| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展 | 第14-25页 |
| 1.1.1 PRRS的发现 | 第14页 |
| 1.1.2 PRRSV的分类 | 第14-15页 |
| 1.1.3 PRRSV的分子生物学特征 | 第15-19页 |
| 1.1.4 PRRSV的生物学特性及免疫应答 | 第19-21页 |
| 1.1.5 PRRS的诊断及防控 | 第21-22页 |
| 1.1.6 MYH9在PRRSV感染中的作用 | 第22-25页 |
| 1.2 MICRORNA的研究进展 | 第25-34页 |
| 1.2.1 microRNA的发现和形成过程 | 第25页 |
| 1.2.2 microRNA的加工过程 | 第25-27页 |
| 1.2.3 microRNA的转录后调控机制 | 第27页 |
| 1.2.4 microRNA的研究方法 | 第27-28页 |
| 1.2.5 microRNA在病毒感染过程的作用 | 第28-32页 |
| 1.2.6 microRNA在PRRSV感染中的作用 | 第32页 |
| 1.2.7 microRNA let-7 家族的研究进展 | 第32-34页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第34-36页 |
| 第二章 细胞MICRORNA LET-7F-5P通过靶向MYH9抑制PRRSV的复制 | 第36-62页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 2.1.1 细胞和毒株 | 第36页 |
| 2.1.2 主要试剂耗材 | 第36-37页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 2.1.4 引物、microRNA模拟物、抑制物及si RNA序列 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-48页 |
| 2.2.1 生物信息学预测靶向MYH9的细胞microRNAs | 第38-39页 |
| 2.2.2 双荧光素酶报告基因系统检测microRNAs与MYH93’UTR的结合 | 第39-42页 |
| 2.2.3 RNA结合蛋白免疫沉淀检测let-7f-5p与MYH9 mRNA在RISC上结合 | 第42-44页 |
| 2.2.4 细胞microRNA let-7f-5p对MYH9调控机制的研究 | 第44-45页 |
| 2.2.5 PRRSV感染PAMs后let-7f-5p以及MYH9的表达规律检测 | 第45-46页 |
| 2.2.6 细胞microRNA let-7f-5p在PRRSV感染过程中的功能研究 | 第46-48页 |
| 2.3 实验结果 | 第48-60页 |
| 2.3.1 生物信息学预测靶向MYH9的细胞microRNAs | 第48页 |
| 2.3.2 细胞microRNA let-7f-5p特异性结合于MYH93’UTR | 第48-54页 |
| 2.3.3 细胞microRNA let-7f-5p在mRNA和蛋白水平调控MYH9的表达 | 第54-56页 |
| 2.3.4 PRRSV感染PAMs后let-7f-5p的表达下调伴随着MYH9的表达上调 | 第56-58页 |
| 2.3.5 细胞microRNA let-7f-5p抑制了PRRSV在PAMs中的复制 | 第58-60页 |
| 2.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第三章 PRRSV编码的病毒小分子RNA通过靶向NSP2抑制PRRSV的复制 | 第62-88页 |
| 3.1 实验材料 | 第62-64页 |
| 3.1.1 细胞和毒株 | 第62页 |
| 3.1.2 主要试剂耗材 | 第62页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第62页 |
| 3.1.4 引物、microRNA模拟物、抑制物及si RNA序列 | 第62-64页 |
| 3.2 实验方法 | 第64-70页 |
| 3.2.1 PRRSV所编码的病毒小分子RNA的生物信息学预测及分析 | 第64-65页 |
| 3.2.2 PRRSV所编码的病毒小分子RNA的实验验证 | 第65-66页 |
| 3.2.3 抑制PRRSV-vsRNA1对PRRSV复制的影响 | 第66-67页 |
| 3.2.4 过表达PRRSV-vsRNA1对PRRSV复制的影响 | 第67-68页 |
| 3.2.5 PRRSV-vsRNA1在PRRSV感染后的表达规律的检测 | 第68页 |
| 3.2.6 PRRSV-vsRNA1的加工通路验证 | 第68-69页 |
| 3.2.7 PRRSV-vsRNA1的靶基因及结合位点的鉴定 | 第69-70页 |
| 3.3 实验结果 | 第70-85页 |
| 3.3.1 PRRSV所编码的病毒小分子RNA的生物信息学分析及预测 | 第70-71页 |
| 3.3.2 PRRSV-vsRNA1存在于PRRSV感染细胞中的证实 | 第71-72页 |
| 3.3.3 抑制PRRSV-vsRNA1促进了PRRSV在PAMs中复制 | 第72-74页 |
| 3.3.4 过表达PRRSV-vsRNA1抑制了PRRSV在易感细胞中复制 | 第74-78页 |
| 3.3.5 PRRSV-vsRNA1在PRRSV感染的PAMs中动态变化规律 | 第78-80页 |
| 3.3.6 PRRSV-vsRNA1的生物学加工过程依赖细胞蛋白Drosha和Ago2 | 第80-82页 |
| 3.3.7 PRRSV-vsRNA1靶向NSP2抑制PRRSV的复制 | 第82-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-88页 |
| 全文总结 | 第88-90页 |
| 本研究创新点 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-105页 |
| 英文缩略表 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简介 | 第107-108页 |
