| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| ·猪流感及猪流感病毒 | 第12-16页 |
| ·猪流感概述 | 第12-13页 |
| ·猪流感的公共卫生学意义 | 第13页 |
| ·猪流感病毒的分子生物学特性 | 第13-16页 |
| ·反向遗传操作技术的应用及发展趋势 | 第16-19页 |
| ·应用于正链RNA病毒 | 第17页 |
| ·应用于负链RNA病毒 | 第17-18页 |
| ·流感病毒的反向遗传操作技术 | 第18页 |
| ·国内外反向遗传操作技术的研究动态和趋势 | 第18-19页 |
| ·流感病毒分子致病机理 | 第19-21页 |
| ·流感病毒八个片段毒力相关氨基酸 | 第19-21页 |
| ·PB2627位氨基酸 | 第21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立 | 第22-37页 |
| ·材料方法 | 第23页 |
| ·毒株 | 第23页 |
| ·菌种及细胞 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·病毒的增殖 | 第23-24页 |
| ·引物设计及合成 | 第24-27页 |
| ·重组质粒的构建、鉴定以及纯化 | 第27-30页 |
| ·病毒的拯救 | 第30-32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·RT-PCR扩增产物结果 | 第32页 |
| ·重组PBD阳性质粒菌液鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·拯救病毒鉴定结果 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 禽源H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立 | 第37-44页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·毒株 | 第37页 |
| ·菌种 | 第37页 |
| ·细胞 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·病毒增殖 | 第38页 |
| ·引物设计及合成 | 第38页 |
| ·RNA的提取及cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·八个目的片段的扩增 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的构建、鉴定及纯化 | 第40-41页 |
| ·病毒的拯救 | 第41页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·RT-PCR扩增产物结果 | 第41页 |
| ·重组PBD阳性质粒菌液鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·序列分析鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 PB2 K627E突变对古典猪流感病毒生物学特性的影响 | 第44-53页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·毒株 | 第44页 |
| ·菌种 | 第44-45页 |
| ·细胞 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-47页 |
| ·体外致病性检测 | 第45-46页 |
| ·体内致病性检测 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·不同时间点MDCK细胞状态的观察 | 第47-48页 |
| ·空斑形态的观察 | 第48页 |
| ·拯救株与突变株生长曲线的绘制 | 第48-49页 |
| ·小鼠体重变化及存活率的结果 | 第49-50页 |
| ·病毒滴度的检测 | 第50页 |
| ·肺脏病理切片的观察 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
