图片目录 | 第1-9页 |
表格目录 | 第9-10页 |
中文摘要 | 第10-14页 |
英文摘要 | 第14-18页 |
第一章 小决明蛋白酶抑制剂的分离与性质研究 | 第18-37页 |
1.材料与方法 | 第20-23页 |
·植物材料 | 第20页 |
·仪器与试剂 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-23页 |
·小决明种子胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备 | 第20页 |
·小决明蛋白酶抑制剂的纯化 | 第20-21页 |
·胰蛋白酶抑制剂活性的测定 | 第21-22页 |
·不同还原剂对决明蛋白酶抑制剂活性的影响 | 第22页 |
·三氯乙酸对决明蛋白酶抑制剂活性的影响 | 第22页 |
·CTTI的荧光光谱分析 | 第22页 |
·CTTI的圆二色谱分析 | 第22页 |
·COTI纯度的鉴定(SDS—PAGE) | 第22-23页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-31页 |
·蛋白质标准曲线的制作 | 第23页 |
·小决明丝氨酸蛋白酶抑制剂的分析 | 第23-26页 |
·CTTI的分离纯化 | 第26-27页 |
·CTTI的SDS—PAGE | 第27-28页 |
·CTTI的热稳定性 | 第28页 |
·CTTI的pH稳定性 | 第28-29页 |
·CTTI的荧光光谱 | 第29页 |
·CTTI的园二色谱 | 第29-31页 |
3 讨论 | 第31-32页 |
小结 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-37页 |
第二章 大决明子蛋白酶抑制剂的分离、性质与抗虫研究 | 第37-99页 |
1 材料与方法 | 第40-47页 |
·植物材料 | 第40页 |
·仪器与试剂 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-47页 |
·固相化胰蛋白酶亲和柱制备 | 第40-41页 |
·大决明种子胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备 | 第41页 |
·大决明子胰蛋白酶抑制剂的纯化 | 第41-42页 |
·胰蛋白酶抑制剂活性的测定 | 第42-43页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第43页 |
·COTI纯度的鉴定(SDS—PAGE) | 第43页 |
·热稳定性实验 | 第43页 |
·pH值对COTI抑制活性的影响 | 第43页 |
·胰蛋白酶Km值和COTI表观抑制常数Ki值的测定 | 第43-44页 |
·COTI对胰蛋白酶的抑制能力(抑制摩尔比)的测定 | 第44页 |
·COTI—胰蛋白酶复合物实验 | 第44-45页 |
·模拟胃液实验 | 第45页 |
·肽指纹图谱与串联质谱 | 第45页 |
·荧光光谱分析 | 第45页 |
·圆二色谱分析 | 第45-46页 |
·菜青虫中肠液的制备 | 第46页 |
·氨基酸残基的化学修饰 | 第46-47页 |
·COTI抑制菜青虫的实验 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-83页 |
·固相化胰蛋白酶亲合层析柱的制备 | 第47-48页 |
·胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备 | 第48页 |
·COTI的分离纯化 | 第48-49页 |
·COTI的SDS-PAGE、明胶-PAGE和明胶-SDS-PAGE | 第49-51页 |
·化学修饰 | 第51-52页 |
·COTI的热稳定性 | 第52-53页 |
·COTI的pH稳定性 | 第53-54页 |
·COTI对还原剂的稳定性 | 第54页 |
·COTI的肽指纹图谱 | 第54-60页 |
·COTI的串联质谱结果和De novo Sequencing结果 | 第60-70页 |
·模拟胃液实验 | 第70-72页 |
·COTI表观抑制常数Ki值和抑制摩尔比的测定 | 第72-73页 |
·胰蛋白酶-COTI形成复合物实验 | 第73-74页 |
·COTI的荧光光谱 | 第74-75页 |
·COTI与胰蛋白酶复合物的荧光光谱 | 第75-76页 |
·COTI的园二色谱 | 第76-78页 |
·COTI的氨基酸组成 | 第78-79页 |
·COTI的抗虫效果 | 第79-83页 |
·COTI的离体抗虫实验 | 第79-81页 |
·COTI的活体喂食实验 | 第81-83页 |
3 讨论 | 第83-89页 |
·固相化胰蛋白酶的制备(亲合层析胶体制备) | 第83-84页 |
·胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备 | 第84页 |
·COTI的热稳定性 | 第84页 |
·COTI的pH稳定性 | 第84-85页 |
·COTI的模拟胃液实验 | 第85页 |
·COTI的化学修饰 | 第85-86页 |
·COTI的荧光光谱 | 第86-87页 |
·COTI的园二色谱 | 第87-88页 |
·COTI的同源性确认 | 第88页 |
·COTI的抗虫研究 | 第88-89页 |
小结 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-99页 |
第三章 植物蛋白类蛋白酶抑制剂的结构与功能研究 | 第99-133页 |
1 概况 | 第99-100页 |
2 蛋白酶抑制剂的分类和结构特征 | 第100-107页 |
·蛋白酶抑制剂的分类 | 第100-101页 |
·植物中含有的蛋白酶抑制剂 | 第101页 |
·各类蛋白酶抑制剂的结构特征 | 第101-106页 |
·丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第101-106页 |
·Kunitz家族 | 第102-103页 |
·Bowman-Birk家族(BBI) | 第103-104页 |
·马铃薯蛋白酶抑制剂(PI)PI-Ⅰ和PI-Ⅱ家族 | 第104-105页 |
·Serpin家族 | 第105-106页 |
·巯基蛋白酶抑制剂(CPI) | 第106-107页 |
3 蛋白酶抑制剂的作用机理 | 第107-109页 |
4 生理功能 | 第109-113页 |
·生物学方面 | 第109-113页 |
·积累营养物质 | 第109-110页 |
·活性调节因子 | 第110-111页 |
·抵抗病虫害和病原体的侵染 | 第111-112页 |
·植物蛋白酶抑制剂的其他生理活性 | 第112-113页 |
5 蛋白酶抑制剂的应用 | 第113-122页 |
·医药方面 | 第113页 |
·抗炎抗感染 | 第113-114页 |
·抗肿瘤 | 第114-115页 |
·抗辐射 | 第115页 |
·转基因植物和抗害虫 | 第115-122页 |
·我国农业现状 | 第115-116页 |
·蛋白酶抑制剂的抗虫作用机制 | 第116-117页 |
·蛋白酶抑制剂的作用特点 | 第117-118页 |
·数种蛋白酶抑制剂的抗虫研究 | 第118-122页 |
·豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 | 第118-119页 |
·马铃薯蛋白酶抑制剂—Ⅱ基因 | 第119页 |
·苦豆子胰蛋白酶抑制剂 | 第119页 |
·大豆胰蛋白酶抑制剂 | 第119-120页 |
·慈菇蛋白酶抑制剂基因 | 第120页 |
·蛋白酶抑制剂的转基因研究 | 第120-121页 |
·影响蛋白酶抑制剂抗虫的因素 | 第121-122页 |
小结 | 第122-125页 |
参考文献 | 第125-133页 |
致谢 | 第133-134页 |
附录: 完成和发表论文情况 | 第134-135页 |