中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-19页 |
前言 | 第19-25页 |
参考文献 | 第21-25页 |
第一章 实验材料与一般方法 | 第25-37页 |
1 实验材料 | 第25-30页 |
·材料 | 第25-30页 |
2 主要仪器设备 | 第30-31页 |
3 数据库及软件 | 第31-32页 |
4 常用的实验方法 | 第32-37页 |
·主要试验器具的准备 | 第32页 |
·总RNA的抽提 | 第32页 |
·DNA的抽提 | 第32-33页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
·SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第33页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与重组DNA的转化 | 第33-34页 |
·石蜡切片的取材与制作 | 第34-35页 |
·电镜样品的取材与制作 | 第35-36页 |
·实时定量PCR (qPCR) | 第36-37页 |
第二章 嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症模型的构建 | 第37-53页 |
引言 | 第37页 |
1 材料与方法 | 第37-41页 |
·材料 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-41页 |
2 结果与分析 | 第41-48页 |
·嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症模型 | 第41-43页 |
·嗜水气单胞菌诱导的肠道组织变化 | 第43-45页 |
·肠道上皮细胞表面的超微结构变化 | 第45-46页 |
·肠道MPO活性变化 | 第46-47页 |
·嗜水气单胞菌攻毒处理引起的肠道内促炎细胞因子IL-1b、IL-8 和TNF-a的上调表达 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
第三章 嗜水气单胞菌诱导草鱼肠炎的肠道转录组比较研究 | 第53-82页 |
引言 | 第53-54页 |
1 材料与方法 | 第54-60页 |
·材料 | 第54页 |
·方法 | 第54-60页 |
2 结果与分析 | 第60-76页 |
·RNA提取与质量检测 | 第60-61页 |
·草鱼RNA-seq分析和de novo组装 | 第61-62页 |
·预测蛋白质注释 | 第62-63页 |
·Unigene功能注释 | 第63-64页 |
·GO功能注释 | 第64-65页 |
·Unigene代谢通路分析 | 第65-67页 |
·鉴定和注释差异表达基因 | 第67-68页 |
·差异基因的GO分析 | 第68-73页 |
·差异基因的Pathway分析 | 第73-75页 |
·差异表达基因的qPCR验证 | 第75-76页 |
·肠道炎症通路中相关基因在嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道中的表达变化..57 | 第76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
第四章 草鱼IL-23P19 基因的克隆及其在肠道炎症中的表达特征分析 | 第82-108页 |
引言 | 第82页 |
1 材料和方法 | 第82-91页 |
·材料 | 第82页 |
·方法 | 第82-91页 |
2 结果与分析 | 第91-103页 |
·IL-23p19 全长cDNA的克隆 | 第91-98页 |
·gcIL-23p19 基因组序列及其结构 | 第98-100页 |
·gcIL-23p19 的亚细胞定位 | 第100-101页 |
·gcIL-23p19 基因的表达谱 | 第101页 |
·嗜水气单胞菌感染对草鱼组织gcIL-23p19 基因表达的影响 | 第101-102页 |
·嗜水气单胞菌不同方式感染后gcIL-23p19 在草鱼肠道中的表达差异 | 第102-103页 |
3 讨论 | 第103-106页 |
参考文献 | 第106-108页 |
第五章 草鱼IL-23R基因克隆及其在肠道炎症中的功能分析 | 第108-142页 |
引言 | 第108-109页 |
1 材料与方法 | 第109-117页 |
·材料 | 第109页 |
·方法 | 第109-117页 |
2 结果与分析 | 第117-137页 |
·gcIL-23R基因的克隆及其生物信息学分析 | 第117-130页 |
·gcIL-23R基因的原核表达与多克隆抗体制备 | 第130-132页 |
·gcIL-23R基因的表达谱分析 | 第132-133页 |
·嗜水气单胞菌诱导对各组织gcIL-23R表达的影响 | 第133-134页 |
·嗜水气单胞菌不同感染方式对gcIL-23R在肠道诱导表达的影响 | 第134-135页 |
·gcIL-23R在嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症模型中的作用 | 第135-137页 |
3 讨论 | 第137-139页 |
参考文献 | 第139-142页 |
第六章 总结与思考 | 第142-144页 |
1 本研究的结论和意义 | 第142-143页 |
2 本研究的不足之处 | 第143-144页 |
文献综述 | 第144-182页 |
1 硬骨鱼类肠道粘膜免疫与肠道炎症的研究进展 | 第144-154页 |
·硬骨鱼类肠道粘膜免疫 | 第144-150页 |
·鱼类的肠道炎症 | 第150-151页 |
·炎症因子在鱼类肠道炎症中的作用 | 第151-152页 |
·鱼类肠炎模型 | 第152-154页 |
2 IL-23 和IL-23R的研究进展 | 第154-163页 |
·IL-23 和IL-23R的发现与分子结构 | 第154-156页 |
·IL-23 的分泌及作用机理 | 第156-157页 |
·IL-23R与信号传导 | 第157-159页 |
·IL-23 与疾病的关系 | 第159-163页 |
·IL-23 作为治疗炎症性疾病靶点的应用前景 | 第163页 |
参考文献 | 第163-182页 |
攻读博士学位期间公开发表的论文 | 第182-183页 |
本研究资助项目 | 第183-184页 |
中英文缩略词汇表 | 第184-186页 |
致谢 | 第186-187页 |