| 综述 | 第8-44页 |
| 综述一 皂苷的研究进展 | 第8-30页 |
| 参考文献 | 第26-30页 |
| 综述二 植物中角鲨烯环化酶研究进展 | 第30-39页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 综述三 RNA干扰技术的研究与应用 | 第39-44页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第一部分 三倍体无籽罗汉果与二倍体罗汉果的转录组及表达谱差异分析 | 第44-65页 |
| 中文摘要 | 第44-45页 |
| Abstract | 第45-46页 |
| 缩略词 | 第46-47页 |
| 引言 | 第47-48页 |
| 一、材料 | 第48页 |
| 二、方法 | 第48页 |
| 三、结果与讨论 | 第48-61页 |
| 3.1 两种倍性的罗汉果果实与种子表型 | 第48-49页 |
| 3.2 种子发育的光镜检测 | 第49-50页 |
| 3.3 转录组测序、组装与注释 | 第50-51页 |
| 3.4 表达谱测序 | 第51-56页 |
| 3.5 激素含量测定及相关基因的研究 | 第56-59页 |
| 3.6 三萜合成途径相关基因的分析 | 第59-60页 |
| 3.7 转录因子 | 第60-61页 |
| 本章小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 第二部分 罗汉果甜苷V生物合成中的4个关键酶基因的功能研究 | 第65-172页 |
| 中文摘要 | 第65-67页 |
| Abstract | 第67-69页 |
| 缩略词表 | 第69-70页 |
| 引言 | 第70-73页 |
| 第一章 SgCS基因的克隆及功能研究 | 第73-111页 |
| 第一节 SgCS基因的全长克隆 | 第73-76页 |
| 1.1.1 材料 | 第73页 |
| 1.1.2 方法 | 第73-74页 |
| 1.1.3 结果 | 第74-76页 |
| 1.1.3.1 RNA的提取及检测 | 第74-75页 |
| 1.1.3.2 SgCS基因全长RACE克隆及SgCS-ORF的克隆 | 第75-76页 |
| 第二节 SgCS基因的生物信息学分析 | 第76-82页 |
| 1.2.1 材料与方法 | 第76页 |
| 1.2.2 结果 | 第76-82页 |
| 第三节 SgCS基因的时空表达分析 | 第82-86页 |
| 1.3.1 材料 | 第82页 |
| 1.3.2 方法 | 第82-83页 |
| 1.3.2.1 实时荧光定量方法检测SgCS基因在不同时期罗汉果果实中的表达 | 第82-83页 |
| 1.3.2.2 实时荧光定量方法检测SgCS基因在罗汉果不同部位中的表达 | 第83页 |
| 1.3.3 结果 | 第83-86页 |
| 1.3.3.1 SgCS基因在不同时期罗汉果果实中的表达情况 | 第83-84页 |
| 1.3.3.2 SgCS基因在罗汉果不同部位中的表达情况情况 | 第84-86页 |
| 第四节 SgCS基因的原核表达研究 | 第86-92页 |
| 1.4.1 材料 | 第86页 |
| 1.4.2 方法 | 第86-89页 |
| 1.4.2.1 罗汉果幼果果实总RNA的提取与第一链cDNA的合成 | 第86页 |
| 1.4.2.2 SgCS全长基因的克隆 | 第86-88页 |
| 1.4.2.3 SgCS基因原核表达载体的构建 | 第88页 |
| 1.4.2.4 SgCS的原核表达 | 第88-89页 |
| 1.4.3 结果 | 第89-92页 |
| 1.4.3.1 SgCS基因的原核表达载体构建 | 第89-90页 |
| 1.4.3.2 SgCS重组蛋白的SDS-PAGE分析、融合蛋白的可溶性分析、Western Blot检测 | 第90-92页 |
| 第五节 利用酵母表达研究SgCs基因的功能 | 第92-99页 |
| 1.5.1 材料 | 第92页 |
| 1.5.2 方法 | 第92-94页 |
| 1.5.2.1 酵母表达载体pYES2-SgCS的构建 | 第92-93页 |
| 1.5.2.2 罗汉果pYES2-SgCS基因转化酵母IVF | 第93-94页 |
| 1.5.2.3 提取酵母的次生代谢产物 | 第94页 |
| 1.5.3 结果 | 第94-99页 |
| 1.5.3.1 重组酵母表达载体的构建 | 第94-96页 |
| 1.5.3.2 SgCS-pYES2酵母重组质粒在酵母菌株中的表达及检测 | 第96-99页 |
| 第六节 SgCS基因的亚细胞定位研究 | 第99-101页 |
