摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
缩略词 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-21页 |
·白血病干细胞靶向治疗的研究进展 | 第11-16页 |
·前言 | 第11-13页 |
·LSC 起源 | 第13页 |
·LSC 表型特征 | 第13页 |
·LSC 的分子机制 | 第13-14页 |
·靶向 LSC 的治疗 | 第14-16页 |
·针对腺病毒肿瘤特异性的改造策略 | 第16-17页 |
·腺病毒外壳蛋白修饰 | 第16-17页 |
·溶瘤腺病毒载体改造 | 第17页 |
·特异性启动子应用 | 第17页 |
·TRAIL 基因 | 第17-18页 |
·MnSOD 基因 | 第18页 |
·课题研究设计路线 | 第18页 |
·课题目的及意义 | 第18-19页 |
·新颖点 | 第19-20页 |
·课题基本实验方案 | 第20-21页 |
第二章 溶瘤腺病毒 Ad.-sCAR-IL-3TRAIL,Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD 构建及鉴定 | 第21-33页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·质粒、病毒、菌株、细胞系 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·设计引物与合成 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
·重组质粒 pAd.hCMV–sCAR–IL–3–sp–E1A–△E1B–hCMV–TRAIL,pAd.hCMV–sCAR–IL–3 –sp–E1A–△E1B–hCMV–MnSOD的构建 | 第23-28页 |
·分子常用实验方法 | 第23-24页 |
·质粒 pAd.enAFP-E1A- △ E1B-hCMV-TRAIL , pAd.enAFP-E1A- △ E1B- hCMV -MnSOD 的构建 | 第24-26页 |
·重组质粒 pAd.hCMV-sCAR-IL-3-sp-E1A-△E1B-hCMV-TRAIL,pAd.hCMV-sCAR-IL-3-sp-E1A-△E1B-hCMV-MnSOD 的构建 | 第26-28页 |
·目的病毒的包装、鉴定、大量扩增、纯化及滴度测定 | 第28-31页 |
·实验结果 | 第31-33页 |
第三章 携带 TRAIL/MnSOD 杀伤基因的溶瘤腺病毒对 LSCs 杀伤效果的体外研究 | 第33-44页 |
·实验用材料 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·实验用细胞株 | 第33页 |
·病毒 Ad- sCAR-IL-3, Ad-sp 为本实验室所构建 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-35页 |
·MTT 法检测细胞增殖 | 第33-34页 |
·凋亡细胞染色实验:Hoechst 33342 染色 | 第34页 |
·AnnexinV/ PI 双染色法检测细胞凋亡 | 第34页 |
·统计学分析 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-40页 |
·目的病毒显著抑制 KG-1,HL-60 增殖 | 第35-37页 |
·Rh-IL3-sRα对 Ad. -sCAR-IL-3 的抑制 | 第37页 |
·Ad. -sCAR-IL-3-TRAIL,Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD 有效诱导 KG-1 细胞凋亡 | 第37-38页 |
·目的病毒诱导肿瘤细胞凋亡流式检测 | 第38-40页 |
·结论与讨论 | 第40-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
研究生其间研究成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |