| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| ·稻瘟病菌概况 | 第9-10页 |
| ·稻瘟病菌的侵染过程 | 第10-11页 |
| ·稻瘟病菌致病因子 | 第11-12页 |
| ·稻瘟病菌效应蛋白研究进展 | 第12-19页 |
| ·已报道的稻瘟病菌效应蛋白 | 第12-13页 |
| ·稻瘟病菌效应蛋白的分泌途径 | 第13-15页 |
| ·稻瘟病菌质外体效应蛋白 | 第15-17页 |
| ·稻瘟病菌细胞质效应蛋白 | 第17-18页 |
| ·稻瘟病菌中特殊的效应蛋白 | 第18-19页 |
| ·稻瘟病菌PWL2基因研究进展 | 第19-20页 |
| ·植物与病原微生物互作中的糖基化修饰 | 第20-23页 |
| ·糖基化的类型 | 第21页 |
| ·糖基化及糖蛋白的生物学作用 | 第21-23页 |
| ·原生质体瞬时表达技术 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料和菌株 | 第25页 |
| ·质粒载体 | 第25页 |
| ·药品和试剂 | 第25-26页 |
| 3 方法 | 第26-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第26页 |
| ·基因克隆 | 第26-27页 |
| ·稻瘟病菌基因组提取 | 第26页 |
| ·PCR扩增PWL2基因及测序 | 第26-27页 |
| ·载体构建 | 第27页 |
| ·碱裂解—氯化铯密度梯度超速离心法大量提取质粒 | 第27-28页 |
| ·原生质体瞬时表达PWL2-FLAG融合蛋白 | 第28-30页 |
| ·原生质体制备 | 第28-29页 |
| ·原生质体活力测定 | 第29页 |
| ·原生质体瞬时表达融合蛋白 | 第29页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western Blotting) | 第29-30页 |
| ·细胞内糖基化抑制 | 第30页 |
| ·免疫沉淀(IP)分析 | 第30页 |
| ·双荧光素酶报告系统分析 | 第30页 |
| ·细胞内活性氧测定 | 第30-31页 |
| ·效应蛋白亚细胞定位 | 第31页 |
| ·植物培养与转化 | 第31页 |
| ·稻瘟病菌接种实验 | 第31-32页 |
| 4 结果及分析 | 第32-49页 |
| ·PWL2基因在不同稻瘟病菌生理小种中的存在和变异情况 | 第32页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)基因克隆 | 第32-33页 |
| ·稻瘟病菌对拟南芥的侵染 | 第33-34页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)基因在拟南芥原生质体中的表达 | 第34-36页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)基因原生质体瞬时表达载体构建 | 第34-35页 |
| ·Western Blotting检测融合蛋白表达结果 | 第35-36页 |
| ·效应蛋白PWL2~(D90N)修饰类型的检测 | 第36-39页 |
| ·生物信息学分析PWL2~(D90N)可能发生的修饰 | 第36-37页 |
| ·泛素化修饰和SUMO化修饰检测 | 第37-38页 |
| ·糖基化修饰检测 | 第38-39页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)对植物PTI的影响 | 第39页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)对植物细胞内活性氧水平的影响 | 第39-40页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)在拟南芥中的亚细胞定位 | 第40-42页 |
| ·亚细胞定位载体的构建 | 第40-41页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)蛋白的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| ·PWL2~(D90N)激活PTI的相关信号途径分析 | 第42-43页 |
| ·转PWL2和PWL2~(D90N)基因拟南芥的抗病性分析 | 第43-45页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)转植物双元载体的构建 | 第43-44页 |
| ·转基因植株的获得和鉴定 | 第44-45页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)在弯叶画眉草中的表达和定位分析 | 第45-49页 |
| ·弯叶画眉草原生质体制备及活力测定 | 第46页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)在弯叶画眉草原生质体细胞中的表达 | 第46-47页 |
| ·PWL2和PWL2~(D90N)在弯叶画眉草中的亚细胞定位 | 第47-49页 |
| 5 讨论 | 第49-51页 |
| 6 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
