| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-24页 |
| ·结核病简介 | 第13页 |
| ·结核分枝杆菌分子生物学特征 | 第13-15页 |
| ·天然免疫简介 | 第15-16页 |
| ·结核分枝杆菌与天然免疫 | 第16-19页 |
| ·Toll样受体 | 第16-17页 |
| ·NOD2和NOD样受体 | 第17页 |
| ·炎症小体 | 第17页 |
| ·C型凝集素受体 | 第17-18页 |
| ·胱天蛋白酶募集域蛋白9 | 第18页 |
| ·维生素D | 第18-19页 |
| ·Ⅰ型干扰素 | 第19页 |
| ·自然杀伤细胞 | 第19页 |
| ·NF-κB信号转导途径 | 第19-24页 |
| ·NF-κB及其相关分子 | 第20-21页 |
| ·NF-κB激活的分子机制 | 第21-22页 |
| ·NF-κB激活的上游信号转导途径 | 第22-24页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 第3章 材料与方法 | 第25-32页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·菌株与细胞 | 第25页 |
| ·质粒与载体 | 第25页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第25-26页 |
| ·培养基和抗生素的其配制 | 第26页 |
| ·主要缓冲液和试剂及其配制 | 第26-27页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第27-28页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·候选目的蛋白基因的PCR扩增 | 第28页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第28-29页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29-30页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第30页 |
| ·质粒转染(脂质体介导转染法) | 第30-31页 |
| ·双荧光素酶检测实验 | 第31页 |
| ·Western Blot样品准备 | 第31-32页 |
| 第4章 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·目的基因的选择 | 第32页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第32-34页 |
| ·调控NF-κB活性的结核分枝杆菌蛋白的筛选 | 第34-35页 |
| ·MTB Rv2185c促进NF-κB活化的分子机制研究 | 第35-38页 |
| ·MTB Rv2185c促进NF-κB活化呈剂量依赖性和细胞特异性 | 第35-36页 |
| ·MTB Rv2185c促进NF-κB活化的重要区域的确定 | 第36-37页 |
| ·MTB Rv2185c促进p65磷酸化 | 第37-38页 |
| ·MTB Rv3763抑制TNF-α诱导的NF-κB活化的分子机制研究 | 第38-42页 |
| ·MTB Rv3763抑制TNF-α诱导的NF-κB活化呈剂量依赖性 | 第38-39页 |
| ·MTB Rv3763抑制TNF-α诱导的NF-κB活化的重要区域的确定 | 第39-40页 |
| ·MTB Rv3763蛋白抑制TNF-α诱导的p65磷酸化 | 第40-42页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·目的基因的选择 | 第42-43页 |
| ·调控NF-κB活性的MTB蛋白筛选 | 第43页 |
| ·Rv2185c促进NF-κB活化的分子机制初步研究 | 第43页 |
| ·Rv3763抑制TNF-α诱导的NF-κB活化的分子机制初步研究 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录1 PCR扩增引物及相应的酶切位点 | 第52-61页 |
| 附录2 调控NF-κB活性的结核分枝杆菌蛋白初步筛选结果 | 第61-65页 |
| 附录3 扩增MTB Rv2185c基因突变体的引物序列 | 第65页 |
| 附录4 扩增MTB Rv3763基因突变体的引物序列 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
