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嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症机制研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-19页
前言第19-25页
 参考文献第21-25页
第一章 实验材料与一般方法第25-37页
 1 实验材料第25-30页
   ·材料第25-30页
 2 主要仪器设备第30-31页
 3 数据库及软件第31-32页
 4 常用的实验方法第32-37页
   ·主要试验器具的准备第32页
   ·总RNA的抽提第32页
   ·DNA的抽提第32-33页
   ·琼脂糖凝胶电泳第33页
   ·SDS-PAGE蛋白质电泳第33页
   ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与重组DNA的转化第33-34页
   ·石蜡切片的取材与制作第34-35页
   ·电镜样品的取材与制作第35-36页
   ·实时定量PCR (qPCR)第36-37页
第二章 嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症模型的构建第37-53页
 引言第37页
 1 材料与方法第37-41页
   ·材料第37-38页
   ·方法第38-41页
 2 结果与分析第41-48页
     ·嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症模型第41-43页
   ·嗜水气单胞菌诱导的肠道组织变化第43-45页
   ·肠道上皮细胞表面的超微结构变化第45-46页
   ·肠道MPO活性变化第46-47页
   ·嗜水气单胞菌攻毒处理引起的肠道内促炎细胞因子IL-1b、IL-8 和TNF-a的上调表达第47-48页
 3 讨论第48-50页
 参考文献第50-53页
第三章 嗜水气单胞菌诱导草鱼肠炎的肠道转录组比较研究第53-82页
 引言第53-54页
 1 材料与方法第54-60页
   ·材料第54页
   ·方法第54-60页
 2 结果与分析第60-76页
   ·RNA提取与质量检测第60-61页
   ·草鱼RNA-seq分析和de novo组装第61-62页
   ·预测蛋白质注释第62-63页
   ·Unigene功能注释第63-64页
   ·GO功能注释第64-65页
   ·Unigene代谢通路分析第65-67页
   ·鉴定和注释差异表达基因第67-68页
   ·差异基因的GO分析第68-73页
   ·差异基因的Pathway分析第73-75页
   ·差异表达基因的qPCR验证第75-76页
   ·肠道炎症通路中相关基因在嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道中的表达变化..57第76页
 3 讨论第76-78页
 参考文献第78-82页
第四章 草鱼IL-23P19 基因的克隆及其在肠道炎症中的表达特征分析第82-108页
 引言第82页
 1 材料和方法第82-91页
   ·材料第82页
   ·方法第82-91页
 2 结果与分析第91-103页
   ·IL-23p19 全长cDNA的克隆第91-98页
   ·gcIL-23p19 基因组序列及其结构第98-100页
   ·gcIL-23p19 的亚细胞定位第100-101页
   ·gcIL-23p19 基因的表达谱第101页
   ·嗜水气单胞菌感染对草鱼组织gcIL-23p19 基因表达的影响第101-102页
   ·嗜水气单胞菌不同方式感染后gcIL-23p19 在草鱼肠道中的表达差异第102-103页
 3 讨论第103-106页
 参考文献第106-108页
第五章 草鱼IL-23R基因克隆及其在肠道炎症中的功能分析第108-142页
 引言第108-109页
 1 材料与方法第109-117页
   ·材料第109页
   ·方法第109-117页
 2 结果与分析第117-137页
   ·gcIL-23R基因的克隆及其生物信息学分析第117-130页
   ·gcIL-23R基因的原核表达与多克隆抗体制备第130-132页
   ·gcIL-23R基因的表达谱分析第132-133页
   ·嗜水气单胞菌诱导对各组织gcIL-23R表达的影响第133-134页
   ·嗜水气单胞菌不同感染方式对gcIL-23R在肠道诱导表达的影响第134-135页
   ·gcIL-23R在嗜水气单胞菌诱导的草鱼肠道炎症模型中的作用第135-137页
 3 讨论第137-139页
 参考文献第139-142页
第六章 总结与思考第142-144页
 1 本研究的结论和意义第142-143页
 2 本研究的不足之处第143-144页
文献综述第144-182页
 1 硬骨鱼类肠道粘膜免疫与肠道炎症的研究进展第144-154页
   ·硬骨鱼类肠道粘膜免疫第144-150页
   ·鱼类的肠道炎症第150-151页
   ·炎症因子在鱼类肠道炎症中的作用第151-152页
   ·鱼类肠炎模型第152-154页
 2 IL-23 和IL-23R的研究进展第154-163页
   ·IL-23 和IL-23R的发现与分子结构第154-156页
   ·IL-23 的分泌及作用机理第156-157页
   ·IL-23R与信号传导第157-159页
   ·IL-23 与疾病的关系第159-163页
   ·IL-23 作为治疗炎症性疾病靶点的应用前景第163页
 参考文献第163-182页
攻读博士学位期间公开发表的论文第182-183页
本研究资助项目第183-184页
中英文缩略词汇表第184-186页
致谢第186-187页

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