独创性声明 | 第1页 |
论文使用授权的说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
缩写词 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 研究的进展和意义 | 第13-28页 |
1. 福建柑桔种质的RAPD分析 | 第13-19页 |
·柑桔概况 | 第13-14页 |
·福建柑桔种质概况 | 第13页 |
·杂柑品种的现状及其意义 | 第13-14页 |
·柑桔分类在国内外的研究现状 | 第14页 |
·RAPD技术及其在柑桔中应用的研究进展 | 第14-18页 |
·RAPD技术及其现状 | 第14-16页 |
·RAPD技术存在的问题及其解决方法 | 第16页 |
·RAPD技术在柑桔育种研究中的应用 | 第16-18页 |
·福建柑桔种质的RAPD分析研究的意义 | 第18-19页 |
2. 龙眼LEAFY基因克隆和表达的研究 | 第19-28页 |
·花的发育和成花基因 | 第19-22页 |
·花的发育过程 | 第19页 |
·成花基因 | 第19-21页 |
·基因的表达部位及其相互关系 | 第21-22页 |
·LEAFY基因的研究进展 | 第22-25页 |
·LEAFY基因的机理研究 | 第22-23页 |
·LEAFY基因的表达及影响其表达的因子 | 第23-25页 |
·LEAFY基因表达量的增加促进开花过程 | 第25页 |
·龙眼开花和成花逆转研究的进展 | 第25-27页 |
·龙眼花芽分化的基本过程 | 第26页 |
·龙眼的成花逆转 | 第26-27页 |
·龙眼LEAFY基因克隆和表达研究的意义 | 第27-28页 |
第二章 福建柑桔种质的 RAPD分析 | 第28-48页 |
1. 试验材料及方法 | 第28-34页 |
·试验材料 | 第28-29页 |
·主要实验仪器、试剂及试验所需溶液的配置 | 第29-31页 |
·主要实验仪器 | 第29-30页 |
·试剂 | 第30页 |
·试验所需溶液及其配制 | 第30-31页 |
·柑桔基因组 DNA的提取与检测 | 第31-33页 |
·CTAB法制备柑桔基因组 DNA | 第31页 |
·改进的CTAB法制备柑桔基因组 DNA | 第31-32页 |
·柑桔基因组 DNA的检测 | 第32-33页 |
·柑桔基因组 DNA的 RAPD-PCR扩增反应 | 第33页 |
·RAPD-PCR扩增反应体系的优化 | 第33页 |
·RAPD-PCR扩增反应引物的筛选 | 第33页 |
·RAPD-PCR扩增反应的优化体系及程序 | 第33页 |
·检测与成像 | 第33-34页 |
·数据分析 | 第34页 |
2. 结果与分析 | 第34-44页 |
·柑桔基因组 DNA的提取结果与分析 | 第34-36页 |
·柑桔基因组 DNA不同提取方法的比较 | 第34-35页 |
·柑桔基因组 DNA的提取结果与分析 | 第35-36页 |
·RAPD-PCR扩增反应体系的优化 | 第36-39页 |
·Mg~(2+)浓度对反应体系的影响 | 第36-37页 |
·Taq DNA聚合酶对反应体系的影响 | 第37页 |
·模板 DNA浓度和纯度对反应体系的影响 | 第37页 |
·随机引物浓度对反应体系的影响 | 第37-38页 |
·dNTPs浓度对反应体系的影响 | 第38页 |
·热循环参数对扩增结果的影响 | 第38-39页 |
·柑桔种质资源遗传多样性RAPD分析 | 第39-44页 |
·RAPD标记的多态性 | 第39-41页 |
·福建54份柑桔种质的聚类结果与分析 | 第41-43页 |
·部分柑桔种质亲缘关系的补充研究 | 第43-44页 |
3. 讨论 | 第44-48页 |
·基因组 DNA提取的影响因素 | 第44-45页 |
·基因组 DNA的提取质量 | 第45页 |
·RAPD-PCR扩增反应体系及程序的建立 | 第45-46页 |
·RAPD-PCR扩增的重复性和稳定性 | 第46页 |
·RAPD-PCR扩增对基因组DNA的要求 | 第46-47页 |
·RAPD技术在柑桔种质研究中的可行性 | 第47页 |
·福建省柑桔种类品种的遗传多样性 | 第47-48页 |
第三章 龙眼LEAFY基因克隆和表达的研究 | 第48-71页 |
1. 试验材料与方法 | 第48-55页 |
·材料 | 第48-49页 |
·试验材料 | 第48页 |
·菌株和质粒 | 第48页 |
·试剂 | 第48页 |
·试剂盒、酶和 Marker | 第48-49页 |
·引物合成与测序 | 第49页 |
·仪器与设备 | 第49页 |
·龙眼基因组 DNA和总 RNA的提取与检测 | 第49-50页 |
·龙眼基因组 DNA的提取与检测 | 第49页 |
·龙眼总 RNA的提取与检测 | 第49-50页 |
·试验方法 | 第50-53页 |
·LFY基因片段的克隆 | 第50-51页 |
·LFY基因在龙眼不同组织器官中的表达 | 第51-52页 |
·LFY基因的3'-RACE | 第52-53页 |
·PCR产物的胶回收及检测 | 第53-54页 |
·目的片段与pMD_(18)-T-vector的连接 | 第54页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备-CaCl_2法 | 第54页 |
·连接产物的转化与蓝白斑筛选 | 第54-55页 |
·重组质粒的 PCR检测 | 第55页 |
2. 结果与分析 | 第55-67页 |
·龙眼基因组 DNA的提取结果与分析 | 第55-56页 |
·龙眼总 RNA的提取结果与分析 | 第56-57页 |
·龙眼LFY cDNA和 DNA序列的分析 | 第57-65页 |
·引物(A)对龙眼cDNA的克隆 | 第58-59页 |
·龙眼LFY cDNA基因氨基酸序列与其它物种的LFY同源基因的比较 | 第59页 |
·引物(A)对龙眼基因组 DNA的克隆 | 第59-60页 |
·龙眼LFY DNA和cDNA的序列比较 | 第60-63页 |
·龙眼LFY基因序列与 FLO/LFY序列比较分析 | 第63-65页 |
·引物(B)对龙眼cDNA的克隆 | 第65页 |
·LFY基因在龙眼不同器官组织的表达 | 第65-67页 |
·3'-RACE | 第67页 |
·LFY基因的3’-RACE扩增结果 | 第67页 |
·龙眼LFY基因序列拼接后结果 | 第67页 |
3. 讨论 | 第67-71页 |
·龙眼基因组 DNA的提取 | 第67-68页 |
·龙眼总 RNA的提取 | 第68页 |
·总 RNA提取和纯化过程中多酚类物质和多糖的去除 | 第68-69页 |
·龙眼中LFY同源基因的克隆 | 第69-70页 |
·LFY基因在龙眼不同器官组织的表达研究 | 第70页 |
·龙眼中LFY基因全长的获得及龙眼LEAFY基因功能的讨论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
致谢 | 第79页 |