| 1.6.1 材料 | 第99页 |
| 1.6.2 方法 | 第99-100页 |
| 1.6.2.1 SgCS基因亚细胞定位载体的构建 | 第99页 |
| 1.6.2.2 农杆菌感受态的制备 | 第99-100页 |
| 1.6.2.3 重组的亚细胞定位载体转化农杆菌 | 第100页 |
| 1.6.2.4 根癌农杆菌介导转化烟草叶片 | 第100页 |
| 1.6.3 结果 | 第100-101页 |
| 第七节 SgCS基因植物过表达载体的构建及根癌农杆菌介导转化拟南芥的研究 | 第101-108页 |
| 1.7.1 材料 | 第101页 |
| 1.7.2 方法 | 第101-104页 |
| 1.7.2.1 SgCS基因的植物过表达载体构建 | 第101-102页 |
| 1.7.2.2 重组的植物过表达载体SgCS-ORF-pBI121转化农杆菌GV3101 | 第102页 |
| 1.7.2.3 农杆菌介导重组质粒SgCS-ORF-pBI121转化拟南芥 | 第102-103页 |
| 1.7.2.4 转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第103页 |
| 1.7.2.5 转基因拟南芥的是实时荧光定量PCR分析 | 第103-104页 |
| 1.7.3 结果 | 第104-108页 |
| 1.7.3.1 SgCS-pBI121植物表达载体的构建 | 第104-105页 |
| 1.7.3.2 转基因拟南芥种子的筛选 | 第105-106页 |
| 1.7.3.3 转SgCS基因的拟南芥表型观察 | 第106-108页 |
| 讨论 | 第108-111页 |
| 第二章 SgCAS基因的克隆及功能研究 | 第111-136页 |
| 第一节 SgCAS基因的全长克隆 | 第111-112页 |
| 2.1.1 材料 | 第111页 |
| 2.1.2 方法 | 第111页 |
| 2.1.3 结果 | 第111-112页 |
| 第二节 SgCAS基因的生物信息学分析 | 第112-117页 |
| 2.2.1 试剂与方法 | 第112页 |
| 2.2.2 结果 | 第112-117页 |
| 第三节 SgCAS基因的时空表达模式研究 | 第117-119页 |
| 2.3.1 材料 | 第117页 |
| 2.3.2 方法 | 第117页 |
| 2.3.3 结果 | 第117-119页 |
| 2.3.3.1 SgCAS基因在不同时期罗汉果果实中的表达规律 | 第117-118页 |
| 2.3.3.2 SgCAS基因在罗汉果不同部位中的表达规律 | 第118-119页 |
| 第四节 SgCAS基因的原核表达研究 | 第119-122页 |
| 2.4.1 材料 | 第119页 |
| 2.4.2 方法 | 第119页 |
| 2.4.3 结果 | 第119-122页 |
| 2.4.3.1 SgCAS基因的原核表达载体构建 | 第119-120页 |
| 2.4.3.2 SgCAS重组蛋白的SDS-PAGE分析、融合蛋白的可溶性分析、Western Blot检测 | 第120-122页 |
| 第五节 SgCAS基因在酵母中表达研究 | 第122-125页 |
| 2.5.1 材料 | 第122页 |
| 2.5.2 方法 | 第122页 |
| 2.5.3 结果 | 第122-125页 |
| 2.5.3.1 SgCAS基因的酵母表达载体构建 | 第122-123页 |
| 2.5.3.2 SgCAS-pYES2酵母重组质粒在酵母中的表达及检测 | 第123-125页 |
| 第六节 SgCAS基因的亚细胞定位研究 | 第125-127页 |
| 2.6.1 材料 | 第125页 |
| 2.6.2 方法 | 第125页 |
| 2.6.3 结果 | 第125-127页 |
| 第七节 SgCAS植物RNA干扰载体的构建及转化烟草的研究 | 第127-134页 |
| 2.7.1 材料 | 第127-128页 |
| 2.7.2 方法 | 第128-130页 |
| 2.7.2.1 SgCAS基因植物干扰载体的构建 | 第128-129页 |
| 2.7.2.2 农杆菌感受态的制备 | 第129页 |
| 2.7.2.3 重组植物干扰载体转化农杆菌 | 第129页 |
| 2.7.2.4 农杆菌GV3101介导的烟草转化 | 第129-130页 |
| 2.7.2.5 转基因烟草的PCR鉴定及定量分析 | 第130页 |
| 2.7.3 结果 | 第130-134页 |
| 2.7.3.1 SgCAS基因植物干扰载体的构建 | 第130-131页 |
