| 目录 | 第1页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一部分 综述 | 第13-31页 |
| 第一章 动物转基因技术 | 第13-21页 |
| 1. 转基因动物研究方法 | 第13-15页 |
| ·体细胞核移植介导法 | 第13-14页 |
| ·精原干细胞法介导法 | 第14页 |
| ·转座子介导法 | 第14-15页 |
| ·RNA干扰介导法 | 第15页 |
| ·诱导多能干细胞(iPS细胞)介导法 | 第15页 |
| 2. 转基因克隆动物研究发展现状 | 第15-16页 |
| 3. 转基因动物的应用 | 第16-17页 |
| ·转基因技术在哺乳动物遗传育种中的应用 | 第16页 |
| ·转基因技术在生物制药中的应用 | 第16-17页 |
| ·转基因技术在建立动物模型和器官移植等医疗中的应用 | 第17页 |
| 4. 转基因技术存在的问题 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第二章 转基因动物乳腺生物反应器研究进展 | 第21-31页 |
| 1. 动物乳腺生物反应器原理 | 第22页 |
| 2. 乳腺特异性表达载体 | 第22-24页 |
| ·乳腺特异性表达载体调控元件 | 第22-24页 |
| ·常用表达载体 | 第24页 |
| 3. 动物乳腺生物反应器的应用 | 第24-25页 |
| ·生物医药生产 | 第24-25页 |
| ·改变乳汁成分,提高营养价值 | 第25页 |
| 4. 动物乳腺生物反应器存在问题 | 第25-26页 |
| ·外源基因在乳腺中特异性表达问题 | 第25页 |
| ·外源基因在动物基因中的整合问题 | 第25页 |
| ·目的蛋白的翻译后修饰问题 | 第25-26页 |
| ·对生态平衡的影响问题 | 第26页 |
| 5. α-LA研究进展 | 第26-28页 |
| ·α-LA结构特性 | 第26-27页 |
| ·α-LA生理功能 | 第27页 |
| ·重组α-LA研究进展 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-31页 |
| 第二部分 实验部分 | 第31-79页 |
| 第三章 人α-LA调控序列克隆、转基因载体构建 | 第31-47页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| 1. 材料与方法 | 第32-40页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·真核载体PLAN的构建 | 第35-40页 |
| ·质粒PLAN转染gFFCs后报告基因EGFP的表达 | 第40页 |
| 2. 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·含调控序列人α-LA基因克隆及鉴定 | 第40-42页 |
| ·PLAN真核表达载体的构建与鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒PLAN转染gFFCs后报告基因EGFP的表达 | 第43页 |
| 3. 讨论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 第四章 真核表达载体PLAN在山羊乳腺上皮细胞中的表达 | 第47-57页 |
| 摘要 | 第47-48页 |
| 1. 材料与方法 | 第48-52页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| 2. 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·GMEC纯化与扩大培养 | 第52页 |
| ·GMEC脂质体转染 | 第52-53页 |
| ·Western-blot检测 | 第53-54页 |
| 3. 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第五章 整合含调控序列人α-LA基因奶山羊胎儿成纤维细胞株的筛选 | 第57-67页 |
| 摘要 | 第57-58页 |
| 1. 材料与方法 | 第58-61页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| 2. 结果与分析 | 第61-63页 |
| ·真核载体PLAN转染gFFCs后报告基因EGFP的表达 | 第61-63页 |
| ·转基因阳性gFFCs克隆的PCR鉴定 | 第63页 |
| 3. 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 第六章 转人α-LA基因奶山羊的鉴定 | 第67-79页 |
| 摘要 | 第67-68页 |
| 1. 材料与方法 | 第68-72页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-72页 |
| 2. 结果与分析 | 第72-77页 |
| ·RT-PCR检测 | 第72-73页 |
| ·TAIL-PCR检测 | 第73页 |
| ·测序结果分析 | 第73-74页 |
| ·羊乳乳清蛋白总量测定 | 第74-75页 |
| ·羊乳乳清中人α-LAWestern-blot检测 | 第75-77页 |
| 3. 讨论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 全文结论 | 第79-81页 |
| 附录 | 第81-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
