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用TRAIL/MN-SOD基因武装化靶向白血病干细胞的溶瘤腺病毒对抑制白血病的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
缩略词第10-11页
第一章 引言第11-21页
   ·白血病干细胞靶向治疗的研究进展第11-16页
     ·前言第11-13页
     ·LSC 起源第13页
     ·LSC 表型特征第13页
     ·LSC 的分子机制第13-14页
     ·靶向 LSC 的治疗第14-16页
   ·针对腺病毒肿瘤特异性的改造策略第16-17页
     ·腺病毒外壳蛋白修饰第16-17页
     ·溶瘤腺病毒载体改造第17页
     ·特异性启动子应用第17页
   ·TRAIL 基因第17-18页
   ·MnSOD 基因第18页
   ·课题研究设计路线第18页
   ·课题目的及意义第18-19页
   ·新颖点第19-20页
   ·课题基本实验方案第20-21页
第二章 溶瘤腺病毒 Ad.-sCAR-IL-3TRAIL,Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD 构建及鉴定第21-33页
   ·实验材料第21-23页
     ·主要试剂第21页
     ·质粒、病毒、菌株、细胞系第21-22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·设计引物与合成第23页
   ·实验方法第23-31页
     ·重组质粒 pAd.hCMV–sCAR–IL–3–sp–E1A–△E1B–hCMV–TRAIL,pAd.hCMV–sCAR–IL–3 –sp–E1A–△E1B–hCMV–MnSOD的构建第23-28页
       ·分子常用实验方法第23-24页
       ·质粒 pAd.enAFP-E1A- △ E1B-hCMV-TRAIL , pAd.enAFP-E1A- △ E1B- hCMV -MnSOD 的构建第24-26页
       ·重组质粒 pAd.hCMV-sCAR-IL-3-sp-E1A-△E1B-hCMV-TRAIL,pAd.hCMV-sCAR-IL-3-sp-E1A-△E1B-hCMV-MnSOD 的构建第26-28页
     ·目的病毒的包装、鉴定、大量扩增、纯化及滴度测定第28-31页
   ·实验结果第31-33页
第三章 携带 TRAIL/MnSOD 杀伤基因的溶瘤腺病毒对 LSCs 杀伤效果的体外研究第33-44页
   ·实验用材料第33页
     ·主要试剂第33页
     ·实验用细胞株第33页
     ·病毒 Ad- sCAR-IL-3, Ad-sp 为本实验室所构建第33页
   ·实验方法第33-35页
     ·MTT 法检测细胞增殖第33-34页
     ·凋亡细胞染色实验:Hoechst 33342 染色第34页
     ·AnnexinV/ PI 双染色法检测细胞凋亡第34页
     ·统计学分析第34-35页
   ·实验结果第35-40页
     ·目的病毒显著抑制 KG-1,HL-60 增殖第35-37页
     ·Rh-IL3-sRα对 Ad. -sCAR-IL-3 的抑制第37页
     ·Ad. -sCAR-IL-3-TRAIL,Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD 有效诱导 KG-1 细胞凋亡第37-38页
     ·目的病毒诱导肿瘤细胞凋亡流式检测第38-40页
   ·结论与讨论第40-44页
参考文献第44-49页
研究生其间研究成果第49-50页
致谢第50页

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