缩写词 | 第1-13页 |
摘要 | 第13-16页 |
Abstract | 第16-20页 |
第一章 引言 | 第20-33页 |
1 植物种质资源离体保存研究进展 | 第20-23页 |
·植物离体保存的优缺点 | 第20-21页 |
·植物离体保存方法 | 第21-23页 |
·限制生长保存 | 第21-22页 |
·低温保存 | 第22页 |
·超低温保存 | 第22-23页 |
2 植物乙烯代谢与信号转导 | 第23-25页 |
·乙烯代谢 | 第23-24页 |
·ACS 和 ACO 基因研究 | 第24页 |
·乙烯受体基因 ETR 和 ERS | 第24-25页 |
3 植物 CAT 基因研究进展 | 第25-26页 |
·CAT 基因的结构与功能 | 第25页 |
·CAT 基因的克隆与表达 | 第25-26页 |
4 枇杷生物技术研究进展 | 第26-31页 |
·枇杷离体培养研究进展 | 第26-28页 |
·胚培养 | 第26-27页 |
·茎尖培养 | 第27页 |
·花药培养 | 第27-28页 |
·原生质体培养 | 第28页 |
·胚乳培养 | 第28页 |
·枇杷种质资源离体保存研究进展 | 第28-29页 |
·枇杷基因克隆研究进展 | 第29-31页 |
5 本研究的研究意义和内容 | 第31-33页 |
·本研究的意义 | 第31页 |
·本研究的主要内容 | 第31-33页 |
第二章 枇杷离体培养 | 第33-52页 |
第一节 枇杷胚培养与试管苗的获得 | 第33-43页 |
1 材料与方法 | 第33-35页 |
·试验材料 | 第33-34页 |
·试验方法 | 第34-35页 |
·枇杷幼果的处理 | 第34页 |
·枇杷胚萌发 | 第34-35页 |
·培养条件 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-42页 |
·GA3对枇杷幼胚萌发率的影响 | 第35-37页 |
·光质对枇杷幼胚萌发率的影响 | 第37-38页 |
·不同生长调节剂对枇杷成熟胚萌发的影响 | 第38-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
·GA3有利于枇杷幼胚的萌发 | 第42页 |
·红光能够促进幼胚萌发 | 第42-43页 |
第二节 枇杷试管苗增殖培养与生根培养 | 第43-52页 |
1 材料与方法 | 第43-44页 |
·材料 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·枇杷试管苗的增殖培养 | 第43-44页 |
·试管苗的生根培养 | 第44页 |
·培养条件 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-50页 |
·TDZ 对试管苗增殖的影响 | 第44-47页 |
·KT 对枇杷试管苗增殖的影响 | 第47-48页 |
·枇杷试管苗的生根 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
·适当浓度的 TDZ 或 KT 有利于枇杷试管苗的增殖 | 第50-51页 |
·枇杷试管苗生根培养中激素的作用 | 第51-52页 |
第三章 枇杷试管苗离体保存研究 | 第52-56页 |
1 材料与方法 | 第52-53页 |
·材料 | 第52页 |
·方法 | 第52-53页 |
·21 份枇杷资源在同一培养基离体保存的时间差异 | 第52页 |
·不同光质条件对枇杷试管苗离体保存的影响 | 第52-53页 |
·培养条件 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-55页 |
·21 份枇杷资源在同一培养基离体保存的时间差异 | 第53-54页 |
·不同光质条件对枇杷试管苗离体保存的影响 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-56页 |
·不同基因型枇杷试管苗的保存时间存在差异 | 第55页 |
·红光有利于枇杷试管苗保存 | 第55-56页 |
第四章 枇杷乙烯代谢与信号转导相关基因克隆与生物信息学分析 | 第56-107页 |
第一节 枇杷 ETR 基因克隆及生物信息学分析 | 第56-90页 |
1 材料与方法 | 第57-60页 |
·材料 | 第57页 |
·试验材料 | 第57页 |
·试剂 | 第57页 |
·方法 | 第57-60页 |
·总 RNA 的提取和检测 | 第57页 |
·cDNA 第一链合成及 5’RACE cDNA 合成 | 第57页 |
·引物设计与合成 | 第57-58页 |
·目的片段的扩增 | 第58-59页 |
·目的片段的回收、连接转化及序列测定 | 第59页 |
·生物信息学分析 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-87页 |
·枇杷试管苗总 RNA 的提取 | 第60页 |
·枇杷 ETR 基因 cDNA 保守区的克隆 | 第60-64页 |
·枇杷 ETR 基因 3’RACE 扩增 | 第64-66页 |
·枇杷 ETR 基因 5’末端的获得 | 第66页 |
·枇杷 ETR 基因全长序列 ORF 及分析 | 第66-73页 |
·枇杷 ETR 不同成员的生物信息学分析 | 第73-87页 |
