中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-31页 |
·猪肉 IMF | 第13-23页 |
·IMF 的概念与组成 | 第13-14页 |
·IMF 的合成与代谢调控 | 第14-17页 |
·IMF 与肉质的关系 | 第17-19页 |
·影响 IMF 的因素 | 第19-23页 |
·影响 IMF 沉积关键基因的筛选研究 | 第23页 |
·差异表达基因的筛选方法 | 第23-30页 |
·本研究的目的意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-70页 |
·试验材料 | 第31-37页 |
·试验动物和样品采集 | 第31页 |
·菌株、载体和细胞 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31-32页 |
·酶和试剂 | 第32-36页 |
·主要数据库及生物软件 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-69页 |
·IMF 含量测定 | 第37页 |
·总 RNA 的提取、纯化和检测 | 第37-39页 |
·cDNA 第一条链的合成和检测 | 第39页 |
·莱芜猪高、低 IMF 抑制性消减杂交文库的构建 | 第39-55页 |
·莱芜猪、大白猪抑制性消减杂交文库的构建 | 第55-61页 |
·测序与比对分析 | 第61-62页 |
·Real-time PCR 验证差异表达基因 | 第62-63页 |
·猪 NDUFS4 基因 cDNA 序列的克隆、mRNA 表达与生物信息学分析 | 第63-69页 |
·统计分析 | 第69-70页 |
3 结果与分析 | 第70-100页 |
·莱芜猪高、低 IMF 含量消减文库的构建 | 第70-73页 |
·莱芜猪高、低 IMF 含量结果 | 第70页 |
·总 RNA 提取及 mRNA 分离 | 第70-71页 |
·酶切结果 | 第71页 |
·接头连接效率 | 第71-72页 |
·两次 PCR 结果 | 第72页 |
·消减效率的 PCR 分析 | 第72-73页 |
·SSH 产物克隆及文库质量评价 | 第73页 |
·高、低 IMF 莱芜猪正向消减文库 ESTs 获得与分析 | 第73-77页 |
·斑点杂交筛选结果 | 第73-74页 |
·ESTs 获得与分析 | 第74-77页 |
·差异表达基因实时定量 PCR 检测 | 第77页 |
·莱芜猪、大白猪消减文库的构建 | 第77-81页 |
·总 RNA 提取 | 第78页 |
·双链 cDNA(ds-cDNA)制备过程循环数的优化 | 第78页 |
·Rsa I 酶切消化效果的鉴定 | 第78-79页 |
·接头连接效率 | 第79页 |
·两次 PCR 结果 | 第79-80页 |
·消减效率的 PCR 分析 | 第80页 |
·SSH 产物克隆及文库质量评价 | 第80-81页 |
·莱芜猪、大白猪正反向消减文库 ESTs 获得与分析 | 第81-88页 |
·斑点杂交筛选结果 | 第81页 |
·ESTs 获得与分析 | 第81-87页 |
·差异表达基因实时定量 PCR 检测 | 第87-88页 |
·猪 NDUFS4 基因的克隆表达及生物信息学分析 | 第88-100页 |
·猪 NDUFS4 基因 cDNA 的克隆 | 第88-90页 |
·NDUFS4 基因的生物信息学分析 | 第90-98页 |
·猪 NDUFS4 CDS 区突变检测 | 第98-99页 |
·猪 NDUFS4 基因的 mRNA 组织表达谱分析 | 第99页 |
·莱芜猪、大白猪背最长肌中 NDUFS4 基因 mRNA 表达水平的分析 | 第99-100页 |
4 讨论 | 第100-106页 |
·SSH 分析 | 第100-101页 |
·差异表达基因的验证与分析 | 第101-104页 |
·ADFP | 第101-102页 |
·ACSL1 | 第102页 |
·ACADM | 第102页 |
·PDK | 第102-103页 |
·AMPD1 | 第103-104页 |
·PGK1 | 第104页 |
·其他差异表达基因 | 第104页 |
·NDUFS4 与 IMF 沉积 | 第104-106页 |
5 结论 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
作者简介 | 第121页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第121页 |