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枇杷种质限制生长保存及乙烯代谢与信号转导相关基因等克隆及表达

缩写词第1-13页
摘要第13-16页
Abstract第16-20页
第一章 引言第20-33页
 1 植物种质资源离体保存研究进展第20-23页
   ·植物离体保存的优缺点第20-21页
   ·植物离体保存方法第21-23页
     ·限制生长保存第21-22页
     ·低温保存第22页
     ·超低温保存第22-23页
 2 植物乙烯代谢与信号转导第23-25页
   ·乙烯代谢第23-24页
   ·ACS 和 ACO 基因研究第24页
   ·乙烯受体基因 ETR 和 ERS第24-25页
 3 植物 CAT 基因研究进展第25-26页
   ·CAT 基因的结构与功能第25页
   ·CAT 基因的克隆与表达第25-26页
 4 枇杷生物技术研究进展第26-31页
   ·枇杷离体培养研究进展第26-28页
     ·胚培养第26-27页
     ·茎尖培养第27页
     ·花药培养第27-28页
     ·原生质体培养第28页
     ·胚乳培养第28页
   ·枇杷种质资源离体保存研究进展第28-29页
   ·枇杷基因克隆研究进展第29-31页
 5 本研究的研究意义和内容第31-33页
   ·本研究的意义第31页
   ·本研究的主要内容第31-33页
第二章 枇杷离体培养第33-52页
 第一节 枇杷胚培养与试管苗的获得第33-43页
  1 材料与方法第33-35页
   ·试验材料第33-34页
   ·试验方法第34-35页
     ·枇杷幼果的处理第34页
     ·枇杷胚萌发第34-35页
   ·培养条件第35页
  2 结果与分析第35-42页
   ·GA3对枇杷幼胚萌发率的影响第35-37页
   ·光质对枇杷幼胚萌发率的影响第37-38页
   ·不同生长调节剂对枇杷成熟胚萌发的影响第38-42页
  3 讨论第42-43页
   ·GA3有利于枇杷幼胚的萌发第42页
   ·红光能够促进幼胚萌发第42-43页
 第二节 枇杷试管苗增殖培养与生根培养第43-52页
  1 材料与方法第43-44页
   ·材料第43页
   ·方法第43-44页
     ·枇杷试管苗的增殖培养第43-44页
     ·试管苗的生根培养第44页
   ·培养条件第44页
  2 结果与分析第44-50页
   ·TDZ 对试管苗增殖的影响第44-47页
   ·KT 对枇杷试管苗增殖的影响第47-48页
   ·枇杷试管苗的生根第48-50页
  3 讨论第50-52页
   ·适当浓度的 TDZ 或 KT 有利于枇杷试管苗的增殖第50-51页
   ·枇杷试管苗生根培养中激素的作用第51-52页
第三章 枇杷试管苗离体保存研究第52-56页
 1 材料与方法第52-53页
   ·材料第52页
   ·方法第52-53页
     ·21 份枇杷资源在同一培养基离体保存的时间差异第52页
     ·不同光质条件对枇杷试管苗离体保存的影响第52-53页
   ·培养条件第53页
 2 结果与分析第53-55页
   ·21 份枇杷资源在同一培养基离体保存的时间差异第53-54页
   ·不同光质条件对枇杷试管苗离体保存的影响第54-55页
 3 讨论第55-56页
   ·不同基因型枇杷试管苗的保存时间存在差异第55页
   ·红光有利于枇杷试管苗保存第55-56页
第四章 枇杷乙烯代谢与信号转导相关基因克隆与生物信息学分析第56-107页
 第一节 枇杷 ETR 基因克隆及生物信息学分析第56-90页
  1 材料与方法第57-60页
   ·材料第57页
     ·试验材料第57页
     ·试剂第57页
   ·方法第57-60页
     ·总 RNA 的提取和检测第57页
     ·cDNA 第一链合成及 5’RACE cDNA 合成第57页
     ·引物设计与合成第57-58页
     ·目的片段的扩增第58-59页
     ·目的片段的回收、连接转化及序列测定第59页
     ·生物信息学分析第59-60页
  2 结果与分析第60-87页
   ·枇杷试管苗总 RNA 的提取第60页
   ·枇杷 ETR 基因 cDNA 保守区的克隆第60-64页
   ·枇杷 ETR 基因 3’RACE 扩增第64-66页
   ·枇杷 ETR 基因 5’末端的获得第66页
   ·枇杷 ETR 基因全长序列 ORF 及分析第66-73页
   ·枇杷 ETR 不同成员的生物信息学分析第73-87页
     ·蛋白质理化性质的预测与分析第73页
     ·蛋白质亲疏水特性预测第73-74页
     ·蛋白质磷酸化位点预测第74-75页
     ·蛋白质跨膜结构预测与分析第75-76页
     ·蛋白质信号肽预测与分析第76-78页
     ·蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析第78-79页