·蛋白质理化性质的预测与分析 | 第73页 |
·蛋白质亲疏水特性预测 | 第73-74页 |
·蛋白质磷酸化位点预测 | 第74-75页 |
·蛋白质跨膜结构预测与分析 | 第75-76页 |
·蛋白质信号肽预测与分析 | 第76-78页 |
·蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第78-79页 |
·蛋白质功能位点预测和分析 | 第79-81页 |
·蛋白质亚细胞定位 | 第81-82页 |
·蛋白质二级结构预测与分析 | 第82-83页 |
·蛋白质三级结构预测 | 第83-84页 |
·蛋白质家族及保守结构域分析 | 第84-85页 |
·蛋白质系统进化树的构建与分析 | 第85-87页 |
3 讨论 | 第87-90页 |
·枇杷总 RNA 提取的技术关键 | 第87-88页 |
·Ej-ETR1a、Ej-ETR2a 预测结果符合已报道 ETR1 结构和功能 | 第88页 |
·枇杷 ETR 蛋白的功能多样性 | 第88-90页 |
第二节 枇杷 ERS 基因的克隆与生物信息学分析 | 第90-107页 |
1 材料与方法 | 第90-91页 |
·材料 | 第90页 |
·方法 | 第90-91页 |
·总 RNA 的提取和检测 | 第90页 |
·cDNA 第一链合成和 5’RACE cDNA 的合成 | 第90-91页 |
·引物设计与合成 | 第91页 |
·目的片段的扩增 | 第91页 |
·目的片段的回收、连接转化及序列测定 | 第91页 |
·生物信息学分析 | 第91页 |
2 结果与分析 | 第91-105页 |
·枇杷 ERS 基因 cDNA 全长的克隆 | 第91-92页 |
·枇杷 ERS 基因 ORF 分析 | 第92-95页 |
·枇杷 ERS 基因生物信息学分析 | 第95-105页 |
·Ej-ERS 蛋白理化性质预测 | 第95页 |
·Ej-ERS 蛋白亲疏水特性预测与分析 | 第95-96页 |
·Ej-ERS 蛋白跨膜结构预测 | 第96-97页 |
·蛋白质磷酸化位点预测 | 第97页 |
·蛋白质卷曲螺旋结构的预测 | 第97-98页 |
·蛋白质信号肽的预测 | 第98页 |
·蛋白质功能位点的预测 | 第98-100页 |
·蛋白质亚细胞定位 | 第100页 |
·蛋白质二级结构的预测 | 第100-101页 |
·蛋白质三级结构的预测 | 第101-102页 |
·蛋白质家族及保守结构域的预测与分析 | 第102-103页 |
·氨基酸分子进化树的构建 | 第103-105页 |
3 讨论 | 第105-107页 |
·Ej-ERS 的结构与功能 | 第105-106页 |
·Ej-ERS 蛋白可能的蛋白质翻译后修饰方式 | 第106-107页 |
第五章 枇杷 CAT 基因克隆及生物信息学分析 | 第107-129页 |
1 材料与方法 | 第107-108页 |
·材料 | 第107页 |
·方法 | 第107-108页 |
·cDNA 第一链合成和 5’RACE cDNA 的合成 | 第107页 |
·引物的设计及合成 | 第107-108页 |
·目的片段的扩增 | 第108页 |
·目的片段的回收、连接转化及序列测定 | 第108页 |
·生物信息学分析 | 第108页 |
2 结果与分析 | 第108-127页 |
·枇杷 CAT 基因保守区的克隆 | 第108-111页 |
·枇杷 CAT 基因 3’RACE | 第111-112页 |
·枇杷 CAT 基因 5’端扩增 | 第112页 |
·枇杷 CAT 基因 ORF 验证及分析 | 第112-114页 |
·枇杷 CAT 生物信息学分析 | 第114-127页 |
·枇杷 CAT 蛋白理化性质预测 | 第114页 |
·蛋白亲疏水性预测与分析 | 第114-115页 |
·蛋白质跨膜结构预测 | 第115-116页 |
·蛋白质亚细胞定位预测 | 第116-117页 |
·蛋白质卷曲螺旋结构预测 | 第117页 |
·蛋白质功能位点预测 | 第117-121页 |
·蛋白质磷酸化位点预测 | 第121-122页 |
·蛋白质信号肽预测 | 第122页 |
·蛋白质二级结构预测 | 第122-124页 |
·蛋白质三级结构预测 | 第124页 |
·蛋白质家族与保守结构域预测与分析 | 第124-125页 |
·氨基酸分子进化树的构建 | 第125-127页 |
3 讨论 | 第127-129页 |
·枇杷 CAT 在试管苗离体保存中可能的作用机理 | 第127-128页 |
·枇杷 CAT 蛋白质的可能翻译后修饰方式 | 第128页 |
·枇杷 CAT2 基因 3’UTR 的多态性调控 | 第128-129页 |
第六章 枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达分析 | 第129-140页 |
1 材料与方法 | 第129-131页 |
·试验材料 | 第129页 |
·试验方法 | 第129-131页 |
·枇杷叶片总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第129页 |
·引物设计 | 第129-130页 |
·Real Time PCR 反应 | 第130-131页 |
·标准曲线的制作 | 第131页 |
2 结果与分析 | 第131-137页 |
·枇杷叶片不同时期总 RNA 提取 | 第131-132页 |
·各目的基因 qPCR 引物特异性及扩增效率分析 | 第132页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中 ACS 基因的相对定量表达分析 | 第132-133页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中 ACO 基因的相对定量表达分析 | 第133-134页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中 ETR 基因的相对定量表达分析 | 第134-135页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中 ERS 基因的相对定量表达分析 | 第135-136页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中 CAT 基因的相对定量表达分析 | 第136-137页 |
3 讨论 | 第137-140页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中的 ACS、ACO 基因表达量变化的相互联系 | 第137-138页 |
·枇杷试管苗离体保存过程中 ETR、ERS 表达量具有类似的变化规律 | 第138-139页 |
·枇杷 CAT 基因在试管苗离体保存中的作用 | 第139-140页 |
第七章 小结 | 第140-145页 |
1 枇杷胚培养及试管苗的获得 | 第140页 |
2 枇杷试管苗的增殖培养和生根培养 | 第140-141页 |
3 21 份枇杷种质资源试管苗的离体保存研究 | 第141页 |
4 枇杷试管苗叶片乙烯受体 ETR 基因的克隆 | 第141-142页 |
5 枇杷试管苗叶片乙烯受体 ERS 基因的克隆 | 第142页 |
6 枇杷试管苗叶片 CAT 基因的克隆 | 第142-143页 |
7 枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达的 qPCR 分析 | 第143-145页 |
参考文献 | 第145-163页 |
附录 1 图版及图版说明 | 第163-173页 |
附录 2 枇杷 Ej-ETR1a 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第173-176页 |
附录 3 枇杷 Ej-ETR1b 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第176-179页 |
附录 4 枇杷 Ej-ETR1c 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第179-182页 |
附录 5 枇杷 Ej-ETR2a 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第182-185页 |
附录 6 枇杷 Ej-ETR2b 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第185-188页 |
附录 7 枇杷 Ej-ETR2c 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第188-191页 |
附录 8 枇杷 Ej-ETR2d 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第191-194页 |
附录 9 枇杷 Ej-ERS 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第194-196页 |
附录 10 枇杷 Ej-CAT1 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第196-198页 |
附录 11 枇杷 Ej-CAT2 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第198-200页 |
附录 12 枇杷 Ej-CAT2-2 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第200-202页 |
附录 13 枇杷 Ej-CAT 2-3 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第202-204页 |
附录 14 枇杷 Ej-CAT 2-4 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第204-206页 |
附录 15 枇杷 Ej-CAT 2-5 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息 | 第206-208页 |
附录 16 枇杷离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等 qPCR 分析相关曲线图版 | 第208-211页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况与参加学术会议情况 | 第211-212页 |
致谢 | 第212页 |