| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| ·miRNA概况 | 第11-16页 |
| ·miRNA的发现 | 第11页 |
| ·miRNA的命名 | 第11-12页 |
| ·miRNA的特点 | 第12-13页 |
| ·miRNA的生物学产生 | 第13-14页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第14-15页 |
| ·miRNA与siRNA的区别与联系 | 第15-16页 |
| ·miRNA的研究方法 | 第16-19页 |
| ·miRNA的获得 | 第16-17页 |
| ·miRNA的表达检测 | 第17-19页 |
| ·miRNA靶基因的研究方法 | 第19-20页 |
| ·miRNA靶基因的获得 | 第19页 |
| ·miRNA靶基因的验证 | 第19-20页 |
| ·植物miRNA的功能 | 第20-22页 |
| ·miRNA在植物生长发育中的作用 | 第20-21页 |
| ·miRNA在植物胁迫应答中的作用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 番茄保守miRNA的鉴定及其靶基因的预测 | 第23-38页 |
| ·实验材料和试剂 | 第23-24页 |
| ·数据库及分析软件 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·保守miRNA的预测 | 第24-25页 |
| ·miRNA靶基因的预测 | 第25-26页 |
| ·实时定量PCR验证miRNA的表达 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-37页 |
| ·番茄的保守miRNA | 第28-32页 |
| ·番茄中新的miRNA的靶基因 | 第32-35页 |
| ·番茄中新的miRNA的验证 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 3 miR172和miR398的表达模式分析 | 第38-47页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·实时定量PCR标准曲线的制作 | 第38-39页 |
| ·miR172和miR398的表达模式检测 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·Actin、miR172和miR398的标准曲线 | 第39-42页 |
| ·miR172和miR398的组织表达特异性 | 第42页 |
| ·致病疫霉处理对番茄miR172和miR398表达的影响 | 第42-43页 |
| ·盐胁迫对miR172和miR398表达的影响 | 第43-44页 |
| ·干旱胁迫对miR172和miR398表达的影响 | 第44页 |
| ·ABA处理对miR172和miR398表达的影响 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 4 MIR172和MIR398基因的克隆及植物表达载体构建 | 第47-59页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-54页 |
| ·番茄基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·MIR172和MIR398基因的克隆 | 第48-52页 |
| ·MIR172和M1R398植物过表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·提取的番茄基因组DNA | 第54-55页 |
| ·MIR172和MIR398基因的克隆 | 第55页 |
| ·构建的MIR172和MIR398植物表达载体 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 5 烟草的转化及miRNA功能分析 | 第59-66页 |
| ·实验材料与试剂 | 第59页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-61页 |
| ·根癌农杆菌工程菌的获得 | 第59-60页 |
| ·工程菌转化烟草 | 第60页 |
| ·烟草再生植株的分子检测 | 第60页 |
| ·转基因烟草中miR172和miR398的靶基因表达分析 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·农杆菌工程菌的检测 | 第61-62页 |
| ·MIR172和MIR398转化烟草的检测 | 第62-63页 |
| ·转基因烟草中miR172和miR398的表达量的检测 | 第63-64页 |
| ·转基因烟草中胁迫相关靶基因的表达量分析 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 附录A 培养基配方 | 第72-73页 |
| 附录B 论文中所用质粒图谱 | 第73-74页 |
| 附录C 电泳用DNA Marker | 第74-75页 |
| 附录D MIR172和MIR398基因序列 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
