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橘核柠檬苦素类化合物生物合成功能基因的克隆、表达及成分积累研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 前言第9-25页
   ·本草考证第9-11页
     ·橘核品种本草考证第9-10页
     ·橘核功效本草考证第10-11页
   ·橘核现代应用第11-12页
   ·橘核及柠檬苦素类化合物药理研究第12-13页
     ·镇痛、抗炎第12页
     ·抗肿瘤第12-13页
     ·杀虫第13页
   ·柠檬苦素类成分研究进展第13-16页
   ·柠檬苦素类化合物生物合成研究概况第16-21页
     ·柠檬苦素类化合物生物合成上游阶段第16-17页
     ·柠檬苦素类化合物生物合成中游阶段第17-18页
     ·柠檬苦素类化合物生物合成下游阶段第18-21页
   ·柠檬苦素类化合物生物合成路径中的关键功能基因第21-24页
     ·角鲨烯合成酶基因(ss)第22页
     ·角鲨烯环氧酶基因(se)第22-23页
     ·柠檬苦素葡萄糖基转移酶基因(lgt)第23-24页
     ·其他第24页
   ·小结第24-25页
第二章 功能基因克隆和生物信息学分析第25-59页
   ·材料、试剂与仪器第25-30页
     ·实验材料第25-28页
     ·试剂第28页
     ·仪器第28-29页
     ·实验材料的制备第29-30页
   ·样品总RNA提取和逆转录实验第30-32页
     ·样本总RNA提取第30-31页
     ·样本总RNA完整性检测第31-32页
     ·逆转录反应第32页
   ·功能基因克隆第32-40页
     ·种子(胚)总RNA样品的提取和cDNA第一链的合成第33页
     ·功能基因引物设计第33-35页
     ·功能基因的PCR扩增第35-36页
     ·PCR产物的凝胶电泳检测第36-37页
     ·PCR产物回收第37-38页
     ·PCR产物测序第38-40页
   ·功能基因生物信息学分析第40-56页
     ·角鲨烯合成酶基因(ss)生物信息学分析第40-45页
     ·角鲨烯环氧酶基因(se)生物信息学分析第45-50页
     ·葡萄糖基转移酶基因(lgt)生物信息学分析第50-56页
   ·小结第56-59页
     ·样本RNA提取第56页
     ·功能基因生物信息学分析第56-59页
第三章 柠檬苦素类化合物生物合成过程中功能基因的表达第59-69页
   ·样本总RNA的提取和cDNA第一链的合成第59页
   ·角鲨烯合成酶基因(ss)RT—PCR反应第59-60页
   ·角鲨烯环氧酶基因(se)RT—PCR反应第60-61页
   ·葡萄糖基转移酶基因(lgt)RT—PCR反应第61-62页
   ·RT-PCR反应结果第62页
   ·样本RT-PCR反应扩增曲线、溶解曲线第62-64页
   ·样本基因表达结果第64-66页
   ·同一器官中不同基因的表达结果分析第66-68页
   ·小结第68-69页
第四章 有效成分在各器官积累规律研究第69-83页
   ·橘核LC-MS分析第69-74页
     ·实验材料第69页
     ·色谱、质谱条件第69页
     ·样品处理第69-70页
     ·LC-MS分析结果第70-74页
   ·有效成分在各器官积累规律研究第74-75页
     ·实验材料第74页
     ·试剂第74页
     ·仪器第74-75页
   ·对照品溶液的制备第75页
   ·供试品溶液的制备第75页
   ·色谱条件第75页
   ·方法学考察第75-78页
     ·标准曲线的制备第75-77页
     ·精密度试验第77页
     ·稳定性试验第77-78页
     ·重复性试验第78页
     ·加样回收试验第78页
   ·样本中有效成分含量测定结果第78-80页
   ·不同器官柠檬苦素类物质含量结果分析第80-82页
   ·小结第82-83页
第五章 基因表达量与成分积累的灰色关联度分析第83-88页
   ·分析方法第83-84页
   ·灰色关联度分析结果第84页
   ·结果讨论第84-86页
   ·小结第86-88页
第六章 总结与展望第88-92页
   ·样本总RNA提取、功能基因克隆和生物信息学分析第88页
   ·柠檬苦素类化合物生物合成过程中功能基因的表达第88-89页
   ·有效成分在各器官积累规律研究第89-90页
   ·基因表达量与成分积累的灰色关联度分析第90-92页
参考女献第92-95页
致谢第95-96页
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果第96-97页

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