摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第1章 引言 | 第9-21页 |
1.1 研究背景 | 第9-10页 |
1.2 巨噬细胞极化 | 第10-11页 |
1.3 M2PEP多肽 | 第11-12页 |
1.4 AFM在细胞力学性质中的研究发展 | 第12-17页 |
1.4.1 AFM基本结构 | 第12-13页 |
1.4.2 探针与样品表面的相互作用力 | 第13-14页 |
1.4.3 悬臂梁力学 | 第14-15页 |
1.4.4 接触力学:测量杨氏模量的原理 | 第15页 |
1.4.5 力位移曲线测定 | 第15-16页 |
1.4.6 细胞生物力学应用实例 | 第16-17页 |
1.5 激光扫描共聚焦显微镜 | 第17-18页 |
1.6 流式细胞术 | 第18-19页 |
1.7 选题与实验设计 | 第19-21页 |
1.7.1 选题 | 第19页 |
1.7.2 实验设计 | 第19-20页 |
1.7.3 创新点 | 第20-21页 |
第2章 RAW264.7 巨噬细胞及M2PEP共培育 | 第21-35页 |
2.1 引言 | 第21-22页 |
2.2 试剂材料与设备 | 第22-23页 |
2.3 试剂配制 | 第23-25页 |
2.4 实验方案及样品制备 | 第25-28页 |
2.4.1 细胞计数及Trypan Blue染色 | 第25页 |
2.4.2 RAW264.7巨噬细胞培养 | 第25-27页 |
2.4.2.1 巨噬细胞复苏与培养 | 第26页 |
2.4.2.2 巨噬细胞传代与冻存 | 第26-27页 |
2.4.3 RAW264.7巨噬细胞极化诱导 | 第27页 |
2.4.4 M2PEP与 RAW264.7 巨噬细胞共培育观察 | 第27-28页 |
2.5 实验结果与分析 | 第28-34页 |
2.5.1 细胞数量计算 | 第28-29页 |
2.5.2 RAW264.7巨噬细胞极化后表型观察 | 第29-31页 |
2.5.3 M2PEP-FITC与 RAW264.7 巨噬细胞共培育共聚焦显微观察 | 第31-34页 |
2.6 本章小结 | 第34-35页 |
第3章 M2PEP多肽诱导RAW264.7 巨噬细胞 | 第35-46页 |
3.1 引言 | 第35-36页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第36-37页 |
3.3 实验所需试剂配制 | 第37页 |
3.4 实验方案及样品制备 | 第37-39页 |
3.4.1 MTS实验及样品制备 | 第37-38页 |
3.4.2 iNOS、Arg1 表达量测试实验步骤 | 第38-39页 |
3.4.2.1 标记iNOS(诱导型一氧化氮合酶)样品制备 | 第38-39页 |
3.4.2.2 标记Arg1(精氨酸酶1)样品制备 | 第39页 |
3.5 实验结果与分析 | 第39-45页 |
3.5.1 细胞毒性测试结果与分析 | 第39-43页 |
3.5.2 iNOS、Arg1 表达量测定结果与分析 | 第43-45页 |
3.6 本章小结 | 第45-46页 |
第4章 RAW264.7巨噬细胞力-位移曲线扫描实验 | 第46-65页 |
4.1 引言 | 第46页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第46-49页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第46-49页 |
4.2.2 试剂配制 | 第49页 |
4.3 实验方案及样品制备 | 第49-52页 |
4.3.1 原子力显微镜样品制备 | 第49-50页 |
4.3.2 RAW264.7巨噬细胞单次力-位移曲线采集 | 第50-51页 |
4.3.2.1 探针校准及测试系统准备 | 第50页 |
4.3.2.2 悬臂梁弹性常数 | 第50-51页 |
4.3.2.3 活细胞装载 | 第51页 |
4.3.2.4 单点力-位移曲线获取 | 第51页 |
4.3.3 RAW264.7 巨噬细胞Force-Mapping模式扫描 | 第51-52页 |
4.4 实验结果与分析 | 第52-64页 |
4.4.1 单点力学性能测试 | 第52-54页 |
4.4.2 黏附力及压痕深度获取 | 第54页 |
4.4.3 杨氏模量的获取 | 第54-56页 |
4.4.4 Force-Mapping模式获取AFM数据与统计 | 第56-64页 |
4.5 本章小结 | 第64-65页 |
第5章 结论及展望 | 第65-67页 |
5.1 主要研究工作与结论 | 第65-66页 |
5.2 后续工作以及未来展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第76页 |