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PD-1-VEGF多靶向Fc融合蛋白PVP的表达、纯化及初步功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第9-13页
第一章 绪论第13-23页
   ·多靶向抗体类药物第13页
   ·PD-L2第13-19页
     ·PD-L2 的表达模式第13-15页
     ·PD-L2 表达的调节第15页
     ·PD-L2/ PD-1 的相互作用第15-16页
     ·PD-L2 的生理功能第16-17页
     ·PD-L2 与癌症第17-19页
   ·VEGF第19-21页
     ·VEGF 在肿瘤血管发生与发展中的作用第19-20页
     ·VEGF 受体第20-21页
     ·Flt-1 和 KDR 与 VEGF 的相互作用第21页
     ·VEGF 与 Flt-1 和 KDR 结合介导的生物效应第21页
   ·本课题的设计思路和研究目的第21-23页
     ·本课题的设计思路第21-22页
     ·本课题的研究目的第22-23页
第二章 携带融合基因 PD-L2-Flt1D2 -Fc 的腺病毒 Ad5-PFF 的构建第23-45页
   ·前言第23-24页
   ·实验器材第24-28页
     ·主要实验材料第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要试剂的配制方法第26-27页
     ·所需引物第27页
     ·基因片段 PD-L2-Flt1D2 的合成第27-28页
   ·实验方法第28-37页
     ·载体 pDC659-PFF 的构建第28-33页
     ·病毒重组、扩增和纯化第33-37页
   ·实验结果第37-43页
     ·载体 pDC659-PFF 的构建第37-39页
     ·质粒 pDC659-PFF 的鉴定第39-41页
     ·腺病毒 Ad5-PFF 的 PCR 鉴定第41-43页
   ·讨论与小结第43-45页
第三章 融合蛋白 PVP 的表达、纯化及初步功能研究第45-61页
   ·前言第45页
   ·实验器材第45-48页
     ·主要实验材料第45页
     ·主要实验仪器第45-46页
     ·实验试剂第46页
     ·主要试剂配置方法第46-48页
   ·实验方法第48-53页
     ·融合蛋白 PVP 的表达第48-50页
     ·融合蛋白 PVP 的大量制备第50页
     ·融合蛋白 PVP 的提取第50-51页
     ·纯化后的融合蛋白 PVP 的浓度检测及初步功能研究第51-53页
   ·结果第53-60页
     ·重组 5 型腺病毒感染 293 细胞的预实验第53页
     ·双抗体夹心 ELISA 实验第53-54页
     ·Western Blotting 实验第54-55页
     ·BCA 法测纯化后的融合蛋白量第55页
     ·Octet Red 96 生物分子相互作用分析仪测定融合蛋白 PVP 的亲和力常数第55-57页
     ·流式检测活化的 T 细胞与融合蛋白 PVP 的结合第57-60页
   ·讨论与小结第60-61页
第四章 结论第61-62页
   ·结论第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68页

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