| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 综述与导言 | 第10-28页 |
| ·yigP基因背景介绍 | 第10-11页 |
| ·基因的敲除及功能回补 | 第11-13页 |
| ·利用温敏质粒敲除基因 | 第11-13页 |
| ·质粒的功能回补 | 第13页 |
| ·定点突变 | 第13-14页 |
| ·启动子 | 第14-18页 |
| ·启动子的结构与分类 | 第15-16页 |
| ·启动子的研究方法 | 第16-18页 |
| ·操纵子 | 第18-20页 |
| ·操纵子的结构 | 第18页 |
| ·操纵子的调控 | 第18-19页 |
| ·操纵子的预测与鉴定方法 | 第19-20页 |
| ·sRNA | 第20-27页 |
| ·非编码RNA简介 | 第20页 |
| ·细菌中sRNA简介 | 第20-21页 |
| ·sRNA的发现 | 第21-23页 |
| ·sRNA的研究方法 | 第23-24页 |
| ·sRNA与蛋白质的关系 | 第24-25页 |
| ·生物信息学在sRNA研究中的应用 | 第25-27页 |
| ·课题研究背景及工作目标 | 第27-28页 |
| ·研究背景 | 第27页 |
| ·工作目标 | 第27-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-42页 |
| ·材料与器材 | 第28-36页 |
| ·药品与试剂 | 第28-30页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·细菌培养基 | 第31页 |
| ·缓冲液 | 第31-33页 |
| ·菌种与质粒 | 第33-36页 |
| ·生物学软件及数据库 | 第36页 |
| ·微生物方法 | 第36-37页 |
| ·细菌培养条件 | 第36页 |
| ·菌种的保藏和活化 | 第36-37页 |
| ·遗传学方法 | 第37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第37页 |
| ·分子生物学方法 | 第37-42页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA提取 | 第37-38页 |
| ·DNA纯化回收 | 第38-39页 |
| ·DNA的酶切 | 第39页 |
| ·DNA的连接 | 第39页 |
| ·DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
| ·DNA序列的测定 | 第39页 |
| ·RNA相关实验方法 | 第39-40页 |
| ·β-半乳糖苷酶测活 | 第40-41页 |
| ·southern blot | 第41-42页 |
| 第3章 结果和分析 | 第42-78页 |
| ·大肠杆菌yigP基因最小功能片段的确定 | 第42-49页 |
| ·yigP基因功能片段的第一轮缩小 | 第42-46页 |
| ·yigP基因功能片段上游边界的缩短 | 第46-47页 |
| ·yigP基因功能片段下游边界的缩短 | 第47-49页 |
| ·大肠杆菌yigP基因启动子边界的确定及序列分析 | 第49-63页 |
| ·β-半乳糖苷酶测活体系的建立 | 第50-52页 |
| ·yigP基因启动子下游边界的确定 | 第52-54页 |
| ·yigP基因启动子上游边界的确定 | 第54-56页 |
| ·以绿色荧光蛋白为报告基因检测启动子活性 | 第56-57页 |
| ·yigP启动子-10区的鉴定 | 第57-59页 |
| ·yigP启动子-35区的鉴定 | 第59-61页 |
| ·yigP启动子并非‘extended-10’启动子 | 第61-63页 |
| ·yigP负调控序列的分析 | 第63-66页 |
| ·P42V3和P43V3片段启动子活性比较 | 第63-64页 |
| ·单碱基突变对该负调控序列的影响 | 第64-66页 |
| ·大肠杆菌yigP基因编码一个生长必需的sRNA | 第66-73页 |
| ·yigP基因开放阅读框的分析 | 第66页 |
| ·移码突变回补质粒的构建 | 第66-71页 |
| ·yigP为ncRNA | 第71-72页 |
| ·yigPRNA二级结构的预测 | 第72-73页 |
| ·大肠杆菌yigP基因的操纵子分析 | 第73-78页 |
| 第4章 讨论 | 第78-82页 |
| ·前期实验结果的讨论 | 第78-79页 |
| ·启动子调控序列 | 第79页 |
| ·yigP靶点预测 | 第79-80页 |
| ·RT-PCR中基因组DNA的去除 | 第80页 |
| ·处于操纵子中的yigP | 第80-81页 |
| ·课题前景及展望 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88页 |