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猪源益生菌对宿主肠道病毒的抗病毒作用研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
文献综述第13-24页
    第一章 肠道益生菌抗病毒作用及其机制研究进展第13-24页
        1.1 益生菌与肠道微生态系统第13-15页
            1.1.1 益生菌的概念和作用第13页
            1.1.2 益生菌所具有的特性第13-14页
            1.1.3 益生菌对肠道微生态系统的影响第14-15页
        1.2 肠道益生菌抗病毒作用研究现状第15-16页
        1.3 肠道益生菌抗病毒作用机制研究进展第16-17页
        1.4 肠道益生菌抗病毒作用研究模型第17页
            1.4.1 肠道益生菌功能研究的体外细胞模型第17页
            1.4.2 肠道益生菌抗病毒作用的体内研究模型第17页
        1.5 益生菌对免疫功能的影响第17-20页
            1.5.1 对肠内细胞信号通路的作用第17-18页
            1.5.2 对体液免疫的作用第18页
            1.5.3 对细胞因子释放的影响第18-19页
            1.5.4 对先d免疫的作用第19页
            1.5.5 对变态反应的作用第19页
            1.5.6 作为免疫调节的载体第19-20页
        1.6 肠道微生态研究方法与进展第20-24页
            1.6.1 宏基因组概念及研究策略第20-21页
            1.6.2 常用宏基因组学研究方法第21-24页
试验研究第24-114页
    第二章 具有抗病毒作用的猪肠道益生菌的筛选第24-38页
        2.1 材料第24-26页
            2.1.1 样品及毒株第24-25页
            2.1.2 细胞第25页
            2.1.3 主要仪器和试剂第25-26页
        2.2 方法第26-30页
            2.2.1 猪肠道益生性乳酸菌的筛选第26-27页
            2.2.2 抗TGEV乳酸菌的筛选第27-29页
            2.2.3 筛选菌的 16S rDNA鉴定第29-30页
        2.3 结果与分析第30-36页
            2.3.1 菌株分离及鉴定第30页
            2.3.2 乳酸菌的生化鉴定第30-31页
            2.3.3 乳酸菌对猪小肠上皮细胞的黏附性能第31-32页
            2.3.4 乳酸菌耐酸耐胆盐试验第32页
            2.3.5 抗TGEV益生菌菌株的筛选第32-35页
            2.3.6 乳酸菌 16S rDNA测序结果第35-36页
        2.4 讨论第36-37页
            2.4.1 猪肠道乳酸菌黏附性和抗逆性筛选第36页
            2.4.2 益生菌的抗TGEV作用初步检测第36-37页
        2.5 小结第37-38页
    第三章 益生菌体外抗病毒作用及免疫调节作用第38-48页
        3.1 材料与方法第38-41页
            3.1.1 材料第38-39页
                3.1.1.1 益生菌,毒株和细胞第38页
                3.1.1.2 主要试剂和仪器第38-39页
            3.1.2 方法第39-41页
                3.1.2.1 TGEV感染ST细胞模型的建立第39页
                3.1.2.2 TGEV在ST细胞上生长曲线的测定第39-41页
        3.2 结果第41-45页
            3.2.1 TGEV感染ST细胞的生长曲线第41页
            3.2.2 益生菌生长曲线的测定第41-42页
            3.2.3 益生菌及其代谢产物的细胞毒性结果第42页
            3.2.4 益生菌及其代谢产物不同接入顺序对TGEV抑制率的比较第42-43页
            3.2.5 益生菌及其代谢产物对TGEV感染抑制作用的半定量RT-PCR检测结果第43页
            3.2.6 益生菌对TGEV感染ST细胞的免疫调节作用第43-45页
        3.4 讨论第45-47页
            3.4.1 CCK-8 法间接比较益生菌及其代谢产物不同接入顺序对TGEV的抑制率第45-46页
            3.4.2 益生菌及其代谢产物对TGEV感染抑制作用的半定量RT-PCR检测第46页
            3.4.3 益生菌及其代谢产物对TGEV感染ST细胞的免疫调节作用第46-47页
        3.5 小结第47-48页
    第四章 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定和动物回归分析第48-65页
        4.1 材料与方法第48-53页
            4.1.1 材料第48-49页
            4.1.2 方法第49-53页
        4.2 结果第53-62页
            4.2.1 病料的PEDV RT-PCR检测结果第53页
            4.2.2 PEDV M和S部分基因扩增第53-54页
            4.2.3 质粒鉴定及测序第54-55页
            4.2.4 M基因的序列分析第55-58页
            4.2.5 S基因测序结果分析第58-60页
            4.2.6 PEDV-WN株动物回归试验第60-62页
        4.3 讨论第62-64页
        4.4 小结第64-65页
    第五章 益生菌对感染PEDV-WN仔猪的保护作用和免疫调节作用第65-82页
        5.1 材料与方法第65-67页
            5.1.1 病毒和益生菌菌株第65页
            5.1.2 试验动物和饲养第65-66页
            5.1.3 动物分组和接种第66页
            5.1.4 样品收集第66页
            5.1.5 组织病理学分析第66页
            5.1.6 半定量PCR法检测病毒的排出第66页
            5.1.7 用ELISA检测血清中细胞因子的浓度第66-67页
            5.1.8 数据统计分析第67页
        5.2 结果与分析第67-80页
            5.2.1 口服益生菌对仔猪感染PEDV-WN病程和死亡率的影响第67-68页
            5.2.2 组织病理学变化分析第68-71页
            5.2.3 益生菌干预对PEDV-WN株毒力的影响第71-72页
            5.2.4 益生菌干预对PEDV-WN感染仔猪的免疫调节作用第72-80页
        5.3 讨论第80-81页
            5.3.1.益生菌可提高感染PEDV-WN株仔猪的生长性能第80页
            5.3.2.益生菌可减轻PEDV感染对仔猪小肠组织造成的病理损伤第80页
            5.3.3.益生菌干预可减少PEDV-WN在靶器官中的增殖第80-81页
            5.3.4.益生菌干预对PEDV-WN感染仔猪的免疫调节作用第81页
        5.4 小结第81-82页
    第六章 PEDV-WN株感染对仔猪肠道微生态平衡的影响第82-114页
        6.1 材料与方法第82-85页
            6.1.1 病毒、益生菌及试验动物第82-83页
            6.1.2 粪便菌群总DNA的提取第83页
            6.1.3 样品标记和分组第83-84页
            6.1.4 试验流程第84页
            6.1.5 高可变区引物设计和PCR扩增第84页
            6.1.6 Illumina测序文库构建(加入接头)第84页
            6.1.7 信息分析流程第84-85页
        6.2 结果与分析第85-111页
            6.2.1 样品测序后clean数据第85-86页
            6.2.2 clean数据质量评估第86-87页
            6.2.3 OTU聚类统计第87-88页
            6.2.4 Alpha多样性分析第88-92页
            6.2.5 Beta多样性分析第92-93页
            6.2.6 样品PCoA分析第93-96页
            6.2.7 物种注释,分类及群落结构分析第96-103页
            6.2.8 物种系统发育进化树第103-104页
            6.2.9 Mestatasts分析第104-111页
        6.3 讨论第111-113页
            6.3.1. PEDV感染后仔猪肠道微生物的组成情况第111-113页
            6.3.2. 益生菌干预对肠道微生态组成的影响第113页
        6.4 小结第113-114页
结论第114-115页
本研究的创新点第115-116页
参考文献第116-126页
主要缩略词和中英文对照表(ABBREVIATION INDEX)第126-127页
致谢第127-128页
作者简介第128页

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