| 附件 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| ·PEDV的分类地位 | 第13页 |
| ·PEDV的形态结构及理化性质 | 第13页 |
| ·PEDV的细胞培养特性 | 第13-14页 |
| ·PEDV的基因组结构与功能 | 第14-15页 |
| ·PEDV的主要基因组结构与功能 | 第15-16页 |
| ·主要结构基因及其功能 | 第15页 |
| ·非结构基因及其功能 | 第15-16页 |
| ·PEDV的主要蛋白结构与功能 | 第16-17页 |
| ·结构蛋白及其功能 | 第16-17页 |
| ·非结构蛋白及其功能 | 第17页 |
| ·PEDV的诊断技术 | 第17-18页 |
| ·临床诊断及病理组织变化 | 第17页 |
| ·实验室诊断方法 | 第17-18页 |
| ·免疫预防 | 第18-19页 |
| ·PED灭活苗 | 第19页 |
| ·PEDV弱毒疫苗 | 第19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 猪流行性腹泻病毒的分离、鉴定及全基因组分析 | 第20-37页 |
| ·主要材料 | 第20-21页 |
| ·载体、菌株和试剂盒 | 第20页 |
| ·主要试剂及配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·分子生物学软件 | 第21页 |
| ·样品采集 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-26页 |
| ·粪样的处理 | 第21页 |
| ·变异PEDV的分离及鉴定 | 第21页 |
| ·免疫荧光（IFA）检测变异PEDV | 第21-22页 |
| ·病毒蚀斑纯化 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·反转录和双链cDNA合成 | 第24页 |
| ·PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·3’RACE和 5’RACE | 第25页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的测序 | 第26页 |
| ·变异PEDV的序列分析 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-35页 |
| ·PEDV的分离及鉴定 | 第26-27页 |
| ·PEDV的全基因组克隆和序列分析 | 第27-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 PEDV N蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 | 第37-48页 |
| ·材料与方法 | 第37-41页 |
| ·主要材料与试剂 | 第37页 |
| ·PEDV重组N蛋白的原核表达与纯化 | 第37-39页 |
| ·间接ELISA检测方法的初步建立 | 第39-40页 |
| ·间接ELISA检测方法临界值的确立 | 第40页 |
| ·符合率分析 | 第40页 |
| ·重复性测试 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-47页 |
| ·PEDV重组N蛋白的原核表达及纯化 | 第41-43页 |
| ·间接ELISA方法的建立及条件优化结果 | 第43-45页 |
| ·间接ELISA临界值的确立 | 第45-46页 |
| ·间接ELISA符合率试验结果 | 第46页 |
| ·间接ELISA重复性试验结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 抗N蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的初步建立 | 第48-63页 |
| ·材料与方法 | 第48-54页 |
| ·主要材料与试剂 | 第48页 |
| ·包被抗原的制备 | 第48页 |
| ·抗N蛋白单克隆抗体的制备 | 第48-52页 |
| ·抗N蛋白单克隆抗体的初步应用 | 第52-53页 |
| ·竞争ELISA检测方法的初步建立 | 第53-54页 |
| ·竞争ELISA检测方法临界值的确定 | 第54页 |
| ·符合率分析 | 第54页 |
| ·重复性测试 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-61页 |
| ·包被抗原的制备 | 第54页 |
| ·抗N蛋白单克隆抗体的制备 | 第54-56页 |
| ·抗N蛋白单克隆抗体的初步应用 | 第56-57页 |
| ·竞争ELISA检测方法的建立及条件优化结果 | 第57-60页 |
| ·竞争ELISA检测方法临界值的确定 | 第60页 |
| ·竞争ELISA检测方法符合率试验结果 | 第60页 |
| ·竞争ELISA检测方法重复性试验结果 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
