| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-16页 |
| ·引言 | 第7-9页 |
| ·蛋白质组学概述 | 第9页 |
| ·蛋白质翻译后修饰 | 第9-10页 |
| ·磷酸化蛋白质组学 | 第10-12页 |
| ·蛋白质的磷酸化 | 第10-11页 |
| ·磷酸化蛋白质组学的研究策略 | 第11-12页 |
| ·磷酸化蛋白质组学研究技术 | 第12-16页 |
| ·磷酸化蛋白质富集技术 | 第12-14页 |
| ·基于质谱技术的蛋白质磷酸化鉴定 | 第14-16页 |
| 2 玉米PPDK翻译后磷酸化修饰 | 第16-24页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·实验试剂及配制 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-19页 |
| ·玉米叶片的蛋白提取(TCA丙酮沉淀法) | 第17页 |
| ·玉米叶片蛋白的定量 | 第17-18页 |
| ·双向凝胶技术分离玉米叶片蛋白 | 第18页 |
| ·Western blotting技术鉴定PPDK蛋白表达 | 第18页 |
| ·PPDK蛋白的胶内酶解 | 第18-19页 |
| ·PPDK磷酸化肽段的富集、鉴定与分析 | 第19页 |
| ·结果与分析 | 第19-23页 |
| ·玉米叶片蛋白2-DGE分离及其染色 | 第19-20页 |
| ·玉米叶片2-DGE胶内PPDK蛋白鉴定 | 第20-21页 |
| ·玉米叶片PPDK磷酸化位点图谱构建 | 第21页 |
| ·玉米叶片PPDK六个异构体的肽段分析整理 | 第21-22页 |
| ·光照对玉米叶片PPDK磷酸化的影响 | 第22-23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 3 PPDK-Ser528在进化上的重要性分析 | 第24-37页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·RNA提取 | 第25-26页 |
| ·RNA反转录 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞制备 | 第27页 |
| ·基因克隆 | 第27-28页 |
| ·质粒提取 | 第28-29页 |
| ·原核表达载体构建 | 第29页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第29-31页 |
| ·体外磷酸化体系 | 第31页 |
| ·Western blotting检测 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·提取玉米叶片RNA | 第31-32页 |
| ·玉米C4PPDK和PDRP1基因克隆 | 第32页 |
| ·玉米C4PPDK和PDRP1蛋白表达及纯化 | 第32-34页 |
| ·C4PPDK与其它不同物种PPDK磷酸化位点保守性比对 | 第34页 |
| ·PDRP1对C4PPDK及其定点突变后蛋白的磷酸化分析 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 附录 | 第44-45页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
