除虫菊花均一化cDNA文库的构建及EST序列分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 1 绪论 | 第12-26页 |
| ·除虫菊概述 | 第12-13页 |
| ·均一化CDNA 文库 | 第13-20页 |
| ·均一化方法 | 第13-14页 |
| ·均一化文库的构建方法 | 第14-20页 |
| ·EST 技术简介 | 第20-24页 |
| ·表达序列标签（EST）的概念 | 第20页 |
| ·EST 的应用 | 第20-24页 |
| ·EST 的不足之处 | 第24页 |
| ·研究目的及技术路线 | 第24-26页 |
| ·研究目的 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 2 除虫菊花均一化CDNA 文库的构建 | 第26-42页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·材料与仪器 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·引物序列 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·除虫菊花的采集与处理 | 第27页 |
| ·除虫菊花总RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第28-29页 |
| ·cDNA 双链扩增 | 第29-30页 |
| ·杂交反应 | 第30页 |
| ·DSN 处理 | 第30-31页 |
| ·均一化后cDNA 扩增 | 第31页 |
| ·SfiⅠ酶切cDNA | 第31页 |
| ·凝胶回收所需的cDNA 片断 | 第31-32页 |
| ·均一化cDNA 与pDNR-LIB 载体连接 | 第32-33页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·电转化大肠杆菌 | 第34页 |
| ·原始文库滴度的测定 | 第34页 |
| ·文库插入片段及重组率的检测 | 第34-35页 |
| ·文库的扩增与扩增后滴度的测定 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·除虫菊花总RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第36-37页 |
| ·均一化结果 | 第37页 |
| ·文库的滴度检测 | 第37-38页 |
| ·文库重组率和插入片段长度的检测 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-42页 |
| ·除虫菊花总RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第39-40页 |
| ·均一化处理 | 第40-41页 |
| ·分级分离及连接 | 第41-42页 |
| 3 EST 序列测定与分析 | 第42-51页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·除虫菊花cDNA 文库 | 第42页 |
| ·试剂和引物 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·独立克隆的获得 | 第43页 |
| ·EST 序列初步处理 | 第43-44页 |
| ·EST 序列相似性比较 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·测序结果分析 | 第44-45页 |
| ·EST 序列相似性比较分析 | 第45-48页 |
| ·序列的生物学功能分类 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 4 结论与展望 | 第51-52页 |
| ·主要结论 | 第51页 |
| ·后续工作展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
