响 | 第120-127页 |
3.3.8.1 对盲肠微生物群落结构的影响 | 第120-121页 |
3.3.8.2 PEAC干预过程中小鼠粪便微生物群落结构的动态变化 | 第121-123页 |
3.3.8.3 对肠道特定类群微生物的影响 | 第123-127页 |
3.4 特定类群微生物变化与宿主参数间的相关性分析 | 第127-131页 |
3.4.1 肠道特定类群微生物与机体组成指标间的相关性 | 第127页 |
3.4.2 肠道特定类群微生物与肠道稳态相关参数间的相关性 | 第127页 |
3.4.3 肠道特定类群微生物与脂代谢、脂肪组织炎症相关参数间的相关性 | 第127-131页 |
3.5 讨论 | 第131-134页 |
3.6 本章小结 | 第134-136页 |
第四章 AKK和FPR摄入对基础和高脂饮食小鼠糖脂代谢、机体炎症和肠道菌群的影响 | 第136-160页 |
4.1 前言 | 第136-137页 |
4.2 材料与方法 | 第137-141页 |
4.2.1 主要仪器与设备 | 第137-138页 |
4.2.2 主要试剂 | 第138页 |
4.2.3 AKK、FPR标准菌株及其培养条件 | 第138页 |
4.2.4 动物饲料配伍 | 第138页 |
4.2.5 动物试验设计 | 第138-140页 |
4.2.5.1 小鼠饲养与实验分组 | 第138-139页 |
4.2.5.2 动物试验流程 | 第139-140页 |
4.2.5.3 小鼠解剖和组织收集 | 第140页 |
4.2.6 OGTT | 第140页 |
4.2.7 血清生化分析 | 第140页 |
4.2.8 组织学分析 | 第140页 |
4.2.9 小鼠组织RNA提取及RT-q PCR法测定功能基因m RNA表达 | 第140页 |
4.2.10 盲肠内含物及粪便微生物DNA提取 | 第140-141页 |
4.2.11 AKK和FPR对基础和高脂饮食小鼠肠道微生物群落结构的影响 | 第141页 |
4.2.12 特定微生物的荧光定量PCR | 第141页 |
4.2.13 免疫蛋白印迹试验(Western bolt ) | 第141页 |
4.2.14 数据分析 | 第141页 |
4.3 结果与分析 | 第141-154页 |
4.3.1 AKK和FPR对基础和高脂饮食小鼠机体组成、能量转化效率的影响 | 第141-144页 |
4.3.1.1 对小鼠体重和能量转化效率的影响 | 第141-144页 |
4.3.1.2 对肝脏、脂肪、盲肠重量的影响 | 第144页 |
4.3.2 AKK和FPR对基础饮食和高脂饮食小鼠糖代谢的影响 | 第144-146页 |
4.3.2.1 AKK和FPR对口服葡萄糖耐受性和空腹血糖的影响 | 第144页 |
4.3.2.2 AKK对肝脏组织糖代谢相关基因表达的影响 | 第144-146页 |
4.3.3 AKK和FPR对基础饮食和高脂饮食小鼠脂质代谢的影响 | 第146-149页 |
4.3.3.1 AKK和FPR对血脂四项的影响 | 第146页 |
4.3.3.2 AKK摄入对附睾脂肪组织脂肪生成、氧化相关m RNA表达的影响 | 第146-147页 |
4.3.3.3 AKK摄入对附睾脂肪组织脂肪细胞形态的影响 | 第147-149页 |
4.3.3.4 AKK摄入对腹股沟白色脂肪组织褐化的影响 | 第149页 |
4.3.4 FPR对基础饮食和高脂饮食小鼠肝脏和结肠组织炎症的影响 | 第149-151页 |
4.3.4.1 对肝脏组织促炎因子TNF-α m RNA表达的影响 | 第149页 |
4.3.4.2 对结肠组织促炎因子m RNA表达的影响 | 第149-151页 |
4.3.5 AKK和FPR摄入对小鼠肠道微生物群落结构与组成的影响 | 第151-154页 |
4.3.5.1 AKK摄入对小鼠盲肠和粪便微生物群落结构的影响 | 第151页 |
4.3.5.2 FPR摄入对小鼠盲肠和粪便微生物群落结构的影响 | 第151页 |
4.3.5.3 AKK和FPR摄入对小鼠盲肠特定类群微生物的影响 | 第151-154页 |
4.4 讨论 | 第154-157页 |
4.4.1 饮食调节与AKK丰度 | 第154页 |
4.4.2 AKK与代谢紊乱 | 第154-155页 |
4.4.3 AKK细菌的肠道生态学 | 第155-156页 |
4.4.4 FPR与炎症、肥胖的关系 | 第156-157页 |
4.5 本章小结 | 第157-160页 |
第五章 全文总结和展望 | 第160-164页 |
5.1 全文总结 | 第160-162页 |
5.2 对后续工作的建议 | 第162-164页 |
参考文献 | 第164-194页 |
作者简介及攻博期间科研成果 | 第194-196页 |
致谢 | 第196页 |