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两种决明子Cassia tora,Cassia obtusifolia蛋白酶抑制剂的纯化、性质与功能研究

图片目录第1-9页
表格目录第9-10页
中文摘要第10-14页
英文摘要第14-18页
第一章 小决明蛋白酶抑制剂的分离与性质研究第18-37页
 1.材料与方法第20-23页
   ·植物材料第20页
   ·仪器与试剂第20页
   ·实验方法第20-23页
     ·小决明种子胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备第20页
     ·小决明蛋白酶抑制剂的纯化第20-21页
     ·胰蛋白酶抑制剂活性的测定第21-22页
     ·不同还原剂对决明蛋白酶抑制剂活性的影响第22页
     ·三氯乙酸对决明蛋白酶抑制剂活性的影响第22页
     ·CTTI的荧光光谱分析第22页
     ·CTTI的圆二色谱分析第22页
     ·COTI纯度的鉴定(SDS—PAGE)第22-23页
     ·蛋白质浓度的测定第23页
 2 结果与分析第23-31页
   ·蛋白质标准曲线的制作第23页
   ·小决明丝氨酸蛋白酶抑制剂的分析第23-26页
   ·CTTI的分离纯化第26-27页
   ·CTTI的SDS—PAGE第27-28页
   ·CTTI的热稳定性第28页
   ·CTTI的pH稳定性第28-29页
   ·CTTI的荧光光谱第29页
   ·CTTI的园二色谱第29-31页
 3 讨论第31-32页
 小结第32-33页
 参考文献第33-37页
第二章 大决明子蛋白酶抑制剂的分离、性质与抗虫研究第37-99页
 1 材料与方法第40-47页
   ·植物材料第40页
   ·仪器与试剂第40页
   ·实验方法第40-47页
     ·固相化胰蛋白酶亲和柱制备第40-41页
     ·大决明种子胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备第41页
     ·大决明子胰蛋白酶抑制剂的纯化第41-42页
     ·胰蛋白酶抑制剂活性的测定第42-43页
     ·蛋白质浓度的测定第43页
     ·COTI纯度的鉴定(SDS—PAGE)第43页
     ·热稳定性实验第43页
     ·pH值对COTI抑制活性的影响第43页
     ·胰蛋白酶Km值和COTI表观抑制常数Ki值的测定第43-44页
     ·COTI对胰蛋白酶的抑制能力(抑制摩尔比)的测定第44页
     ·COTI—胰蛋白酶复合物实验第44-45页
     ·模拟胃液实验第45页
     ·肽指纹图谱与串联质谱第45页
     ·荧光光谱分析第45页
     ·圆二色谱分析第45-46页
     ·菜青虫中肠液的制备第46页
     ·氨基酸残基的化学修饰第46-47页
     ·COTI抑制菜青虫的实验第47页
 2 结果与分析第47-83页
   ·固相化胰蛋白酶亲合层析柱的制备第47-48页
   ·胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备第48页
   ·COTI的分离纯化第48-49页
   ·COTI的SDS-PAGE、明胶-PAGE和明胶-SDS-PAGE第49-51页
   ·化学修饰第51-52页
   ·COTI的热稳定性第52-53页
   ·COTI的pH稳定性第53-54页
   ·COTI对还原剂的稳定性第54页
   ·COTI的肽指纹图谱第54-60页
   ·COTI的串联质谱结果和De novo Sequencing结果第60-70页
   ·模拟胃液实验第70-72页
   ·COTI表观抑制常数Ki值和抑制摩尔比的测定第72-73页
   ·胰蛋白酶-COTI形成复合物实验第73-74页
   ·COTI的荧光光谱第74-75页
   ·COTI与胰蛋白酶复合物的荧光光谱第75-76页
   ·COTI的园二色谱第76-78页
   ·COTI的氨基酸组成第78-79页
   ·COTI的抗虫效果第79-83页
     ·COTI的离体抗虫实验第79-81页
     ·COTI的活体喂食实验第81-83页
 3 讨论第83-89页
   ·固相化胰蛋白酶的制备(亲合层析胶体制备)第83-84页
   ·胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备第84页
   ·COTI的热稳定性第84页
   ·COTI的pH稳定性第84-85页
   ·COTI的模拟胃液实验第85页
   ·COTI的化学修饰第85-86页
   ·COTI的荧光光谱第86-87页
   ·COTI的园二色谱第87-88页
   ·COTI的同源性确认第88页
   ·COTI的抗虫研究第88-89页
 小结第89-91页
 参考文献第91-99页
第三章 植物蛋白类蛋白酶抑制剂的结构与功能研究第99-133页
 1 概况第99-100页
 2 蛋白酶抑制剂的分类和结构特征第100-107页
   ·蛋白酶抑制剂的分类第100-101页
   ·植物中含有的蛋白酶抑制剂第101页
   ·各类蛋白酶抑制剂的结构特征第101-106页
     ·丝氨酸蛋白酶抑制剂第101-106页
       ·Kunitz家族第102-103页
       ·Bowman-Birk家族(BBI)第103-104页
       ·马铃薯蛋白酶抑制剂(PI)PI-Ⅰ和PI-Ⅱ家族第104-105页
       ·Serpin家族第105-106页
   ·巯基蛋白酶抑制剂(CPI)第106-107页
 3 蛋白酶抑制剂的作用机理第107-109页
 4 生理功能第109-113页
   ·生物学方面第109-113页
     ·积累营养物质第109-110页
     ·活性调节因子第110-111页
     ·抵抗病虫害和病原体的侵染第111-112页
     ·植物蛋白酶抑制剂的其他生理活性第112-113页
 5 蛋白酶抑制剂的应用第113-122页
   ·医药方面第113页
   ·抗炎抗感染第113-114页
   ·抗肿瘤第114-115页
   ·抗辐射第115页
   ·转基因植物和抗害虫第115-122页
     ·我国农业现状第115-116页
     ·蛋白酶抑制剂的抗虫作用机制第116-117页
     ·蛋白酶抑制剂的作用特点第117-118页
     ·数种蛋白酶抑制剂的抗虫研究第118-122页
       ·豇豆胰蛋白酶抑制剂基因第118-119页
       ·马铃薯蛋白酶抑制剂—Ⅱ基因第119页
       ·苦豆子胰蛋白酶抑制剂第119页
       ·大豆胰蛋白酶抑制剂第119-120页
       ·慈菇蛋白酶抑制剂基因第120页
       ·蛋白酶抑制剂的转基因研究第120-121页
       ·影响蛋白酶抑制剂抗虫的因素第121-122页
 小结第122-125页
 参考文献第125-133页
致谢第133-134页
附录: 完成和发表论文情况第134-135页

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