目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-33页 |
1 脂联素及AdipoR1 | 第13-18页 |
·脂联素概述 | 第13-14页 |
·AdipoR1概述 | 第14-15页 |
·AdipoR1介导脂联素发挥生物学功能 | 第15-17页 |
·AdipoR1的表达调控 | 第17-18页 |
2 miRNA的特征及生物学功能 | 第18-21页 |
·miRNA的形成 | 第18页 |
·miRNA的特征 | 第18页 |
·miRNA的生物过程 | 第18-19页 |
·miRNA的生物学功能 | 第19-21页 |
3 miRNA靶标预测与验证方法 | 第21-24页 |
·生物信息学进行miRNA靶标预测 | 第21-22页 |
·靶标基因验证的生物学方法 | 第22-23页 |
·miR-148a的研究进展 | 第23-24页 |
4 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-33页 |
第二章 AdipoR1在不同品种鸭不同组织中时空表达谱分析 | 第33-51页 |
1 实验材料 | 第33-34页 |
·实验动物及样品采集 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·主要溶液及其配置 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-36页 |
·引物的设计 | 第34页 |
·组织样品总RNA的提取 | 第34-35页 |
·总RNA浓度和纯度检测 | 第35页 |
·cDNA的获得 | 第35页 |
·鸭AdipoR1基因定量引物特异扩增 | 第35页 |
·Real-time PCR | 第35-36页 |
·数据分析 | 第36页 |
3 实验结果 | 第36-44页 |
·总RNA质量检测 | 第36-37页 |
·cDNA质量检测 | 第37页 |
·鸭AdipoR1荧光定量引物验证 | 第37-38页 |
·AdipoR1基因在不同品种鸭各组织时空表达谱 | 第38-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
5 小结 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
第三章 miR-148a对鸭AdipoR1基因调控机制的研究 | 第51-75页 |
1 实验材料 | 第51-53页 |
·细胞、菌株和质粒 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·主要仪器 | 第51-52页 |
·主要溶液及其配置 | 第52-53页 |
·生物学工具 | 第53页 |
2 实验方法 | 第53-62页 |
·引物的设计 | 第53-54页 |
·组织样RNA的提取 | 第54页 |
·鸭AdipoR1-3'UTR序列的扩增 | 第54-57页 |
·鸭AdipoR1基因的生物学信息学分析 | 第57页 |
·细胞的培养 | 第57-59页 |
·鸭骨骼肌细胞转染 | 第59-60页 |
·细胞铺板 | 第59页 |
·miR-148a转染 | 第59页 |
·转染效率的观察 | 第59-60页 |
·Real-time PCR和Western blot | 第60-62页 |
3 实验结果 | 第62-68页 |
·组织样总RNA的提取 | 第62-63页 |
·AdipoR1-3'UTR的扩增 | 第63页 |
·阳性克隆与测序 | 第63-65页 |
·生物信息学预测结果 | 第65-66页 |
·鸭骨骼肌细胞转染 | 第66-67页 |
·Real-time PCR和Western blot结果 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
·关于AdipoR1基因在骨骼肌中作用 | 第68-69页 |
·关于鸭骨骼肌的分离 | 第69页 |
·关于miRNA与脂肪代谢 | 第69页 |
·关于miR-148a与鸭AdipoR1基因在骨骼肌中的关系 | 第69-70页 |
5 小结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-75页 |
全文结论 | 第75-77页 |
全文创新点 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
附录 | 第81-83页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第83页 |