| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·L-精氨酸的性质及应用 | 第8-9页 |
| ·L-精氨酸的性质 | 第8页 |
| ·L-精氨酸的生理功能 | 第8-9页 |
| ·L-精氨酸的应用 | 第9页 |
| ·L-精氨酸在生物体内合成途径 | 第9-10页 |
| ·L-精氨酸生产菌株的选育 | 第10-12页 |
| ·传统诱变选育 L-精氨酸生产菌株 | 第10-11页 |
| ·基因工程选育 L-精氨酸生产菌株 | 第11-12页 |
| ·EMP 途径关键酶研究进展 | 第12-15页 |
| ·EMP 途径概述 | 第12页 |
| ·葡萄糖激酶 | 第12-13页 |
| ·磷酸果糖激酶 | 第13-14页 |
| ·丙酮酸激酶 | 第14-15页 |
| ·论文立题背景和研究目的 | 第15-16页 |
| ·论文研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·培养基及培养条件 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·钝齿棒杆菌染色体提取 | 第19-20页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增及回收 | 第20页 |
| ·重组质粒 pET28a-glk、pET28a-pfk、pET28a-pyk 的构建 | 第20页 |
| ·重组大肠杆菌的构建及诱导表达 | 第20-21页 |
| ·重组酶酶活测定方法 | 第21页 |
| ·重组酶的纯化及酶学性质研究 | 第21-22页 |
| ·重组质粒 pDXW-10-glk、pDXW-10-pfk、pDXW-10-pyk 的构建 | 第22页 |
| ·重组质粒 pDXW-10-pfk-pyk 的构建 | 第22页 |
| ·重组钝齿棒杆菌的构建及表达 | 第22-23页 |
| ·重组钝齿棒杆菌遗传稳定性分析 | 第23页 |
| ·重组钝齿棒杆菌发酵 | 第23页 |
| ·发酵参数测定 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-56页 |
| ·EMP 途径关键酶在大肠杆菌中克隆表达 | 第24-39页 |
| ·EMP 途径关键酶基因 glk、pfk、pyk 的克隆及序列分析 | 第24页 |
| ·重组质粒 pET28a-glk、pET28a-pfk、pET28a-pyk 的构建及分析 | 第24-26页 |
| ·重组菌 BL21/pET28a-glk 中 GLK 的表达纯化及酶学性质研究 | 第26-30页 |
| ·重组菌 BL21/pET28a-pfk 中 PFK 的表达纯化及酶学性质研究 | 第30-34页 |
| ·重组菌 BL21/pET28a-pyk 中 PYK 的表达纯化及酶学性质研究 | 第34-38页 |
| ·重组酶 GLK、PFK 和 PYK 酶学性质比较 | 第38-39页 |
| ·EMP 途径关键酶在钝齿棒杆菌中加强表达 | 第39-50页 |
| ·重组质粒 pDXW-10-glk、pDXW-10-pfk、pDXW-10-pyk 的构建及分析 .. | 第39-41页 |
| ·重组钝齿棒杆菌 C. crenatum SYPA 5-5 的构建及筛选 | 第41页 |
| ·重组钝齿棒杆菌 C. crenatum SYPA 5-5 中酶活力测定 | 第41-43页 |
| ·重组钝齿棒杆菌 C. crenatum SYPA 5-5 遗传稳定性分析 | 第43-44页 |
| ·重组钝齿棒杆菌 C. crenatum SYPA 5-5 的摇瓶发酵 | 第44-45页 |
| ·重组钝齿棒杆菌 5 L 发酵罐发酵特性比较 | 第45-50页 |
| ·磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶在钝齿棒杆菌中共表达 | 第50-56页 |
| ·共表达载体 pDXW-10-pfk-pyk 的构建和分析 | 第50-51页 |
| ·重组菌 SYPA 5-5/pDXW-10-pfk-pyk 的构建及筛选 | 第51页 |
| ·重组菌 SYPA 5-5/pDXW-10-pfk-pyk 中 PFK 和 PYK 酶活力测定 | 第51-52页 |
| ·重组菌 SYPA 5-5/pDXW-10-pfk-pyk 的遗传稳定性分析 | 第52-53页 |
| ·重组菌 SYPA 5-5/pDXW-10-pfk-pyk 的摇瓶发酵 | 第53页 |
| ·重组菌 SYPA 5-5/pDXW-10-pfk-pyk 的 5 L 发酵罐发酵 | 第53-54页 |
| ·重组菌发酵液中氨基酸和有机酸含量测定 | 第54-56页 |
| 主要结论与展望 | 第56-58页 |
| 主要结论 | 第56-57页 |
| 展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |
