| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-58页 |
| 1、家蚕病毒及家蚕病毒病 | 第15-16页 |
| 2、家蚕浓核病毒研究现状 | 第16-26页 |
| ·、BmBDV分类 | 第16-17页 |
| ·、BmBDV理化特性 | 第17页 |
| ·、BmBDV病理、病症 | 第17-18页 |
| ·、BmBDV宿主域及品种感受性 | 第18-19页 |
| ·、BmBDV基因组结构、复制及转录 | 第19-21页 |
| ·、BmBDV编码蛋白 | 第21-23页 |
| ·、BmBDV诊断 | 第23-24页 |
| ·、BmBDV精制 | 第24-25页 |
| ·、家蚕浓核病毒中国（镇江）株 | 第25-26页 |
| ·、浓核病毒的生物学应用 | 第26页 |
| 3. 杆状病毒表达系统 | 第26-30页 |
| ·Bac-to-Bac杆状病毒表达载体系统 | 第26-28页 |
| ·BmBac-to-Bac杆状病毒表达系统 | 第28-29页 |
| ·BMBAC-TO-BAC杆状病毒表达系统的优势 | 第29-30页 |
| ·BmBac-to-Bac杆状病毒表达系统的缺陷 | 第30页 |
| 4、质型多角体病毒研究进展 | 第30-38页 |
| ·质型多角体病毒 | 第30-32页 |
| ·质型多角体病毒的研究进展 | 第32-38页 |
| 5. BMCPV研究进展 | 第38-47页 |
| ·BmCPV的变异株 | 第38页 |
| ·BmCPV的侵染过程 | 第38-39页 |
| ·家蚕感染BmCPV的典型症状 | 第39页 |
| ·BmCPV病毒粒子的形态、结构及组成 | 第39-41页 |
| ·BmCPV的多角体 | 第41-42页 |
| ·BmCPV的抗性分析 | 第42页 |
| ·家蚕质型多角体病的诊断与防治 | 第42页 |
| ·质型多角体病毒的应用 | 第42-43页 |
| ·BmCPV基因组结构及其功能 | 第43-47页 |
| 参考文献 | 第47-58页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第58-65页 |
| 1、研究目的及意义 | 第58-59页 |
| 2、研究内容 | 第59-60页 |
| ·重组质粒pGEM-VD1 对家蚕BmN细胞的转染及鉴定 | 第59页 |
| ·重组杆状病毒BmBac-VD1 的构建、对家蚕BmN细胞的转染及鉴定 | 第59页 |
| ·含有BmCPV S1-S10 片段的重组质粒pIZT-CS1—pIZT-CS10 的构建。含T7 RNA聚合酶基因的重组质粒pIZT-T7pol的构建 | 第59页 |
| ·基于质粒的BmCPV反向遗传学系统的研究 | 第59页 |
| ·缺失BmCPV S2 或S7 片段对病毒复制增殖的影响 | 第59页 |
| ·不同品种家蚕感染BmCPV后中肠组织的比较转录组学研究，包括差异表达基因的venn分析、GO富集分析、KEGG富集分析以及STRING分析 | 第59-60页 |
| 3、实验流程 | 第60-65页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第65-76页 |
| 1、实验材料 | 第65-68页 |
| ·、生物材料 | 第65页 |
| ·、载体、工具酶及其它 | 第65页 |
| ·、主要实验试剂配方及配制方法 | 第65-68页 |
| 2、实验常用仪器设备 | 第68-69页 |
| 3、实验方法 | 第69-76页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第69页 |
| ·酶切反应 | 第69页 |
| ·、连接反应 | 第69-70页 |
| ·、感受态细胞制备 | 第70页 |
| ·、质粒或连接产物转化 | 第70页 |
| ·、菌液PCR | 第70页 |
| ·、碱裂解法质粒抽提 | 第70-71页 |
| ·、琼脂糖凝胶电泳、紫外观测及DNA条带割取 | 第71页 |
| ·、蛋白电泳样品准备 | 第71页 |
| ·、SDS-PAGE | 第71-72页 |
| ·、SDS-PAGE凝胶的染色与脱色 | 第72页 |
| ·、Western blotting | 第72-73页 |
| ·、免疫荧光 | 第73页 |
| ·、负染 | 第73页 |
| ·细胞切片与透射电镜（TEM） | 第73页 |
| ·、家蚕微孢子虫的扩增、粗提及纯化 | 第73-74页 |
| ·、BmCPV扩增及病毒粒子制备 | 第74页 |
| ·、BmCPV多角体纯化 | 第74页 |
| ·、Percol非连续密度梯度离心 | 第74页 |
| ·、超速离心 | 第74页 |
| ·、细胞培养及冻存 | 第74-75页 |
| ·、细胞转染 | 第75-76页 |
| 第四章 BMBDV反向遗传学系统的研究 | 第76-90页 |
| 摘要 | 第76-77页 |
| 1、材料与方法 | 第77-80页 |
| ·、生物材料 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78-80页 |
| 2、结果与分析 | 第80-86页 |
| ·、重组质粒pGEM-VD1 对家蚕BmN细胞的感染性 | 第80-81页 |
