| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| ·转录因子与植物叶片衰老 | 第13-14页 |
| ·AP2/EREBP 家族基因的一般特性 | 第14-15页 |
| ·AP2/EREBP 基因的分布与分类 | 第14-15页 |
| ·AP2/EREBP 基因的起源与进化 | 第15页 |
| ·ERF 基因的结构与功能 | 第15-17页 |
| ·ERF 基因的结构特征 | 第15-16页 |
| ·ERF 基因的功能 | 第16-17页 |
| ·转录因子下游靶基因研究方法 | 第17-19页 |
| ·通过转录因子表达水平变化鉴别靶基因 | 第17-18页 |
| ·通过转录因子特异结合的靶序列鉴别靶基因 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 陆地棉 GhERF7 和 GhERF8 全长基因的获得 | 第20-29页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·种植材料与取样 | 第20页 |
| ·生化试剂、酶和试剂盒 | 第20页 |
| ·载体和感受态细胞 | 第20页 |
| ·试验仪器和设备 | 第20-21页 |
| ·序列分析 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-25页 |
| ·RNA 提取与反转录 | 第21-22页 |
| ·序列拼接和引物设计 | 第22-23页 |
| ·PCR 扩增体系和程序 | 第23页 |
| ·片段回收与序列测定 | 第23-24页 |
| ·基因蛋白序列比对和构建系统发育树 | 第24-25页 |
| ·结果分析 | 第25-27页 |
| ·RNA 提取与反转录 | 第25页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第25-26页 |
| ·陆地棉转录因子 GhERF7 和 GhERF8 序列的蛋白序列比对 | 第26-27页 |
| ·系统进化树的构建 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 陆地棉 GhERF7 和 GhERF8 基因的表达谱分析 | 第29-36页 |
| ·前言 | 第29页 |
| ·试验材料 | 第29页 |
| ·棉花材料 | 第29页 |
| ·生化试剂、酶和试剂盒 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-30页 |
| ·数据处理分析 | 第29-30页 |
| ·RNA 提取与反转录 | 第30页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·荧光定量 PCR 体系与反应程序 | 第30页 |
| ·结果分析 | 第30-34页 |
| ·田间叶片叶绿素含量 | 第30-31页 |
| ·RNA 提取与反转录 | 第31页 |
| ·荧光定量 PCR 反应引物 | 第31-32页 |
| ·基因的表达谱分析 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 陆地棉 GhERF7 和 GhERF8 基因启动子序列克隆 | 第36-45页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·种植材料 | 第36页 |
| ·生化试剂、酶和试剂盒 | 第36页 |
| ·试验仪器和设备 | 第36页 |
| ·序列分析软件 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-39页 |
| ·基因特异性引物设计 | 第37页 |
| ·棉花基因组 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·热不对称 PCR 扩增启动子片段 | 第37-39页 |
| ·启动子片段的克隆测序 | 第39页 |
| ·结果分析 | 第39-44页 |
| ·基因特异性引物设计结果 | 第39-40页 |
| ·中棉所 10 叶片基因组 DNA 提取 | 第40页 |
| ·基因 5’侧翼序列片段获得 | 第40-41页 |
| ·基因 5’侧翼序列功能预测与分析 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 ERF 转录因子下游靶基因的调取与分析 | 第45-55页 |
| ·前言 | 第45页 |
| ·试验材料 | 第45页 |
| ·棉花材料 | 第45页 |
| ·生化试剂，酶和试剂盒 | 第45页 |
| ·试验仪器和设备 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-49页 |
| ·制备连接头基因组 DNA | 第45-46页 |
| ·六联组氨酸-GhERF7 重组蛋白表达、复性与纯化 | 第46-47页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白与连接头 DNA 的免疫沉淀反应 | 第48页 |
| ·PCR 扩增钓取的连接头基因组 DNA | 第48-49页 |
| ·片段回收，克隆与测序 | 第49页 |
| ·结果分析 | 第49-54页 |
| ·接头和引物设计 | 第49-50页 |
| ·基因组 DNA 酶切与接头连接 | 第50页 |
| ·pET28a-GhERF7 重组质粒构建 | 第50-51页 |
| ·六联组氨酸-GhERF7 重组蛋白表达纯化分析 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白与连接头 DNA 的免疫沉淀反应分析 | 第52-53页 |
| ·目的片段回收、克隆与测序 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第六章 全文结论与展望 | 第55-56页 |
| ·全文结论 | 第55页 |
| ·研究展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |
