通过DNA shuffling方法靶向乳腺癌细乳腺癌细胞的腺相关病毒
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 第一章 腺相关病毒应用于肿瘤基因治疗的研究进展 | 第13-21页 |
| 前言 | 第13页 |
| 1. 简介 | 第13-14页 |
| 2. AAV的生物学特性 | 第14-16页 |
| 3. AAV血清型 | 第16页 |
| 4. AAV载体的发展 | 第16-18页 |
| ·靶向受体和混合衣壳载体 | 第17页 |
| ·自补载体 | 第17-18页 |
| 5. 肿瘤基因治疗中的AAV载体 | 第18-19页 |
| ·抗血管生成治疗 | 第18-19页 |
| ·免疫疗法 | 第19页 |
| 6. 总结和展望 | 第19-21页 |
| 第二章 重组型AAV病毒基因库构建 | 第21-37页 |
| 1. 实验材料 | 第21-25页 |
| ·生化试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器与设备 | 第21-22页 |
| ·引物合成 | 第22-23页 |
| ·主要试剂配制 | 第23-25页 |
| 2. 实验方法 | 第25-31页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第25页 |
| ·质粒DNA大量提取 | 第25-26页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第26页 |
| ·酶切、连接 | 第26-27页 |
| ·DNA片段和载体的连接 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·DNaseⅠ随机酶切片段 | 第28-30页 |
| ·AAV基因文库构建 | 第30-31页 |
| ·pARep质粒的构建 | 第30页 |
| ·pARC载体构建(用于嵌合AAV基因) | 第30-31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·pARep质粒酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·通用质粒pAdB酶切鉴定 | 第32页 |
| ·DNA shuffling结果 | 第32-35页 |
| ·文库基因PCR鉴定 | 第35-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 嵌合型AAV病毒的包装以及筛选 | 第37-43页 |
| 1. 前言 | 第37-38页 |
| 2. 实验材料及方法 | 第38-40页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| 3 实验结果与分析 | 第40-41页 |
| ·AAV病毒包装优化 | 第40-41页 |
| ·嵌合型腺相关病毒检测 | 第41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 新型靶向细胞筛选及病毒感染能力检测 | 第43-49页 |
| 1. 实验方法 | 第43-45页 |
| ·嵌合型腺相关病毒DNA提取 | 第43页 |
| ·嵌合型病毒收集及再感染 | 第43页 |
| ·嵌合型腺相关病毒检测 | 第43-44页 |
| ·靶向感染病毒基因的检测 | 第44页 |
| ·靶向感染病毒基因比对 | 第44-45页 |
| 2. 实验结果及分析 | 第45-47页 |
| ·嵌合型腺相关病毒检测 | 第45页 |
| ·靶向感染病毒基因比对 | 第45-46页 |
| ·AAV感染效率检测 | 第46-47页 |
| 3. 讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 在学期间发表的文章 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