| ·、重组质粒转染细胞的Western blotting鉴定 | 第81-82页 |
| ·、重组质粒转染细胞的免疫荧光鉴定 | 第82页 |
| ·、重组病毒BmBacmid-VD1 的构建与鉴定 | 第82-83页 |
| ·重组病毒BmBacmid-VD1 DNA对家蚕BmN细胞的转染 | 第83-84页 |
| ·、重组病毒BmBacmid-VD1 的Western blotting鉴定与免疫荧光鉴定 | 第84页 |
| ·、重组病毒的电镜观察 | 第84-85页 |
| ·、球状病毒样颗粒内容物的抽提及鉴定 | 第85-86页 |
| 3、讨论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 第五章 BMCPV基因组各片段的分子克隆 | 第90-103页 |
| 摘要 | 第90-91页 |
| 1.材料与方法 | 第91-94页 |
| ·材料 | 第91页 |
| ·方法 | 第91-94页 |
| 2.结果与分析 | 第94-101页 |
| ·带有S1 片段全长cDNA的重组质粒pIZT-CS1 的构建与鉴定 | 第94-95页 |
| ·重组质粒p IZT-CS2 的构建与鉴定 | 第95-96页 |
| ·重组质粒p IZT-CS3 的构建与鉴定 | 第96页 |
| ·重组质粒p IZT-CS4 的构建与鉴定 | 第96-97页 |
| ·重组质粒p IZT-CS5 的构建与鉴定 | 第97-98页 |
| ·重组质粒p IZT-CS6 的构建与鉴定 | 第98页 |
| ·重组质粒p IZT-CS7 的构建与鉴定 | 第98-99页 |
| ·重组质粒p IZT-CS8 的构建与鉴定 | 第99页 |
| ·重组质粒p IZT-CS9 的构建与鉴定 | 第99-100页 |
| ·重组质粒pIZT-CS10 的构建与鉴定 | 第100页 |
| ·重组质粒pIZT-CS10(DsRed)的构建与鉴定 | 第100-101页 |
| 3. 讨论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-103页 |
| 第六章 基于体外转录的病毒RNA的BMCPV反向遗传学系统的构建 | 第103-121页 |
| 摘要 | 第103-104页 |
| 1、材料与方法 | 第104-109页 |
| ·、实验材料 | 第104-105页 |
| ·、实验方法 | 第105-109页 |
| 2. 结果与分析 | 第109-117页 |
| ·BmCPV 10 个基因组片段RNA的体外转录 | 第109-110页 |
| ·BmCPV S1-S10 mRNA共转染细胞的形态变化 | 第110-111页 |
| ·重组质粒pIZT-T7pol的构建 | 第111-112页 |
| ·重组质粒pIZT-T7pol转染细胞及筛选 | 第112页 |
| ·Western blotting鉴定 | 第112-113页 |
| ·免疫荧光鉴定 | 第113页 |
| ·BmCPV S1-S9 RNA与S10（Ds Red）RNA共转染细胞的转接试验 | 第113-116页 |
| ·Real-time PCR验证 | 第116-117页 |
| ·透射电镜观察 | 第117页 |
| 3、讨论 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-121页 |
| 第七章 缺失S2、S7 RNA对BMCPV增殖的影响 | 第121-130页 |
| 摘要 | 第121-122页 |
| 1、材料与方法 | 第122-123页 |
| ·、实验材料 | 第122-123页 |
| ·、实验方法 | 第123页 |
| 2、结果 | 第123-127页 |
| ·共转染细胞的免疫荧光鉴定 | 第123-125页 |
| ·、共转染细胞培养上清的转接试验 | 第125-127页 |
| 3、讨论 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-130页 |
| 第八章 不同抗性家蚕品种感染家蚕质型多角体病毒的中肠组织比较转录组学研究 | 第130-163页 |
| 摘要 | 第130-131页 |
| 1、材料与方法 | 第131-136页 |
| ·、实验材料 | 第131页 |
| ·、主要实验试剂及仪器 | 第131页 |
| ·、实验方法 | 第131-136页 |
| 2、结果与分析 | 第136-157页 |
| ·家蚕中肠组织RNA的提取与质量检测 | 第136-137页 |
| ·Reads预处理及参考基因组比对 | 第137-138页 |
| ·感染BmCPV家蚕与正常家蚕中肠组织差异表达基因分析 | 第138-142页 |
| ·GO分类及富集分析 | 第142-149页 |
| ·KEGG pathway分析 | 第149-155页 |
| ·STRING分析 | 第155-157页 |
| 3、讨论 | 第157-160页 |
| 参考文献 | 第160-163页 |
| 结论 | 第163-164页 |
| 攻读学位期间科研情况 | 第164-165页 |
| 资助项目 | 第165-166页 |
| 附录1 | 第166-167页 |
| 1、缩略词表 | 第166-167页 |
| 附录2 本研究中所涉及的引物序列 | 第167-169页 |
| 附录3 | 第169-299页 |
| 致谢 | 第299-30页 |
