| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·氨肽酶概述 | 第8-11页 |
| ·产氨肽酶微生物的种类 | 第8-9页 |
| ·氨肽酶的分类 | 第9-10页 |
| ·耐热氨肽酶研究概述 | 第10页 |
| ·氨肽酶的主要应用 | 第10-11页 |
| ·国内外研究进展 | 第11-13页 |
| ·国外研究进展 | 第11-12页 |
| ·国内研究进展 | 第12-13页 |
| ·立题意义 | 第13页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-22页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·样品 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·菌株 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·方法 | 第16-22页 |
| ·氨肽酶产生菌的筛选 | 第16页 |
| ·蛋白含量的测定及酶活定义 | 第16-17页 |
| ·菌株的鉴定 | 第17页 |
| ·氨肽酶产生菌发酵条件优化 | 第17页 |
| ·氨肽酶的分离纯化 | 第17-18页 |
| ·MALDI-TOF-MS 及肽谱分析 | 第18-19页 |
| ·氨肽酶酶学性质的研究 | 第19-20页 |
| ·氨肽酶应用初探 | 第20页 |
| ·赖氨酸氨肽酶基因的克隆及表达 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-48页 |
| ·氨肽酶筛选结果 | 第22-23页 |
| ·产氨肽酶菌株的鉴定 | 第23-24页 |
| ·菌株形态观察及生理生化鉴定 | 第23页 |
| ·NJ03 分子生物学鉴定 | 第23-24页 |
| ·P. aeruginosa NJ-814 的发酵条件优化 | 第24-29页 |
| ·种龄的确定 | 第24-25页 |
| ·最佳碳源的确定 | 第25页 |
| ·最佳氮源的确定 | 第25-26页 |
| ·微量元素对产酶的影响 | 第26页 |
| ·Co2+浓度对产酶的影响 | 第26-27页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第27页 |
| ·转速对产酶的影响 | 第27-28页 |
| ·不同接种量对产酶的影响 | 第28页 |
| ·发酵液起始 pH 对产酶的影响 | 第28-29页 |
| ·初步优化后菌株产酶曲线 | 第29页 |
| ·氨肽酶的分离纯化 | 第29-32页 |
| ·硫酸铵盐析结果 | 第29-30页 |
| ·DEAE-Sepharose 离子交换层析 | 第30页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析 | 第30-31页 |
| ·相对分子量及纯度检测 | 第31页 |
| ·各步纯化结果 | 第31-32页 |
| ·PMF 分析 | 第32-33页 |
| ·氨肽酶酶学性质研究 | 第33-40页 |
| ·氨肽酶的最适反应温度 | 第33-34页 |
| ·氨肽酶的热稳定性 | 第34页 |
| ·氨肽酶的最适反应 pH | 第34-35页 |
| ·氨肽酶的 pH 稳定性 | 第35页 |
| ·贮存过程中氨肽酶的酶活变化 | 第35-36页 |
| ·有机溶剂对氨肽酶酶活的影响 | 第36页 |
| ·二价金属离子及酶抑制剂对氨肽酶酶活的影响 | 第36-38页 |
| ·Co~(2+)对氨肽酶温度稳定性的影响 | 第38页 |
| ·氨肽酶的底物特异性 | 第38-39页 |
| ·氨肽酶 K_m及 V_(max)的测定 | 第39-40页 |
| ·氨肽酶应用初探 | 第40-43页 |
| ·氨肽酶单独及双酶协同水解大分子蛋白的游离氨基酸比较 | 第40-42页 |
| ·氨肽酶单独和双酶协同水解大分子蛋白的分子量分布比较 | 第42-43页 |
| ·P. aeruginosa NJ-814 赖氨酸氨肽酶基因的克隆、表达及生物信息学分析 | 第43-48页 |
| ·P. aeruginosa NJ-814 全基因提取、基因克隆及表达载体的构建 | 第43页 |
| ·DNA 序列分析 | 第43-44页 |
| ·氨肽酶氨基酸序列多重序列比对 | 第44页 |
| ·P. aeruginosa NJ-814 中编码赖氨酸氨肽酶基因序列的生物信息学分析 | 第44-46页 |
| ·赖氨酸氨肽酶基因的诱导表达 | 第46-48页 |
| 主要结论与展望 | 第48-50页 |
| 主要结论 | 第48-49页 |
| 展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57-58页 |
| 附图 | 第58-61页 |
