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弓形虫代谢分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 文献综述第14-28页
   ·弓形虫疫苗研究进展第14-15页
     ·全虫疫苗第14页
     ·基因工程疫苗第14页
     ·核酸疫苗第14-15页
   ·弓形虫病的诊断方法研究进展第15-16页
     ·病原学诊断方法第15页
     ·免疫学诊断方法第15-16页
     ·分子生物学方法第16页
   ·弓形虫主要抗原第16-21页
     ·SAG第17页
     ·ESA第17-21页
   ·弓形虫表位研究第21-26页
     ·B细胞抗原表位研究第21-23页
     ·T细胞表位研究第23-24页
     ·表位疫苗设计原理第24页
     ·表位肽疫苗的载体第24-25页
     ·弓形虫抗原表位应用研究第25-26页
     ·表位疫苗优缺点第26页
   ·目的和意义第26-28页
第二章 猪代谢分泌抗原疫苗免疫效果研究第28-41页
   ·材料第29-30页
     ·弓形虫虫株及菌株第29页
     ·实验动物第29-30页
     ·主要实验试剂及载体第30页
   ·方法第30-33页
     ·ESA疫苗制备第30页
     ·弓形虫裂解抗原(TA)的制备第30页
     ·免疫第30页
     ·样品采集及临床观察第30-31页
     ·抗体检测第31页
     ·免疫荧光实验(IFA)第31页
     ·细胞免疫反应第31页
     ·病理组织学检测第31页
     ·基因组DNA的提取第31-32页
     ·SYBR-Green 1荧光定量PCR(QF-PCR)第32-33页
   ·结果第33-39页
     ·临床症状第33-34页
     ·病理解剖变化第34页
     ·抗体检测结果第34-35页
     ·IFA检测结果第35页
     ·细胞因子检测结果第35-36页
     ·组织病理学检测第36页
     ·SYBR-Green 1荧光定量PCR第36-39页
   ·讨论第39-41页
第三章 多表位肽疫苗对小鼠的免疫效果研究第41-48页
   ·材料第42页
     ·弓形虫虫株第42页
     ·实验动物第42页
     ·主要试剂第42页
   ·方法第42-43页
     ·弓形虫裂解抗原(TA)的制备第42页
     ·多肽设计与合成第42页
     ·免疫和攻击第42-43页
     ·抗体检测第43页
     ·脾淋巴细胞的分离第43页
     ·特异性淋巴细胞增殖试验第43页
     ·细胞因子检测第43页
     ·数据分析第43页
   ·结果第43-45页
     ·抗体反应第43-44页
     ·特异性淋巴细胞增殖反应第44页
     ·细胞因子试验第44-45页
     ·免疫小鼠保护性试验结果第45页
   ·讨论第45-48页
第四章 弓形虫表面蛋白1(SAG1)线性B细胞抗原表位的鉴定第48-56页
   ·材料和方法第48-50页
     ·血清第48页
     ·菌株与载体及主要试剂第48-49页
     ·引物设计与合成第49页
     ·SAG1基因PCR扩增第49页
     ·SAG1基因的克隆、测序第49页
     ·多肽合成第49页
     ·合成肽ELISA第49-50页
     ·SAG1生物信息学软件预测第50页
   ·结果第50-54页
     ·弓形虫SAG1基因的克隆第50页
     ·多肽合成第50-51页
     ·合成肽ELISA结果第51页
     ·SAG1生物信息学软件预测结果第51-54页
   ·讨论第54-56页
第五章 弓形虫微线体蛋白1(GRA1)线性B细胞抗原表位的鉴定第56-64页
   ·材料和方法第56-57页
     ·血清第56页
     ·菌株与载体及主要试剂第56页
     ·引物设计与合成第56页
     ·GRA1基因PCR扩增第56-57页
     ·GRA1基因的克隆、测序第57页
     ·多肽合成第57页
     ·合成肽ELISA第57页
     ·GRA1生物信息学软件预测第57页
   ·结果第57-61页
     ·弓形虫GRA1基因的克隆第58页
     ·多肽合成第58页
     ·合成肽ELISA结果第58-59页
     ·GRA1生物信息学软件预测结果第59-61页
   ·讨论第61-64页
第六章 弓形虫合成肽ELISA的建立第64-67页
   ·材料和方法第64-65页
     ·血清样本第64页
     ·ELISA操作流程第64页
     ·包被浓度及样品稀释度的确定第64-65页
     ·特异性和敏感性试验第65页
     ·对比实验第65页
   ·结果第65页
     ·最佳包被量第65页
     ·特异性和敏感性第65页
     ·田间样品检测第65页
   ·讨论第65-67页
第七章 全文结论第67-68页
参考文献第68-86页
致谢第86-87页
作者简介第87页

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