     ·蛋白质功能位点预测和分析第79-81页
     ·蛋白质亚细胞定位第81-82页
     ·蛋白质二级结构预测与分析第82-83页
     ·蛋白质三级结构预测第83-84页
     ·蛋白质家族及保守结构域分析第84-85页
     ·蛋白质系统进化树的构建与分析第85-87页
  3 讨论第87-90页
   ·枇杷总 RNA 提取的技术关键第87-88页
   ·Ej-ETR1a、Ej-ETR2a 预测结果符合已报道 ETR1 结构和功能第88页
   ·枇杷 ETR 蛋白的功能多样性第88-90页
 第二节 枇杷 ERS 基因的克隆与生物信息学分析第90-107页
  1 材料与方法第90-91页
   ·材料第90页
   ·方法第90-91页
     ·总 RNA 的提取和检测第90页
     ·cDNA 第一链合成和 5’RACE cDNA 的合成第90-91页
     ·引物设计与合成第91页
     ·目的片段的扩增第91页
     ·目的片段的回收、连接转化及序列测定第91页
     ·生物信息学分析第91页
  2 结果与分析第91-105页
   ·枇杷 ERS 基因 cDNA 全长的克隆第91-92页
   ·枇杷 ERS 基因 ORF 分析第92-95页
   ·枇杷 ERS 基因生物信息学分析第95-105页
     ·Ej-ERS 蛋白理化性质预测第95页
     ·Ej-ERS 蛋白亲疏水特性预测与分析第95-96页
     ·Ej-ERS 蛋白跨膜结构预测第96-97页
     ·蛋白质磷酸化位点预测第97页
     ·蛋白质卷曲螺旋结构的预测第97-98页
     ·蛋白质信号肽的预测第98页
     ·蛋白质功能位点的预测第98-100页
     ·蛋白质亚细胞定位第100页
     ·蛋白质二级结构的预测第100-101页
     ·蛋白质三级结构的预测第101-102页
     ·蛋白质家族及保守结构域的预测与分析第102-103页
     ·氨基酸分子进化树的构建第103-105页
  3 讨论第105-107页
   ·Ej-ERS 的结构与功能第105-106页
   ·Ej-ERS 蛋白可能的蛋白质翻译后修饰方式第106-107页
第五章 枇杷 CAT 基因克隆及生物信息学分析第107-129页
 1 材料与方法第107-108页
   ·材料第107页
   ·方法第107-108页
     ·cDNA 第一链合成和 5’RACE cDNA 的合成第107页
     ·引物的设计及合成第107-108页
     ·目的片段的扩增第108页
     ·目的片段的回收、连接转化及序列测定第108页
     ·生物信息学分析第108页
 2 结果与分析第108-127页
   ·枇杷 CAT 基因保守区的克隆第108-111页
   ·枇杷 CAT 基因 3’RACE第111-112页
   ·枇杷 CAT 基因 5’端扩增第112页
   ·枇杷 CAT 基因 ORF 验证及分析第112-114页
   ·枇杷 CAT 生物信息学分析第114-127页
     ·枇杷 CAT 蛋白理化性质预测第114页
     ·蛋白亲疏水性预测与分析第114-115页
     ·蛋白质跨膜结构预测第115-116页
     ·蛋白质亚细胞定位预测第116-117页
     ·蛋白质卷曲螺旋结构预测第117页
     ·蛋白质功能位点预测第117-121页
     ·蛋白质磷酸化位点预测第121-122页
     ·蛋白质信号肽预测第122页
     ·蛋白质二级结构预测第122-124页
     ·蛋白质三级结构预测第124页
     ·蛋白质家族与保守结构域预测与分析第124-125页
     ·氨基酸分子进化树的构建第125-127页
 3 讨论第127-129页
   ·枇杷 CAT 在试管苗离体保存中可能的作用机理第127-128页
   ·枇杷 CAT 蛋白质的可能翻译后修饰方式第128页
   ·枇杷 CAT2 基因 3’UTR 的多态性调控第128-129页
第六章 枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达分析第129-140页
 1 材料与方法第129-131页
   ·试验材料第129页
   ·试验方法第129-131页
     ·枇杷叶片总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第129页
     ·引物设计第129-130页
     ·Real Time PCR 反应第130-131页
     ·标准曲线的制作第131页
 2 结果与分析第131-137页
   ·枇杷叶片不同时期总 RNA 提取第131-132页
