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鸭瘟病毒gI基因的原核表达、多抗制备、转录时相及感染细胞定位研究

本论文的创新性工作第1-4页
中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略词表第9-14页
第一部分 文献综述及选题目的和意义第14-20页
 第一章 疱疹病毒gI基因及其编码蛋白的研究进展第14-20页
  1. 疱疹病毒gI基因及其编码蛋白的研究进展第14-19页
   ·疱疹病毒概述第14页
   ·疱疹病毒gI基因的特点第14页
   ·疱疹病毒gI基因编码蛋白的特点第14-15页
   ·疱疹病毒gI蛋白的亚细胞定位第15页
   ·疱疹病毒gI蛋白的功能第15-18页
   ·疱疹病毒gI蛋白与其他蛋白的相互作用第18-19页
   ·展望第19页
  2. 选题的目的和意义第19-20页
第二部分 实验研究第20-69页
 第二章 鸭瘟病毒gI基因生物信息学分析第20-34页
  1. 材料与方法第20-21页
   ·材料第20页
   ·方法第20-21页
  2. 结果第21-31页
   ·鸭瘟病毒gI基因核酸特征分析第21页
   ·鸭瘟病毒gI基因编码蛋白特征分析第21-29页
   ·鸭瘟病毒gI基因密码子偏爱性分析第29-31页
  3. 讨论第31-34页
   ·关于生物信息学第31页
   ·鸭瘟病毒gI基因及其编码蛋白特征分析第31-32页
   ·鸭瘟病毒gI基因密码子偏爱性对表达的影响第32-34页
 第三章 鸭瘟病毒gI基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备第34-52页
  1. 材料第34-35页
   ·毒株、菌株及载体第34页
   ·实验动物第34页
   ·主要试剂第34页
   ·主要溶液及配制第34-35页
   ·主要仪器设备第35页
  2. 方法第35-43页
   ·DPV基因组DNA的提取第35-36页
   ·PCR扩增第36-37页
   ·T-克隆与鉴定第37-38页
   ·DPVgI基因表达载体的构建第38-40页
   ·DPVgI重组蛋白的表达及条件优化第40-41页
   ·DPVgI重组蛋白的纯化第41页
   ·Western-blot鉴定DPVgI重组蛋白第41-42页
   ·兔抗DPV 6×His-gI多克隆抗体的制备第42页
   ·琼脂扩散试验检测兔抗6×His-gI抗体效价第42-43页
   ·兔抗DPV gI重组蛋白IgG的纯化及鉴定第43页
  3. 结果第43-50页
   ·DPVgI基因的扩增和T-克隆鉴定第43-44页
   ·重组表达质粒pET-32a(+)-gI的鉴定第44页
   ·DPVgI重组蛋白的表达及条件优化第44-47页
   ·兔抗DPV 6×His-gI重组蛋白的Western-blot鉴定第47页
   ·兔抗DPV6×His-gI重组蛋白血清效价的琼脂扩散试验检测第47-48页
   ·Western-blot检测兔抗DPV 6×His-gI重组蛋白血清特异性第48-49页
   ·兔抗DPV 6×His-gI重组蛋白IgG的纯化及鉴定第49-50页
  4. 讨论第50-52页
   ·外源基因的融合表达第50-51页
   ·多克隆抗体的制备及纯化第51-52页
 第四章 鸭瘟病毒体外感染宿主细胞gI基因转录时相分析第52-64页
  1. 材料第52-53页
   ·毒株/细胞第52页
   ·主要试剂第52页
   ·主要仪器设备第52页
   ·其他第52-53页
  2. 方法第53-55页
   ·FQ-PCR检测DPV感染宿主细胞后gI基因的转录第53-55页
   ·核酸蛋白合成抑制试验分析gI基因类型第55页
  3. 结果第55-62页
   ·RNA质量检测第55-56页
   ·引物特异性检测第56页
   ·FQ-PCR标准曲线的绘制第56-59页
   ·DPV体外感染DEF后gI基因转录情况第59-61页
   ·核酸蛋白合成抑制后体外感染DEF的DPV gI基因转录情况第61-62页
  4. 讨论第62-64页
   ·荧光定量PCR法检测DPV gI基因转录情况第62-63页
   ·核酸蛋白合成抑制试验分析gI基因类型第63-64页
 第五章 鸭瘟病毒体外感染宿主细胞gI基因的表达与定位第64-69页
  1. 材料第64页
   ·毒株/细胞第64页
   ·主要试剂第64页
   ·主要仪器设备第64页
  2. 方法第64-65页
   ·间接免疫荧光检测DPV gI蛋白在细胞中定位方法的建立第64页
   ·间接免疫荧光检测DPV gI蛋白在细胞中定位方法的优化第64-65页
   ·结果判定标准第65页
   ·DPV gI蛋白细胞定位的动态监测第65页
  3. 结果第65-67页
   ·间接免疫荧光检测DPV gI蛋白细胞定位方法的建立及优化第65页
   ·DPV gI蛋白细胞定位的动态监测第65-67页
  4. 讨论第67-69页
第三部分 结论第69-70页
参考文献第70-75页
致谢第75-76页
作者简介以及攻读硕士学位期间发表的学术论文第76页

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