| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-34页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行与危害 | 第14-21页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·流行病学 | 第15-16页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第16-18页 |
| ·实验室诊断方法 | 第18-21页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子研究进展 | 第21-28页 |
| ·外毒素 | 第21-24页 |
| ·外膜蛋白 | 第24-25页 |
| ·荚膜多糖 | 第25-26页 |
| ·脂多糖 | 第26页 |
| ·转铁结合蛋白 | 第26-27页 |
| ·菌毛 | 第27-28页 |
| ·其他毒力因子 | 第28页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎疫苗研究进展 | 第28-32页 |
| ·灭活疫苗 | 第29页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第29-30页 |
| ·Ghosts 疫苗 | 第30-31页 |
| ·亚单位疫苗 | 第31-32页 |
| ·研究目的及意义 | 第32-33页 |
| ·主要研究内容 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-48页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·质粒与菌株 | 第34页 |
| ·引物 | 第34页 |
| ·抗体 | 第34页 |
| ·试验动物 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-36页 |
| ·培养液及培养基 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-48页 |
| ·胸膜肺炎防线杆菌的PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·基因的克隆与序列测定 | 第37-40页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第42-43页 |
| ·Western-blot 分析6 种重组蛋白的抗原性 | 第43页 |
| ·疫苗的制备 | 第43-44页 |
| ·免疫及攻毒 | 第44页 |
| ·攻毒后小鼠肺脏病理变化 | 第44-45页 |
| ·间接免疫荧光进行肺脏的抗原定位试验 | 第45页 |
| ·血清特异性抗体的检测 | 第45-46页 |
| ·脾淋巴细胞转化试验及脾脏诱生的IL-2 的检测 | 第46-47页 |
| ·数据处理 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-68页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌PCR 鉴定结果 | 第48页 |
| ·目的基因的克隆与序列测定结果 | 第48-50页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第48页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第48-50页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第50页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第50页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析6 种重组蛋白 | 第50-52页 |
| ·Western-blot 分析6 种重组蛋白的抗原性 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定天然提取的胸膜肺炎放线杆菌的5 种毒力因子 | 第53-54页 |
| ·免疫攻毒后保护情况 | 第54-58页 |
| ·LD50 的确定 | 第54页 |
| ·攻毒后临床症状及死亡情况 | 第54页 |
| ·肺脏解剖学病变 | 第54-56页 |
| ·肺脏组织学病变 | 第56-58页 |
| ·免疫鼠血清特异性抗体的动态变化 | 第58-63页 |
| ·ApxI 抗体 | 第58-59页 |
| ·ApxII 抗体 | 第59-60页 |
| ·ApxIII 抗体 | 第60-61页 |
| ·Apfa 抗体 | 第61页 |
| ·OMP 抗体 | 第61-63页 |
| ·免疫鼠脾淋巴细胞转化的动态变化 | 第63页 |
| ·免疫鼠脾淋巴细胞诱生IL-2 的动态变化 | 第63-64页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第64-68页 |
| 4 讨论 | 第68-77页 |
| ·关于胸膜肺炎放线杆菌菌株的鉴定 | 第68页 |
| ·关于目的基因的克隆与序列测定 | 第68-69页 |
| ·关于目的基因的表达及抗原反应原性检测 | 第69-71页 |
| ·关于目的基因克隆过程中遇到的问题 | 第71页 |
| ·关于猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗的设计思路 | 第71-73页 |
| ·关于重组亚单位疫苗对BALB/c 小鼠的保护作用 | 第73页 |
| ·关于重组亚单位疫苗对体液免疫反应的影响 | 第73-75页 |
| ·关于重组亚单位疫苗对细胞免疫的影响 | 第75-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-92页 |
| 附录A | 第92-99页 |
| 附录B | 第99-102页 |
| 附录C | 第102-108页 |
| 附录D | 第108-110页 |
| 附录E | 第110-113页 |
| 附录F | 第113-114页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第114页 |
