摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 绪论 | 第9-19页 |
·共轭亚油酸研究概述 | 第9-12页 |
·共轭亚油酸简介 | 第9页 |
·共轭亚油酸的生理功能 | 第9-10页 |
·共轭亚油酸的来源 | 第10-12页 |
·生物转化法合成共轭亚油酸研究进展 | 第12-14页 |
·共轭亚油酸生物转化机制 | 第12-13页 |
·利用基因工程手段生物转化CLA研究概况 | 第13-14页 |
·产油真菌高山被孢霉概述 | 第14-17页 |
·高山被孢霉的生理特性 | 第14-15页 |
·高山被孢霉合成多不饱和脂肪酸的研究简介 | 第15-16页 |
·高山被孢霉的遗传表达系统研究概况 | 第16-17页 |
·立题依据与主要研究内容 | 第17-19页 |
·立题依据 | 第17-18页 |
·主要研究内容 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-25页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·菌株及质粒 | 第19页 |
·实验仪器 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要试剂配制 | 第19-20页 |
·培养基及其配方 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-25页 |
·菌株的培养与保藏 | 第20页 |
·亚油酸异构酶基因的克隆以及密码子优化 | 第20-21页 |
·亚油酸异构酶基因二元表达载体的构建 | 第21-22页 |
·异源表达亚油酸异构酶高山被孢霉重组菌的获得 | 第22-23页 |
·高山被孢霉重组菌株转录水平分析 | 第23-24页 |
·高山被孢霉重组菌株蛋白表达水平分析 | 第24页 |
·高山被孢霉菌株生物量及脂肪酸组成测定 | 第24页 |
·高山被孢霉脂质存在形式分析 | 第24-25页 |
3 结果与讨论 | 第25-42页 |
·高山被孢霉异源表达亚油酸异构酶重组菌株的构建 | 第25-33页 |
·PAI基因扩增及密码子优化 | 第25-27页 |
·PAI基因二元表达载体构建 | 第27-28页 |
·根癌农杆菌介导法转化高山被孢霉 | 第28-31页 |
·高山被孢霉重组菌株的筛选和鉴定 | 第31-33页 |
·高山被孢霉重组菌株中亚油酸异构酶表达情况的研究 | 第33-37页 |
·重组菌株中亚油酸异构酶基因的转录 | 第33-34页 |
·重组菌株中亚油酸异构酶蛋白表达 | 第34-36页 |
·重组菌株脂质组成分析 | 第36-37页 |
·高山被孢霉生物合成共轭亚油酸的限制因素及优化策略研究 | 第37-42页 |
·高山被孢霉中脂质存在形式分析 | 第38-39页 |
·外源添加游离亚油酸对共轭亚油酸产量的影响 | 第39-40页 |
·添加特异性抑制剂对重组菌产共轭亚油酸的影响 | 第40页 |
·同时添加游离态亚油酸及特异性抑制剂对重组菌产共轭亚油酸的影响 | 第40-42页 |
主要结论与展望 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |