| 中文摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 纤维素及纤维素酶 | 第13-15页 |
| 1.1.1 纤维素的来源及其结构 | 第13页 |
| 1.1.2 里氏木霉纤维素酶组成及结构 | 第13-15页 |
| 1.2 里氏木霉表达系统概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 里氏木霉表达系统的特点 | 第15页 |
| 1.2.2 里氏木霉表达重组蛋白的研究进展 | 第15页 |
| 1.2.3 影响里氏木霉表达重组蛋白的因素 | 第15-16页 |
| 1.2.4 里氏木霉遗传改造常用策略 | 第16-17页 |
| 1.3 里氏木霉遗传操作技术 | 第17-19页 |
| 1.3.1 里氏木霉转化技术 | 第17页 |
| 1.3.2 里氏木霉基因定向整合技术 | 第17-18页 |
| 1.3.3 里氏木霉RNA干扰技术 | 第18-19页 |
| 1.4 影响里氏木霉纤维素表达的转录调控因子 | 第19-20页 |
| 1.4.1 转录抑制因子Cre1 | 第19-20页 |
| 1.4.2 转录抑制因子Ace1 | 第20页 |
| 1.4.3 转录激活因子Xyr1 | 第20页 |
| 1.4.4 转录激活因子Ace2 | 第20页 |
| 1.5 纤维素酶的应用 | 第20-21页 |
| 1.5.1 纤维素酶在食品加工中的应用 | 第20-21页 |
| 1.5.2 纤维素酶在饲料行业的应用 | 第21页 |
| 1.5.3 纤维素酶在其他行业的应用 | 第21页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 RNA干扰抑制里氏木霉cre1基因表达重组菌株的构建及性质研究 | 第23-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株、质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 引物合成及测序 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂及试剂盒 | 第23页 |
| 2.1.4 培养基配制 | 第23-24页 |
| 2.1.5 试剂配制 | 第24页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-37页 |
| 2.2.1 里氏木霉基因组提取 | 第25页 |
| 2.2.2 pCre-i载体相关基因序列扩增 | 第25-30页 |
| 2.2.3 酿酒酵母AH109的感受态细胞的制备 | 第30页 |
| 2.2.4 RNA干扰cre1表达载体pCre-i的构建 | 第30-33页 |
| 2.2.5 里氏木霉原生质体的制备及转化 | 第33-34页 |
| 2.2.6 重组转化子的筛选 | 第34-35页 |
| 2.2.7 重组菌的诱导表达 | 第35页 |
| 2.2.8 重组菌的酶学性质测定 | 第35-36页 |
| 2.2.9 cre1的转录丰度测定 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第37-41页 |
| 2.3.1 cre1基因RNAi载体pCre-i的构建 | 第37-38页 |
| 2.3.2 cre1基因RNAi干扰菌株的构建 | 第38-39页 |
| 2.3.3 重组子纤维素酶活性的研究 | 第39-40页 |
| 2.3.4 转化子中cre1的转录丰度测定 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 同步调控里氏木霉xyr1和cre1基因重组菌株的构建及性质研究 | 第43-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第43页 |
| 3.1.1 菌株、质粒 | 第43页 |
| 3.1.2 引物合成及测序 | 第43页 |
| 3.1.3 试剂及试剂盒 | 第43页 |
| 3.1.4 培养基配制 | 第43页 |
| 3.1.5 试剂配制 | 第43页 |
| 3.1.6 主要仪器 | 第43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-47页 |
| 3.2.1 里氏木霉基因组提取 | 第43页 |
| 3.2.2 pPXC载体相关基因序列扩增 | 第43-45页 |
| 3.2.3 协同调控表达载体pPXCT的构建 | 第45-47页 |
| 3.2.4 里氏木霉原生质体的制备及转化 | 第47页 |
| 3.2.5 重组转化子的筛选 | 第47页 |
| 3.2.6 重组菌的诱导表达 | 第47页 |
| 3.2.7 重组菌的酶学性质测定 | 第47页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第47-49页 |
| 3.3.1 同步调控载体pPXCT及pLPX的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.2 同步调控xyr1和cre1基因菌株的构建 | 第48页 |
| 3.3.3 重组子纤维素酶活性的研究 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 本章小结 | 第50-51页 |
| 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简况及联系方式 | 第59-61页 |
