绵羊高繁殖力候选基因GnRHR的SNPs及其与繁殖力关联的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第7-10页 |
| 文献综述 | 第10-24页 |
| 1 引言 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·实验样本 | 第25页 |
| ·菌株和载体 | 第25页 |
| ·药品与酶 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·分析工具软件 | 第26页 |
| ·溶液试剂配置 | 第26-28页 |
| ·实验方法 | 第28-29页 |
| ·羊血液DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·DNA浓度和纯度的检测 | 第29页 |
| ·PCR-SSCP | 第29-33页 |
| ·引物设计与PCR扩增 | 第29-31页 |
| ·SSCP分析 | 第31-32页 |
| ·PCR产物直接测序 | 第32页 |
| ·PCR结果的电泳 | 第32-33页 |
| ·克隆和测序 | 第33-35页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第33页 |
| ·感受态细胞的制备---氯化钙法 | 第33-34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·转化 | 第34页 |
| ·质粒DNA的小量提取——试剂盒法 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第35页 |
| ·数据分析 | 第35-36页 |
| ·基因型频率和等位基因频率 | 第35页 |
| ·数据统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·DNA提取 | 第36页 |
| ·GnRHR基因PCR-SSCP分析 | 第36-41页 |
| ·PCR扩增结果 | 第36页 |
| ·PCR-SSCP检测 | 第36-38页 |
| ·基因型判定与序列分析 | 第38-41页 |
| ·基因型频率和基因频率 | 第41页 |
| ·不同基因型小尾寒羊的产羔数比较 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-47页 |
| ·实验材料的选择 | 第42页 |
| ·影响PCR扩增反应的因素 | 第42-44页 |
| ·模板质量 | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42-43页 |
| ·PCR反应的温度 | 第43-44页 |
| ·PCR-SSCP方法检测的影响因素 | 第44-45页 |
| ·影响单链构象形成的因素 | 第44页 |
| ·影响SSCP显示的因素 | 第44-45页 |
| ·SSCP的结果分析 | 第45页 |
| ·GnRHR基因的多态性及其与繁殖力的关系 | 第45-47页 |
| ·绵羊GnRHR基因的多态性 | 第45-46页 |
| ·GnRHR基因与繁殖性能的关系 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介和发表论文情况 | 第57-58页 |
| 附录A | 第58-59页 |
| 附录B | 第59-60页 |