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高山被孢霉生物合成共轭亚油酸重组菌株的构建及研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
缩略词表第8-9页
1 绪论第9-19页
   ·共轭亚油酸研究概述第9-12页
     ·共轭亚油酸简介第9页
     ·共轭亚油酸的生理功能第9-10页
     ·共轭亚油酸的来源第10-12页
   ·生物转化法合成共轭亚油酸研究进展第12-14页
     ·共轭亚油酸生物转化机制第12-13页
     ·利用基因工程手段生物转化CLA研究概况第13-14页
   ·产油真菌高山被孢霉概述第14-17页
     ·高山被孢霉的生理特性第14-15页
     ·高山被孢霉合成多不饱和脂肪酸的研究简介第15-16页
     ·高山被孢霉的遗传表达系统研究概况第16-17页
   ·立题依据与主要研究内容第17-19页
     ·立题依据第17-18页
     ·主要研究内容第18-19页
2 材料与方法第19-25页
   ·实验材料第19-20页
     ·菌株及质粒第19页
     ·实验仪器第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要试剂配制第19-20页
     ·培养基及其配方第20页
   ·实验方法第20-25页
     ·菌株的培养与保藏第20页
     ·亚油酸异构酶基因的克隆以及密码子优化第20-21页
     ·亚油酸异构酶基因二元表达载体的构建第21-22页
     ·异源表达亚油酸异构酶高山被孢霉重组菌的获得第22-23页
     ·高山被孢霉重组菌株转录水平分析第23-24页
     ·高山被孢霉重组菌株蛋白表达水平分析第24页
     ·高山被孢霉菌株生物量及脂肪酸组成测定第24页
     ·高山被孢霉脂质存在形式分析第24-25页
3 结果与讨论第25-42页
   ·高山被孢霉异源表达亚油酸异构酶重组菌株的构建第25-33页
     ·PAI基因扩增及密码子优化第25-27页
     ·PAI基因二元表达载体构建第27-28页
     ·根癌农杆菌介导法转化高山被孢霉第28-31页
     ·高山被孢霉重组菌株的筛选和鉴定第31-33页
   ·高山被孢霉重组菌株中亚油酸异构酶表达情况的研究第33-37页
     ·重组菌株中亚油酸异构酶基因的转录第33-34页
     ·重组菌株中亚油酸异构酶蛋白表达第34-36页
     ·重组菌株脂质组成分析第36-37页
   ·高山被孢霉生物合成共轭亚油酸的限制因素及优化策略研究第37-42页
     ·高山被孢霉中脂质存在形式分析第38-39页
     ·外源添加游离亚油酸对共轭亚油酸产量的影响第39-40页
     ·添加特异性抑制剂对重组菌产共轭亚油酸的影响第40页
     ·同时添加游离态亚油酸及特异性抑制剂对重组菌产共轭亚油酸的影响第40-42页
主要结论与展望第42-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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