| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1 双顺反子病毒研究概况 | 第12-19页 |
| ·分类学 | 第12-14页 |
| ·病毒粒子结构 | 第14页 |
| ·基因组结构 | 第14-15页 |
| ·编码蛋白质及其功能 | 第15-16页 |
| ·顺式作用的基因表达和复制的元素 | 第16-17页 |
| ·青蟹双顺反子病毒-1 的研究进展 | 第17-19页 |
| 2 水产常见病毒的检测方法 | 第19-22页 |
| ·病原学检测 | 第19-20页 |
| ·免疫学检测 | 第20页 |
| ·核酸检测 | 第20-22页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 青蟹双顺反子病毒-1 环介导等温扩增检测方法的建立 | 第24-38页 |
| 1 材料与方法 | 第24-30页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·LAMP 引物设计 | 第27页 |
| ·拟穴青蟹鳃组织样品处理 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的获得 | 第28-29页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第29页 |
| ·产物检测 | 第29-30页 |
| ·灵敏度试验 | 第30页 |
| ·特异性实验 | 第30页 |
| ·应用性试验 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-36页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第30-31页 |
| ·产物检测 | 第31-33页 |
| ·灵敏度试验 | 第33-34页 |
| ·特异性实验 | 第34-35页 |
| ·应用性试验 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 青蟹双顺反子病毒-1 实时荧光定量 PCR 检测方法的建立 | 第38-49页 |
| 1 材料与方法 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·引物与探针的设计与合成 | 第39-40页 |
| ·总 RNA 提取及 cDNA 的合成 | 第40页 |
| ·标准品的制备 | 第40页 |
| ·Real time-PCR 反应体系的建立及优化 | 第40页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第40-41页 |
| ·灵敏度试验 | 第41页 |
| ·特异性试验 | 第41页 |
| ·重复性和稳定性实验 | 第41页 |
| ·感染拟穴青蟹鳃组织不同部位 MCDV-1 病毒量比较研究 | 第41-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·优化后的荧光定量反应体系 | 第43页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第43页 |
| ·灵敏度试验 | 第43-44页 |
| ·特异性检测 | 第44页 |
| ·重复性和稳定性实验 | 第44-46页 |
| ·感染拟穴青蟹鳃组织不同部位 MCDV-1 病毒量比较研究 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 青蟹呼肠孤病毒和青蟹双顺反子病毒-1 的双重巢式 PCR 检测方法 | 第49-57页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·引物设计 | 第49-50页 |
| ·总 RNA 提取及 cDNA 的合成 | 第50页 |
| ·PCR 反应体系 | 第50页 |
| ·双重巢式 PCR 反应条件的优化 | 第50页 |
| ·灵敏度试验 | 第50页 |
| ·特异性试验 | 第50-51页 |
| ·检测方法的应用 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·双重巢式 PCR 反应体系的优化 | 第51-53页 |
| ·灵敏度试验 | 第53页 |
| ·特异性试验 | 第53-54页 |
| ·检测方法的应用 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 阳江地区野生拟穴青蟹 MCRV 与 MCDV-1 流行病学调查 | 第57-64页 |
| 1 材料与方法 | 第57-58页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·采样方法 | 第57-58页 |
| ·病毒检测 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