   ·各目的基因 qPCR 引物特异性及扩增效率分析第132页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中 ACS 基因的相对定量表达分析第132-133页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中 ACO 基因的相对定量表达分析第133-134页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中 ETR 基因的相对定量表达分析第134-135页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中 ERS 基因的相对定量表达分析第135-136页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中 CAT 基因的相对定量表达分析第136-137页
 3 讨论第137-140页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中的 ACS、ACO 基因表达量变化的相互联系第137-138页
   ·枇杷试管苗离体保存过程中 ETR、ERS 表达量具有类似的变化规律第138-139页
   ·枇杷 CAT 基因在试管苗离体保存中的作用第139-140页
第七章 小结第140-145页
 1 枇杷胚培养及试管苗的获得第140页
 2 枇杷试管苗的增殖培养和生根培养第140-141页
 3 21 份枇杷种质资源试管苗的离体保存研究第141页
 4 枇杷试管苗叶片乙烯受体 ETR 基因的克隆第141-142页
 5 枇杷试管苗叶片乙烯受体 ERS 基因的克隆第142页
 6 枇杷试管苗叶片 CAT 基因的克隆第142-143页
 7 枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达的 qPCR 分析第143-145页
参考文献第145-163页
附录 1 图版及图版说明第163-173页
附录 2 枇杷 Ej-ETR1a 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第173-176页
附录 3 枇杷 Ej-ETR1b 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第176-179页
附录 4 枇杷 Ej-ETR1c 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第179-182页
附录 5 枇杷 Ej-ETR2a 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第182-185页
附录 6 枇杷 Ej-ETR2b 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第185-188页
附录 7 枇杷 Ej-ETR2c 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第188-191页
附录 8 枇杷 Ej-ETR2d 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第191-194页
附录 9 枇杷 Ej-ERS 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第194-196页
附录 10 枇杷 Ej-CAT1 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第196-198页
附录 11 枇杷 Ej-CAT2 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第198-200页
附录 12 枇杷 Ej-CAT2-2 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第200-202页
附录 13 枇杷 Ej-CAT 2-3 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第202-204页
附录 14 枇杷 Ej-CAT 2-4 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第204-206页
附录 15 枇杷 Ej-CAT 2-5 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第206-208页
附录 16 枇杷离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等 qPCR 分析相关曲线图版第208-211页
攻读硕士学位期间发表论文情况与参加学术会议情况第211-212页
致谢第212页

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