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福建柑桔种质的RAPD分析及龙眼LEAFY基因克隆和表达的研究

独创性声明第1页
论文使用授权的说明第4-8页
中文摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
缩写词第10-11页
前言第11-13页
第一章 研究的进展和意义第13-28页
 1. 福建柑桔种质的RAPD分析第13-19页
   ·柑桔概况第13-14页
     ·福建柑桔种质概况第13页
     ·杂柑品种的现状及其意义第13-14页
     ·柑桔分类在国内外的研究现状第14页
   ·RAPD技术及其在柑桔中应用的研究进展第14-18页
     ·RAPD技术及其现状第14-16页
     ·RAPD技术存在的问题及其解决方法第16页
     ·RAPD技术在柑桔育种研究中的应用第16-18页
   ·福建柑桔种质的RAPD分析研究的意义第18-19页
 2. 龙眼LEAFY基因克隆和表达的研究第19-28页
   ·花的发育和成花基因第19-22页
     ·花的发育过程第19页
     ·成花基因第19-21页
     ·基因的表达部位及其相互关系第21-22页
   ·LEAFY基因的研究进展第22-25页
     ·LEAFY基因的机理研究第22-23页
     ·LEAFY基因的表达及影响其表达的因子第23-25页
     ·LEAFY基因表达量的增加促进开花过程第25页
   ·龙眼开花和成花逆转研究的进展第25-27页
     ·龙眼花芽分化的基本过程第26页
     ·龙眼的成花逆转第26-27页
   ·龙眼LEAFY基因克隆和表达研究的意义第27-28页
第二章 福建柑桔种质的 RAPD分析第28-48页
 1. 试验材料及方法第28-34页
   ·试验材料第28-29页
   ·主要实验仪器、试剂及试验所需溶液的配置第29-31页
     ·主要实验仪器第29-30页
     ·试剂第30页
     ·试验所需溶液及其配制第30-31页
   ·柑桔基因组 DNA的提取与检测第31-33页
     ·CTAB法制备柑桔基因组 DNA第31页
     ·改进的CTAB法制备柑桔基因组 DNA第31-32页
     ·柑桔基因组 DNA的检测第32-33页
   ·柑桔基因组 DNA的 RAPD-PCR扩增反应第33页
     ·RAPD-PCR扩增反应体系的优化第33页
     ·RAPD-PCR扩增反应引物的筛选第33页
     ·RAPD-PCR扩增反应的优化体系及程序第33页
   ·检测与成像第33-34页
   ·数据分析第34页
 2. 结果与分析第34-44页
   ·柑桔基因组 DNA的提取结果与分析第34-36页
     ·柑桔基因组 DNA不同提取方法的比较第34-35页
     ·柑桔基因组 DNA的提取结果与分析第35-36页
   ·RAPD-PCR扩增反应体系的优化第36-39页
     ·Mg~(2+)浓度对反应体系的影响第36-37页
     ·Taq DNA聚合酶对反应体系的影响第37页
     ·模板 DNA浓度和纯度对反应体系的影响第37页
     ·随机引物浓度对反应体系的影响第37-38页
     ·dNTPs浓度对反应体系的影响第38页
     ·热循环参数对扩增结果的影响第38-39页
   ·柑桔种质资源遗传多样性RAPD分析第39-44页
     ·RAPD标记的多态性第39-41页
     ·福建54份柑桔种质的聚类结果与分析第41-43页
     ·部分柑桔种质亲缘关系的补充研究第43-44页
 3. 讨论第44-48页
   ·基因组 DNA提取的影响因素第44-45页
   ·基因组 DNA的提取质量第45页
   ·RAPD-PCR扩增反应体系及程序的建立第45-46页
   ·RAPD-PCR扩增的重复性和稳定性第46页
   ·RAPD-PCR扩增对基因组DNA的要求第46-47页
   ·RAPD技术在柑桔种质研究中的可行性第47页
   ·福建省柑桔种类品种的遗传多样性第47-48页
第三章 龙眼LEAFY基因克隆和表达的研究第48-71页
 1. 试验材料与方法第48-55页
   ·材料第48-49页
     ·试验材料第48页
     ·菌株和质粒第48页
     ·试剂第48页
     ·试剂盒、酶和 Marker第48-49页
     ·引物合成与测序第49页
     ·仪器与设备第49页
   ·龙眼基因组 DNA和总 RNA的提取与检测第49-50页
     ·龙眼基因组 DNA的提取与检测第49页
     ·龙眼总 RNA的提取与检测第49-50页
   ·试验方法第50-53页
     ·LFY基因片段的克隆第50-51页
     ·LFY基因在龙眼不同组织器官中的表达第51-52页
     ·LFY基因的3'-RACE第52-53页
   ·PCR产物的胶回收及检测第53-54页
   ·目的片段与pMD_(18)-T-vector的连接第54页
   ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备-CaCl_2法第54页
   ·连接产物的转化与蓝白斑筛选第54-55页
   ·重组质粒的 PCR检测第55页
 2. 结果与分析第55-67页
   ·龙眼基因组 DNA的提取结果与分析第55-56页
   ·龙眼总 RNA的提取结果与分析第56-57页
   ·龙眼LFY cDNA和 DNA序列的分析第57-65页
     ·引物(A)对龙眼cDNA的克隆第58-59页
     ·龙眼LFY cDNA基因氨基酸序列与其它物种的LFY同源基因的比较第59页
     ·引物(A)对龙眼基因组 DNA的克隆第59-60页
     ·龙眼LFY DNA和cDNA的序列比较第60-63页
     ·龙眼LFY基因序列与 FLO/LFY序列比较分析第63-65页
     ·引物(B)对龙眼cDNA的克隆第65页
   ·LFY基因在龙眼不同器官组织的表达第65-67页
   ·3'-RACE第67页
     ·LFY基因的3’-RACE扩增结果第67页
     ·龙眼LFY基因序列拼接后结果第67页
 3. 讨论第67-71页
   ·龙眼基因组 DNA的提取第67-68页
   ·龙眼总 RNA的提取第68页
   ·总 RNA提取和纯化过程中多酚类物质和多糖的去除第68-69页
   ·龙眼中LFY同源基因的克隆第69-70页
   ·LFY基因在龙眼不同器官组织的表达研究第70页
   ·龙眼中LFY基因全长的获得及龙眼LEAFY基因功能的讨论第70-71页
参考文献第71-79页
致谢第79页

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