| 2.7.3.2 转基因植株烟草的获得及PCR鉴定 | 第131-134页 |
| 讨论 | 第134-136页 |
| 第三章 SgSQS基因的克隆及功能初步研究 | 第136-153页 |
| 第一节 SgSQS基因的RACE全长克隆 | 第136-137页 |
| 3.1.1 材料 | 第136页 |
| 3.1.2 方法 | 第136页 |
| 3.1.2.1 SgSQS基因的RACE全长克隆 | 第136页 |
| 3.1.3 结果 | 第136-137页 |
| 第二节 SgSQS全长基因的生物信息学分析 | 第137-141页 |
| 3.2.1 材料 | 第137页 |
| 3.2.2 方法 | 第137页 |
| 3.2.3 结果 | 第137-141页 |
| 第三节 SgSQS基因在罗汉果中时空表达模式 | 第141-143页 |
| 3.3.1 材料 | 第141页 |
| 3.3.2 方法 | 第141页 |
| 3.3.3 结果 | 第141-143页 |
| 3.3.3.1 SgSQS基因在罗汉果果实不同时期的差异表达 | 第141页 |
| 3.3.3.2 SgSQS基因在罗汉果不同组织中的差异表达 | 第141-143页 |
| 第四节 SgSQS基因的原核表达研究 | 第143-146页 |
| 3.4.1 材料 | 第143页 |
| 3.4.2 方法 | 第143页 |
| 3.4.3 结果 | 第143-146页 |
| 3.4.3.1 SgSQS原核表达载体的构建 | 第143-144页 |
| 3.4.3.2 SgCQS重组蛋白的SDS-PAGE分析、融合蛋白的可溶性分析、Western Blot检测 | 第144-146页 |
| 第五节 SgSQS基因的亚细胞定位研究 | 第146-148页 |
| 3.5.1 材料 | 第146页 |
| 3.5.2 方法 | 第146页 |
| 3.5.3 结果 | 第146-148页 |
| 第六节 SgSQS基因的植物过表达载体及植物RNA干扰载体的构建 | 第148-152页 |
| 3.6.1 材料 | 第148页 |
| 3.6.2 方法 | 第148-149页 |
| 3.6.3 结果 | 第149-152页 |
| 3.6.3.1 SgSQS植物过表达载体的构建 | 第149-150页 |
| 3.6.3.2 SgSQS植物干扰载体的构建 | 第150-152页 |
| 讨论 | 第152-153页 |
| 第四章 SgHMGR基因的全长克隆及功能初步研究 | 第153-169页 |
| 第一节 SgHMGR基因的RACE克隆 | 第153-154页 |
| 4.1.1 材料 | 第153页 |
| 4.1.2 方法 | 第153页 |
| 4.1.3 结果 | 第153-154页 |
| 第二节 SgHMGR全长基因的生物信息学分析 | 第154-160页 |
| 4.2.1 材料 | 第154页 |
| 4.2.2 方法 | 第154页 |
| 4.2.3 结果 | 第154-160页 |
| 第三节 SgHMGR基因在罗汉果不同组织中的表达模式 | 第160-161页 |
| 4.3.1 材料 | 第160页 |
| 4.3.2 方法 | 第160页 |
| 4.3.3 结果 | 第160-161页 |
| 第四节 SgHMGR的原核表达研究 | 第161-163页 |
| 4.4.1 材料 | 第161页 |
| 4.4.2 方法 | 第161页 |
| 4.4.3 结果 | 第161-163页 |
| 4.4.3.1 SgHMGR原核表达载体重组质粒的构建 | 第161页 |
| 4.4.3.2 重组质粒的诱导表达产物SDS-PAGE分析 | 第161-162页 |
| 4.4.3.3 Western blotting鉴定 | 第162-163页 |
| 第五节 SgHMGR基因的亚细胞定位研究 | 第163-165页 |
| 4.5.1 材料 | 第163页 |
| 4.5.2 方法 | 第163页 |
| 4.5.3 结果 | 第163-165页 |
| 第六节 SgHMGR基因植物过表达载体和干扰载体的构建 | 第165-168页 |
| 4.6.1 材料 | 第165页 |
| 4.6.2 方法 | 第165-166页 |
| 4.6.3 结果 | 第166-168页 |
| 4.6.3.1 SgHMGR植物过表达载体的构建 | 第166页 |
| 4.6.3.2 SgHMGR植物干扰载体的构建 | 第166-168页 |
| 讨论 | 第168-169页 |
| 参考文献 | 第169-172页 |
| 个人简历 | 第172-174页 |
| 致谢 | 第174-175页 |
