摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-28页 |
·弓形虫疫苗研究进展 | 第14-15页 |
·全虫疫苗 | 第14页 |
·基因工程疫苗 | 第14页 |
·核酸疫苗 | 第14-15页 |
·弓形虫病的诊断方法研究进展 | 第15-16页 |
·病原学诊断方法 | 第15页 |
·免疫学诊断方法 | 第15-16页 |
·分子生物学方法 | 第16页 |
·弓形虫主要抗原 | 第16-21页 |
·SAG | 第17页 |
·ESA | 第17-21页 |
·弓形虫表位研究 | 第21-26页 |
·B细胞抗原表位研究 | 第21-23页 |
·T细胞表位研究 | 第23-24页 |
·表位疫苗设计原理 | 第24页 |
·表位肽疫苗的载体 | 第24-25页 |
·弓形虫抗原表位应用研究 | 第25-26页 |
·表位疫苗优缺点 | 第26页 |
·目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 猪代谢分泌抗原疫苗免疫效果研究 | 第28-41页 |
·材料 | 第29-30页 |
·弓形虫虫株及菌株 | 第29页 |
·实验动物 | 第29-30页 |
·主要实验试剂及载体 | 第30页 |
·方法 | 第30-33页 |
·ESA疫苗制备 | 第30页 |
·弓形虫裂解抗原(TA)的制备 | 第30页 |
·免疫 | 第30页 |
·样品采集及临床观察 | 第30-31页 |
·抗体检测 | 第31页 |
·免疫荧光实验(IFA) | 第31页 |
·细胞免疫反应 | 第31页 |
·病理组织学检测 | 第31页 |
·基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
·SYBR-Green 1荧光定量PCR(QF-PCR) | 第32-33页 |
·结果 | 第33-39页 |
·临床症状 | 第33-34页 |
·病理解剖变化 | 第34页 |
·抗体检测结果 | 第34-35页 |
·IFA检测结果 | 第35页 |
·细胞因子检测结果 | 第35-36页 |
·组织病理学检测 | 第36页 |
·SYBR-Green 1荧光定量PCR | 第36-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第三章 多表位肽疫苗对小鼠的免疫效果研究 | 第41-48页 |
·材料 | 第42页 |
·弓形虫虫株 | 第42页 |
·实验动物 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·弓形虫裂解抗原(TA)的制备 | 第42页 |
·多肽设计与合成 | 第42页 |
·免疫和攻击 | 第42-43页 |
·抗体检测 | 第43页 |
·脾淋巴细胞的分离 | 第43页 |
·特异性淋巴细胞增殖试验 | 第43页 |
·细胞因子检测 | 第43页 |
·数据分析 | 第43页 |
·结果 | 第43-45页 |
·抗体反应 | 第43-44页 |
·特异性淋巴细胞增殖反应 | 第44页 |
·细胞因子试验 | 第44-45页 |
·免疫小鼠保护性试验结果 | 第45页 |
·讨论 | 第45-48页 |
第四章 弓形虫表面蛋白1(SAG1)线性B细胞抗原表位的鉴定 | 第48-56页 |
·材料和方法 | 第48-50页 |
·血清 | 第48页 |
·菌株与载体及主要试剂 | 第48-49页 |
·引物设计与合成 | 第49页 |
·SAG1基因PCR扩增 | 第49页 |
·SAG1基因的克隆、测序 | 第49页 |
·多肽合成 | 第49页 |
·合成肽ELISA | 第49-50页 |
·SAG1生物信息学软件预测 | 第50页 |
·结果 | 第50-54页 |
·弓形虫SAG1基因的克隆 | 第50页 |
·多肽合成 | 第50-51页 |
·合成肽ELISA结果 | 第51页 |
·SAG1生物信息学软件预测结果 | 第51-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第五章 弓形虫微线体蛋白1(GRA1)线性B细胞抗原表位的鉴定 | 第56-64页 |
·材料和方法 | 第56-57页 |
·血清 | 第56页 |
·菌株与载体及主要试剂 | 第56页 |
·引物设计与合成 | 第56页 |
·GRA1基因PCR扩增 | 第56-57页 |
·GRA1基因的克隆、测序 | 第57页 |
·多肽合成 | 第57页 |
·合成肽ELISA | 第57页 |
·GRA1生物信息学软件预测 | 第57页 |
·结果 | 第57-61页 |
·弓形虫GRA1基因的克隆 | 第58页 |
·多肽合成 | 第58页 |
·合成肽ELISA结果 | 第58-59页 |
·GRA1生物信息学软件预测结果 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-64页 |
第六章 弓形虫合成肽ELISA的建立 | 第64-67页 |
·材料和方法 | 第64-65页 |
·血清样本 | 第64页 |
·ELISA操作流程 | 第64页 |
·包被浓度及样品稀释度的确定 | 第64-65页 |
·特异性和敏感性试验 | 第65页 |
·对比实验 | 第65页 |
·结果 | 第65页 |
·最佳包被量 | 第65页 |
·特异性和敏感性 | 第65页 |
·田间样品检测 | 第65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
第七章 全文结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
作者简介 | 第87页 |